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橡胶树叶片受多主棒孢侵染后的差异表达基因分析及其抗病性相关基因的克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-11页
上篇 文献综述第11-34页
 第一章 天然橡胶产业现状第11-12页
 第二章 橡胶树棒孢霉落叶病第12-14页
  2 橡胶树棒孢霉落叶病的为害情况及致病机理第12-14页
   ·橡胶树棒孢霉落叶病的为害特点第12页
   ·橡胶树棒孢霉落叶病的致病性关键因子第12-14页
 第三章 植物抗病分子机制研究第14-22页
  3 植物防御反应第14-22页
   ·植物抗病防御反应的激素信号转导途径第14-19页
   ·橡胶树抗病机制第19-22页
 第四章 植物基因差异表达的分子生物学研究方法第22-27页
  4 植物差异表达基因的分离技术第22-27页
   ·RNA-SEQ新一代测序技术第22-23页
   ·抑制差减杂交(SSH)技术第23页
   ·MRNA差异显示技术(DDRT-PCR)第23-24页
   ·cDNA-AFLP技术第24-27页
 第五章 蛋白质分析技术及应用第27-33页
  5 蛋白组学及植物蛋白组学研究第27-33页
   ·蛋白质分析技术第28-31页
   ·差异蛋白组学及其研究策略第31-32页
   ·蛋白质分析技术在植物与病原菌互作研究中的应用第32-33页
 第六章 本研究的目的与意义第33-34页
下篇 研究内容第34-116页
 第一章 橡胶树棒孢霉落叶病病情调查第34-42页
   ·材料与方法第34页
     ·材料第34页
     ·方法第34页
       ·橡胶树棒孢霉落叶病疫情调查第34页
       ·橡胶树棒孢霉落叶病发生情况调查第34页
   ·结果第34-41页
     ·橡胶树棒孢霉落叶病疫情第34-38页
     ·橡胶树棒孢霉落叶病病害消长动态调查第38-41页
       ·橡胶苗圃地病情发生情况统计第38-39页
       ·橡胶开割林地病情发生情况统计第39-41页
   ·讨论第41-42页
 第二章 橡胶树抗感品种(种质)的筛选及其防御酶活性变化的测定第42-63页
   ·材料与方法第42-50页
     ·材料第42-43页
     ·方法第43-50页
       ·橡胶树抗感品种(品系)的筛选第43-45页
       ·橡胶树抗感品种受多主棒孢侵染后防御酶活性变化的测定第45-50页
   ·结果第50-61页
     ·抗感品种(品系)的筛选第50-57页
       ·菌饼穿刺法测定结果第50页
       ·孢子液点接法测定结果第50-51页
       ·毒素生物萎蔫法测定结果第51-52页
       ·大田喷雾接种法测定结果第52-54页
       ·优良品系云研277-5×抗病品种IAN873杂交后代群体抗病性筛选第54-57页
     ·抗感品种受多主棒孢侵染后防御酶活性变化的测定第57-61页
       ·β-1,3-葡聚糖酶活性变化测定第57-58页
       ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化测定第58-59页
       ·过氧化物酶(POD)活性变化测定第59-60页
       ·多酚氧化酶(PPO)活性变化测定第60-61页
   ·讨论第61-63页
 第三章 橡胶树抗感品种受多主棒孢侵染后的差异表达基因分析第63-87页
   ·材料与方法第63-75页
     ·材料第63页
     ·方法第63-75页
       ·材料处理及其总RNA的提取第63-65页
       ·cDNA合成第65-66页
       ·限制性酶切及接头连接第66-68页
       ·预扩增第68页
       ·选择性扩增第68-69页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第69-70页
       ·差异表达片段的克隆与序列分析第70-72页
       ·差异表达基因的荧光定量PCR验证第72-75页
   ·结果第75-85页
     ·总RNA纯度及完整性检测第75-76页
     ·cDNA合成第76页
     ·预扩增第76页
     ·选择性扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳第76-78页
     ·差异表达片段(DE-TDFs)的回收及二次扩增第78页
     ·差异表达片段(DE-TDFs)的同源注释和聚类分析第78-79页
     ·差异表达片段(DE-TDFs)的功能分类及统计第79-84页
     ·差异表达片段(DE-TDFs)表达模式的qRT-PCR分析第84-85页
   ·讨论第85-87页
 第四章 橡胶树抗病性相关基因的克隆与表达分析第87-104页
   ·材料与方法第87-89页
     ·材料第87页
     ·方法第87-89页
       ·cDNA-AFLP差异片段基因预测第87页
       ·抗病品种叶片组织总DNA和RNA的提取第87页
       ·目的基因的克隆与序列分析第87-88页
       ·目的基因在抗感品种受多主棒孢侵染后的差异表达分析第88-89页
   ·结果第89-102页
     ·橡胶树HbNPR1基因的克隆与序列分析第89-91页
     ·橡胶树HbVSP2基因的克隆与序列分析第91-93页
     ·橡胶树HbRGH2基因的克隆及序列分析第93-96页
     ·橡胶树HbRGA-1基因的克隆及序列分析第96-98页
     ·qRT-PCR分析抗病相关基因的表达特性第98-102页
       ·抗、感橡胶叶片受多主棒孢侵染后的抗病性相关基因的表达第98-99页
       ·不同外源激素处理下抗病基因的表达特性第99-101页
       ·抗病相关基因的组成型表达特性第101-102页
   ·讨论第102-104页
 第五章 橡胶树抗病品种受多主棒孢侵染后的差异蛋白初探第104-116页
   ·材料与方法第104-109页
     ·材料第104页
     ·方法第104-109页
       ·叶片组织总蛋白提取第104-105页
       ·蛋白质双向电泳第105-106页
       ·凝胶染色及图像扫描采集第106页
       ·凝胶蛋白点检测及差异统计分析第106-107页
       ·蛋白点胶内酶解及MALDI-TOF MS质谱分析第107-108页
       ·质谱数据库搜索及生物学功能预测第108-109页
   ·结果第109-112页
     ·不同侵染时期蛋白1-DE及2-DE电泳结果第109-110页
     ·不同侵染时期蛋白1-DE及2-DE电泳结果第110页
     ·蛋白点胶内酶解及MALDI-TOF MS质谱分析第110-111页
     ·差异蛋白生物学功能预测第111-112页
   ·讨论第112-116页
     ·参与防御与胁迫相关的蛋白第112-113页
     ·参与能量的产生和代谢相关的蛋白第113-114页
     ·参与碳水化合物的合成和转运相关的蛋白第114页
     ·其他功能的蛋白第114-116页
结论第116-118页
参考文献第118-129页
附录一第129-131页
附录二第131-135页
缩略语第135-136页
攻读硕士期间发表的文章、参编著作及成果第136-137页
致谢第137页

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