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木薯细菌性枯萎病菌的分离鉴定与PTI途径相关基因的克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 前言第12-19页
 1 木薯在生产上的意义和概况第12-13页
   ·木薯栽培现状第12页
   ·木薯是一种重要的能源作物第12-13页
 2 病害是制约木薯产业发展的重要因素之一第13-14页
 3 木薯细菌性枯萎病研究现状第14-16页
 4 植物与病原微生物的互作研究第16-17页
   ·植物免疫系统相关研究第16页
   ·病原引发的免疫反应第16-17页
 5 本项目的目的与意义第17-18页
 6技术路线第18-19页
第二章 木薯病原菌的分离和鉴定第19-41页
 1. 材料与方法第19-24页
   ·试验材料第19页
     ·药品和试剂第19页
     ·主要设备与仪器第19页
   ·方法第19-23页
     ·病原菌的分离与纯化第19页
     ·病原菌的致病性检测第19-20页
     ·病原菌的病原学检测第20页
     ·木薯黄单胞菌基因组DNA的制备第20-21页
     ·分离菌株的分子检测第21-23页
   ·分离的XamHN04号病原菌全基因组survey测序第23-24页
   ·基因组测序结果的PCR验证第24页
 2 实验结果第24-39页
   ·病原菌的分离与纯化第24-25页
   ·病原菌致病性检测第25页
   ·病原菌的染色反应第25页
   ·病原菌的生理生化测定第25-27页
     ·淀粉水解试验第25-26页
     ·病原菌的明胶液化实验第26页
     ·病原菌的产硫化氢实验第26-27页
   ·病原菌的分子鉴定第27-29页
     ·病原菌基因组DNA提取电泳检测第27页
     ·利用16s rDNA引物对病原菌基因组扩增电泳检测第27-29页
   ·所分离的XamHN04号小种的基因组survey测序及结果分析第29-33页
   ·比较基因组学分析第33-38页
   ·XamHN04菌株Hrp基因族的PCR验证第38-39页
 3 讨论第39-41页
第三章 木薯PTI途径相关基因的分离和鉴定第41-59页
 1 材料与方法第42-49页
   ·试验材料第42-43页
   ·药品和试剂第43页
   ·实验方法第43-49页
     ·木薯叶片总RNA的提取第43页
     ·反转录RNA第43-44页
     ·引物设计第44-45页
     ·RT-PCR扩增候选基因的全长CDs序列第45页
     ·候选基因的诱导表达分析第45页
     ·载体构建第45-46页
     ·拟南芥同源基因突变体的遗传互补第46-49页
     ·转基因拟南芥的获得及鉴定第49页
 2 结果与分析第49-57页
   ·木薯叶片总RNA提取方法筛选第49-50页
   ·8个候选基因全长片段的克隆及生物信息学分析第50-51页
   ·MeBIK1基因的诱导表达分析第51页
   ·MeBIK1基因原生质体瞬时表达载体的构建第51-52页
   ·MeBIK1基因在拟南芥原生质体中的表达检测第52页
   ·MeBIK1基因对植物细胞PTI的影响第52-53页
   ·植物过表达载体的构建第53-55页
     ·过表达载体结构图28第53页
     ·过表达载体的鉴定第53-54页
     ·植物过表达载体农杆菌转化子的鉴定第54-55页
   ·拟南芥的遗传转化及转基因苗的筛选第55-57页
     ·抗性筛选第55页
     ·转基因植株的PCR鉴定第55-56页
     ·转基因拟南芥的荧光检测结果第56-57页
     ·转基因拟南芥接种病原菌pstDC3000第57页
 3 讨论第57-59页
第四章 结论第59-61页
参考文献第61-66页
附录第66-76页
致谢第76页

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