肠外致病性大肠杆菌icmF基因功能研究和侵入脑微血管内皮细胞相关基因的筛选
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第8-9页 |
| 第1章 综述 | 第9-16页 |
| ·IV型分泌系统研究进展 | 第9-13页 |
| ·icmF基因研究进展 | 第9-10页 |
| ·T6SS其他结构蛋白 | 第10-11页 |
| ·T6SS分泌蛋白的挖掘 | 第11-12页 |
| ·T6SS的功能 | 第12-13页 |
| ·T6SS研究小结与展望 | 第13页 |
| ·大肠杆菌致脑膜炎的研究进展 | 第13-16页 |
| ·大肠杆菌引发脑膜炎的过程 | 第14页 |
| ·致脑膜炎大肠杆菌的毒力因子 | 第14-15页 |
| ·大肠杆菌致脑膜炎研究的小结与展望 | 第15-16页 |
| 第2章 肠外致病性大肠杆菌icmF基因的功能研究 | 第16-33页 |
| ·目的与意义 | 第16页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·菌株、细胞与质粒 | 第16页 |
| ·酶和相关试剂 | 第16-17页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·仪器和设备 | 第18-19页 |
| ·PCR引物 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·细菌培养和细菌基因组的提取 | 第19页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的构建与鉴定 | 第19-20页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的遗传稳定性 | 第20页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的生长特性 | 第20页 |
| ·运动能力检测 | 第20-21页 |
| ·生物被膜形成能力的检测 | 第21页 |
| ·耐药性评估 | 第21页 |
| ·粘附和侵入内皮细胞能力的检测 | 第21-22页 |
| ·抗巨噬细胞吞噬及吞噬后存活能力的检测 | 第22-23页 |
| ·巨噬细胞毒性的检测 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-30页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的构建与鉴定 | 第24页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的遗传稳定性 | 第24-25页 |
| ·基因缺失突变株 ΔicmF的生长特性 | 第25-26页 |
| ·细菌运动能力检测 | 第26页 |
| ·生物被膜形成能力检测 | 第26-27页 |
| ·耐药性测定 | 第27页 |
| ·粘附与侵入HBMEC能力的比较 | 第27-28页 |
| ·抗巨噬细胞吞噬及吞噬后存活能力检测 | 第28-29页 |
| ·巨噬细胞毒性检测 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| ·结论 | 第32-33页 |
| 第3章 RS218突破血脑屏障相关毒力因子的筛选 | 第33-45页 |
| ·目的与意义 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株、细胞与质粒 | 第33页 |
| ·酶和相关试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第33-34页 |
| ·PCR引物 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·突变体库的构建和质量检测 | 第34-35页 |
| ·突变株侵入HBMEC能力的初步筛选 | 第35页 |
| ·候选突变株生长能力的检测 | 第35页 |
| ·候选突变株侵入率的测定 | 第35-36页 |
| ·TAIL-PCR扩增Tn5侧翼序列 | 第36-37页 |
| ·突变位点定位 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·突变体库的构建和质量检测 | 第37-38页 |
| ·突变株侵入HBMEC能力分析 | 第38页 |
| ·候选突变株生长能力的检测 | 第38-39页 |
| ·候选突变株侵入率测定 | 第39-40页 |
| ·候选突变株突变位点的确定 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
