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OmpX过表达对肠外致病性大肠杆菌ΔtolC株生物被膜形成特性的影响

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词(ABBREVIATION)第11-13页
1 文献综述第13-24页
   ·肠外致病性大肠杆菌概述第13-16页
     ·大肠杆菌的简介和分类第13-14页
     ·肠外致病性大肠杆菌概述第14页
     ·肠外致病性大肠杆菌的流行病学分析第14页
     ·肠外致病性大肠杆菌的主要致病机制第14-15页
     ·肠外致病性大肠杆菌的诊断和防治第15-16页
     ·生物被膜概述第16-20页
       ·生物被膜概述及危害第16页
       ·生物被膜的形成过程及主要的参与因子第16-19页
     ·生物被膜形成的调节机制第19-20页
     ·大肠杆菌生物被膜的控制和清除第20页
     ·大肠杆菌外膜蛋白概述第20-24页
       ·外膜蛋白简介、结构、分类及功能第20-21页
       ·外膜蛋白Tol C概述第21-22页
     ·外膜蛋白Omp X概述第22-24页
2.研究目的和意义第24-25页
3.材料与方法第25-35页
   ·材料第25-28页
     ·菌株和质粒第25-26页
     ·主要试剂、试剂盒与仪器第26-27页
     ·主要培养基、抗生素及相关溶液的配置第27-28页
   ·方法第28-35页
     ·引物设计与合成第28-29页
     ·猪源Ex PEC的复苏增殖和基因组DNA提取第29页
     ·质粒的小量制备第29页
     ·电转感受态细胞的制备第29页
     ·WT::omp X和△tol C::omp X菌株的构建第29-30页
     ·试验菌株生长特性的测定第30页
     ·试验菌株对抗菌药物最小抑菌浓度(MIC)的测定第30-31页
     ·细胞黏附侵袭能力测定第31页
     ·巨噬细胞内存活能力测定第31页
     ·生物被膜形成能力测定第31-32页
     ·Curli合成能力的评价第32页
     ·高渗应激环境对生物被膜的形成能力的影响第32页
     ·Curli菌毛转录水平验证第32-33页
     ·q RT-PCR验证高渗条件Omp X的表达量第33-34页
     ·转录组分析差异基因第34页
     ·数据分析第34-35页
4.结果与分析第35-46页
   ·PPECC42全基因组测序第35页
   ·过表达菌株的构建并验证表达第35-36页
   ·生长特性评价测定第36-37页
     ·遗传稳定性评价第36-37页
     ·生长曲线测定第37页
   ·最小抑菌浓度(MIC)测定第37-38页
   ·细胞黏附侵袭能力分析第38页
   ·巨噬细胞内存活能力分析第38-39页
   ·生物被膜形成能力分析第39-42页
     ·生物被膜形成能力分析第39-40页
     ·高渗应激对生物被膜形成的影响第40页
     ·Curli合成能力评价第40-41页
     ·q RT-PCR验证Curli合成相关基因csg D和csg B的转录表达第41-42页
   ·q RT-PCR检测高渗条件下Omp X的表达量第42页
   ·转录组分析差异基因第42-46页
     ·差异基因表达分析第42-43页
     ·靶标差异基因的筛选第43-46页
5 讨论第46-49页
   ·Omp X与Tol C相互作用调节细菌抗渗透应激和生物被膜的形成第46页
   ·转录组学测序寻找在生物被膜和抗渗透方面的差异基因第46-47页
   ·差异基因cpx P和bhs A在生物被膜和抗渗透方面的功能第47-49页
6 结论第49-50页
参考文献第50-61页
附录第61-62页
致谢第62页

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