摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-19页 |
1 木薯在生产上的意义和概况 | 第12-13页 |
·木薯栽培现状 | 第12页 |
·木薯是一种重要的能源作物 | 第12-13页 |
2 病害是制约木薯产业发展的重要因素之一 | 第13-14页 |
3 木薯细菌性枯萎病研究现状 | 第14-16页 |
4 植物与病原微生物的互作研究 | 第16-17页 |
·植物免疫系统相关研究 | 第16页 |
·病原引发的免疫反应 | 第16-17页 |
5 本项目的目的与意义 | 第17-18页 |
6技术路线 | 第18-19页 |
第二章 木薯病原菌的分离和鉴定 | 第19-41页 |
1. 材料与方法 | 第19-24页 |
·试验材料 | 第19页 |
·药品和试剂 | 第19页 |
·主要设备与仪器 | 第19页 |
·方法 | 第19-23页 |
·病原菌的分离与纯化 | 第19页 |
·病原菌的致病性检测 | 第19-20页 |
·病原菌的病原学检测 | 第20页 |
·木薯黄单胞菌基因组DNA的制备 | 第20-21页 |
·分离菌株的分子检测 | 第21-23页 |
·分离的XamHN04号病原菌全基因组survey测序 | 第23-24页 |
·基因组测序结果的PCR验证 | 第24页 |
2 实验结果 | 第24-39页 |
·病原菌的分离与纯化 | 第24-25页 |
·病原菌致病性检测 | 第25页 |
·病原菌的染色反应 | 第25页 |
·病原菌的生理生化测定 | 第25-27页 |
·淀粉水解试验 | 第25-26页 |
·病原菌的明胶液化实验 | 第26页 |
·病原菌的产硫化氢实验 | 第26-27页 |
·病原菌的分子鉴定 | 第27-29页 |
·病原菌基因组DNA提取电泳检测 | 第27页 |
·利用16s rDNA引物对病原菌基因组扩增电泳检测 | 第27-29页 |
·所分离的XamHN04号小种的基因组survey测序及结果分析 | 第29-33页 |
·比较基因组学分析 | 第33-38页 |
·XamHN04菌株Hrp基因族的PCR验证 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第三章 木薯PTI途径相关基因的分离和鉴定 | 第41-59页 |
1 材料与方法 | 第42-49页 |
·试验材料 | 第42-43页 |
·药品和试剂 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-49页 |
·木薯叶片总RNA的提取 | 第43页 |
·反转录RNA | 第43-44页 |
·引物设计 | 第44-45页 |
·RT-PCR扩增候选基因的全长CDs序列 | 第45页 |
·候选基因的诱导表达分析 | 第45页 |
·载体构建 | 第45-46页 |
·拟南芥同源基因突变体的遗传互补 | 第46-49页 |
·转基因拟南芥的获得及鉴定 | 第49页 |
2 结果与分析 | 第49-57页 |
·木薯叶片总RNA提取方法筛选 | 第49-50页 |
·8个候选基因全长片段的克隆及生物信息学分析 | 第50-51页 |
·MeBIK1基因的诱导表达分析 | 第51页 |
·MeBIK1基因原生质体瞬时表达载体的构建 | 第51-52页 |
·MeBIK1基因在拟南芥原生质体中的表达检测 | 第52页 |
·MeBIK1基因对植物细胞PTI的影响 | 第52-53页 |
·植物过表达载体的构建 | 第53-55页 |
·过表达载体结构图28 | 第53页 |
·过表达载体的鉴定 | 第53-54页 |
·植物过表达载体农杆菌转化子的鉴定 | 第54-55页 |
·拟南芥的遗传转化及转基因苗的筛选 | 第55-57页 |
·抗性筛选 | 第55页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第55-56页 |
·转基因拟南芥的荧光检测结果 | 第56-57页 |
·转基因拟南芥接种病原菌pstDC3000 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
第四章 结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录 | 第66-76页 |
致谢 | 第76页 |