摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-34页 |
第一章 天然橡胶产业现状 | 第11-12页 |
第二章 橡胶树棒孢霉落叶病 | 第12-14页 |
2 橡胶树棒孢霉落叶病的为害情况及致病机理 | 第12-14页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病的为害特点 | 第12页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病的致病性关键因子 | 第12-14页 |
第三章 植物抗病分子机制研究 | 第14-22页 |
3 植物防御反应 | 第14-22页 |
·植物抗病防御反应的激素信号转导途径 | 第14-19页 |
·橡胶树抗病机制 | 第19-22页 |
第四章 植物基因差异表达的分子生物学研究方法 | 第22-27页 |
4 植物差异表达基因的分离技术 | 第22-27页 |
·RNA-SEQ新一代测序技术 | 第22-23页 |
·抑制差减杂交(SSH)技术 | 第23页 |
·MRNA差异显示技术(DDRT-PCR) | 第23-24页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第24-27页 |
第五章 蛋白质分析技术及应用 | 第27-33页 |
5 蛋白组学及植物蛋白组学研究 | 第27-33页 |
·蛋白质分析技术 | 第28-31页 |
·差异蛋白组学及其研究策略 | 第31-32页 |
·蛋白质分析技术在植物与病原菌互作研究中的应用 | 第32-33页 |
第六章 本研究的目的与意义 | 第33-34页 |
下篇 研究内容 | 第34-116页 |
第一章 橡胶树棒孢霉落叶病病情调查 | 第34-42页 |
·材料与方法 | 第34页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病疫情调查 | 第34页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病发生情况调查 | 第34页 |
·结果 | 第34-41页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病疫情 | 第34-38页 |
·橡胶树棒孢霉落叶病病害消长动态调查 | 第38-41页 |
·橡胶苗圃地病情发生情况统计 | 第38-39页 |
·橡胶开割林地病情发生情况统计 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第二章 橡胶树抗感品种(种质)的筛选及其防御酶活性变化的测定 | 第42-63页 |
·材料与方法 | 第42-50页 |
·材料 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-50页 |
·橡胶树抗感品种(品系)的筛选 | 第43-45页 |
·橡胶树抗感品种受多主棒孢侵染后防御酶活性变化的测定 | 第45-50页 |
·结果 | 第50-61页 |
·抗感品种(品系)的筛选 | 第50-57页 |
·菌饼穿刺法测定结果 | 第50页 |
·孢子液点接法测定结果 | 第50-51页 |
·毒素生物萎蔫法测定结果 | 第51-52页 |
·大田喷雾接种法测定结果 | 第52-54页 |
·优良品系云研277-5×抗病品种IAN873杂交后代群体抗病性筛选 | 第54-57页 |
·抗感品种受多主棒孢侵染后防御酶活性变化的测定 | 第57-61页 |
·β-1,3-葡聚糖酶活性变化测定 | 第57-58页 |
·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化测定 | 第58-59页 |
·过氧化物酶(POD)活性变化测定 | 第59-60页 |
·多酚氧化酶(PPO)活性变化测定 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第三章 橡胶树抗感品种受多主棒孢侵染后的差异表达基因分析 | 第63-87页 |
·材料与方法 | 第63-75页 |
·材料 | 第63页 |
·方法 | 第63-75页 |
·材料处理及其总RNA的提取 | 第63-65页 |
·cDNA合成 | 第65-66页 |
·限制性酶切及接头连接 | 第66-68页 |
·预扩增 | 第68页 |
·选择性扩增 | 第68-69页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第69-70页 |
·差异表达片段的克隆与序列分析 | 第70-72页 |
·差异表达基因的荧光定量PCR验证 | 第72-75页 |
·结果 | 第75-85页 |
·总RNA纯度及完整性检测 | 第75-76页 |
·cDNA合成 | 第76页 |
·预扩增 | 第76页 |
·选择性扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第76-78页 |
·差异表达片段(DE-TDFs)的回收及二次扩增 | 第78页 |
·差异表达片段(DE-TDFs)的同源注释和聚类分析 | 第78-79页 |
·差异表达片段(DE-TDFs)的功能分类及统计 | 第79-84页 |
·差异表达片段(DE-TDFs)表达模式的qRT-PCR分析 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
第四章 橡胶树抗病性相关基因的克隆与表达分析 | 第87-104页 |
·材料与方法 | 第87-89页 |
·材料 | 第87页 |
·方法 | 第87-89页 |
·cDNA-AFLP差异片段基因预测 | 第87页 |
·抗病品种叶片组织总DNA和RNA的提取 | 第87页 |
·目的基因的克隆与序列分析 | 第87-88页 |
·目的基因在抗感品种受多主棒孢侵染后的差异表达分析 | 第88-89页 |
·结果 | 第89-102页 |
·橡胶树HbNPR1基因的克隆与序列分析 | 第89-91页 |
·橡胶树HbVSP2基因的克隆与序列分析 | 第91-93页 |
·橡胶树HbRGH2基因的克隆及序列分析 | 第93-96页 |
·橡胶树HbRGA-1基因的克隆及序列分析 | 第96-98页 |
·qRT-PCR分析抗病相关基因的表达特性 | 第98-102页 |
·抗、感橡胶叶片受多主棒孢侵染后的抗病性相关基因的表达 | 第98-99页 |
·不同外源激素处理下抗病基因的表达特性 | 第99-101页 |
·抗病相关基因的组成型表达特性 | 第101-102页 |
·讨论 | 第102-104页 |
第五章 橡胶树抗病品种受多主棒孢侵染后的差异蛋白初探 | 第104-116页 |
·材料与方法 | 第104-109页 |
·材料 | 第104页 |
·方法 | 第104-109页 |
·叶片组织总蛋白提取 | 第104-105页 |
·蛋白质双向电泳 | 第105-106页 |
·凝胶染色及图像扫描采集 | 第106页 |
·凝胶蛋白点检测及差异统计分析 | 第106-107页 |
·蛋白点胶内酶解及MALDI-TOF MS质谱分析 | 第107-108页 |
·质谱数据库搜索及生物学功能预测 | 第108-109页 |
·结果 | 第109-112页 |
·不同侵染时期蛋白1-DE及2-DE电泳结果 | 第109-110页 |
·不同侵染时期蛋白1-DE及2-DE电泳结果 | 第110页 |
·蛋白点胶内酶解及MALDI-TOF MS质谱分析 | 第110-111页 |
·差异蛋白生物学功能预测 | 第111-112页 |
·讨论 | 第112-116页 |
·参与防御与胁迫相关的蛋白 | 第112-113页 |
·参与能量的产生和代谢相关的蛋白 | 第113-114页 |
·参与碳水化合物的合成和转运相关的蛋白 | 第114页 |
·其他功能的蛋白 | 第114-116页 |
结论 | 第116-118页 |
参考文献 | 第118-129页 |
附录一 | 第129-131页 |
附录二 | 第131-135页 |
缩略语 | 第135-136页 |
攻读硕士期间发表的文章、参编著作及成果 | 第136-137页 |
致谢 | 第137页 |