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斑马鱼前肾突变体的遗传筛选及其机制研究

英文缩略词简表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·肾脏的结构与发育第12-16页
     ·肾脏的基本结构第12页
     ·肾脏的形态建成第12-13页
     ·肾脏发生的基因调控第13-16页
   ·肾脏的主要生理功能第16页
   ·肾脏相关的疾病第16-17页
     ·多囊肾病(Polycystic Kidney Disease,PKD)第16-17页
     ·肾消耗病(Nephronophthisis,NPHP)第17页
     ·足细胞病(Podocytopathies)第17页
   ·ENU诱变及正向遗传筛选第17-20页
第二章 引言第20-22页
第三章 材料与方法第22-40页
   ·斑马鱼的饲养第22页
   ·主要实验材料、仪器、试剂及耗材第22-27页
     ·实验仪器第22页
     ·材料与耗材第22-23页
     ·主要试剂及其配制第23-27页
   ·实验方法第27-40页
     ·斑马鱼基因组DNA的简单提取(Na OH裂解法)第27-28页
     ·斑马鱼基因组DNA的简单提取(NP40裂解法)第28页
     ·Taq DNA聚合酶的制备第28页
     ·DH5α感受态细胞的制备(MgCl2法)第28页
     ·斑马鱼总RNA的提取第28-29页
     ·斑马鱼cDNA第一链的合成第29-30页
     ·重组质粒的构建第30-32页
     ·mRNA的体外合成与纯化第32-34页
     ·RNA探针的制备第34页
     ·斑马鱼全胚原位杂交(Whole Mount in situ Hybridization)第34-36页
     ·碱性磷酸酶(AP)底物染色第36页
     ·斑马鱼胚胎的显微注射第36-37页
     ·PCR法引入点突变第37页
     ·斑马鱼正向遗传筛选第37-38页
     ·突变基因的图位克隆(positional cloning)第38-40页
第四章 实验结果与分析第40-56页
   ·斑马鱼前肾突变体遗传筛选结果第40-43页
     ·ENU诱变及F2家系的建立与筛选第40页
     ·F3代的筛选及传代第40页
     ·F4代筛选结果第40-41页
     ·F4突变体的表型分类第41页
     ·部分F4代突变体家系肾小球形态第41-43页
   ·L27突变体表型分析及图位克隆第43-50页
     ·L27突变体表型分析第43-48页
     ·L27突变基因的鉴定第48-50页
   ·lhx1a在斑马鱼前肾发育中的功能第50-56页
     ·lhx1a的时空表达模式第50页
     ·lhx1a缺失对斑马鱼前肾发育的影响第50-53页
     ·体外注射lhx1a mRNA不能挽救lhx1a-/-胚胎表型第53-56页
第五章 结论第56-58页
   ·斑马鱼前肾突变体的遗传筛选第56页
   ·lhx1a在斑马鱼前肾发育中的功能第56-58页
第六章 讨论第58-62页
   ·正向遗传筛选的优势及我们遇到的问题第58-59页
   ·图位克隆中遇到的问题第59页
   ·lhx1a在前肾发育中的功能第59-62页
参考文献第62-66页
附录第66-80页
致谢第80-82页
在读期间发表论文及参与课题第82页

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