| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 主要缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·GLA简介 | 第9-12页 |
| ·多不饱和脂肪酸的结构与分类 | 第9页 |
| ·GLA的合成及代谢 | 第9-10页 |
| ·GLA的生理功能 | 第10-11页 |
| ·GLA的来源 | 第11-12页 |
| ·生物合成GLA的研究概况 | 第12页 |
| ·产油真菌卷枝毛霉 | 第12-14页 |
| ·产油微生物简介 | 第12-13页 |
| ·卷枝毛霉简介 | 第13页 |
| ·卷枝毛霉的研究概况 | 第13-14页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶 | 第14-16页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶简介 | 第14-15页 |
| ·Δ6 脂肪酸脱饱和酶 | 第15-16页 |
| ·Δ12 脂肪酸脱饱和酶 | 第16页 |
| ·丝状真菌的基因工程改造 | 第16-17页 |
| ·立题依据与主要研究内容 | 第17-19页 |
| ·立题依据 | 第17-18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·质粒 | 第19-20页 |
| ·引物的合成与测序 | 第20-21页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·卷枝毛霉 Δ 12、Δ 6 脂肪酸脱饱和酶基因片段的获得及亚克隆构建 | 第22-24页 |
| ·表达载体构建 | 第24-26页 |
| ·卷枝毛霉转化及验证 | 第26-28页 |
| ·表达水平检测 | 第28-29页 |
| ·共表达 Δ12 与 Δ6-1 脂肪酸脱饱和酶 | 第29-30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-46页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·卷枝毛霉基因组提取和检验 | 第30页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶基因的克隆 | 第30页 |
| ·表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·卷枝毛霉的转化及验证 | 第32-37页 |
| ·原生质体制备 | 第32-33页 |
| ·电击转化条件的改进 | 第33页 |
| ·卷枝毛霉重组菌株的PCR验证 | 第33-34页 |
| ·转化子筛选 | 第34-36页 |
| ·转录水平分析 | 第36-37页 |
| ·重组菌株的生长及脂肪酸分析 | 第37-46页 |
| ·亮氨酸合成对总脂肪酸的影响 | 第37-38页 |
| ·过表达 Δ12 脂肪酸脱饱和酶对GLA产量的影响 | 第38-40页 |
| ·两种 Δ6 脂肪酸脱饱和酶的比较及其分别过表达对GLA产量的影响 | 第40-42页 |
| ·Δ12 和 Δ6 脂肪酸脱饱和酶共表达 | 第42-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
