| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| ·褐飞虱的危害及其研究进展 | 第10-11页 |
| ·细胞凋亡及其机制 | 第11-12页 |
| ·细胞凋亡抑制蛋白(IAPs)研究概况 | 第12-14页 |
| ·细胞凋亡抑制蛋白IAPs的发现 | 第12-13页 |
| ·细胞凋亡抑制蛋白IAPs的结构及生物学特征 | 第13-14页 |
| ·IAPs抑制细胞凋亡的机制 | 第14-17页 |
| ·IAPs蛋白调节细胞凋亡的作用 | 第14-15页 |
| ·IAPs蛋白调节泛素化的过程 | 第15-16页 |
| ·IAPs蛋白和IAPs抑制蛋白 | 第16页 |
| ·IAPs的其它作用 | 第16-17页 |
| ·RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术原理 | 第17-19页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术 | 第19页 |
| ·定量RT-PCR的概念 | 第19页 |
| ·定量RT-PCR的原理 | 第19页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第19-20页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 褐飞虱IAP2基因的克隆 | 第21-38页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第21-23页 |
| ·供试昆虫 | 第21页 |
| ·菌株、质粒载体 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·常用试剂溶液 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·扩增IAP2基因所需cDNA的获得 | 第23-24页 |
| ·IAP2简并引物设计及合成 | 第24-25页 |
| ·褐飞虱cDNA核心片段的克隆和测序 | 第25-27页 |
| ·IAP2基因特异引物(Gene-Specific Primer)的设计及合成 | 第27页 |
| ·快速扩增IAP2基因的cDNA末端(RACE) | 第27-29页 |
| ·IAP2基因的生物信息学分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-38页 |
| ·褐飞虱总RNA的提取与检测 | 第30页 |
| ·IAP2基因的cDNA核心片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·褐飞虱IAP2基因全长cDNA扩增及生物信息学分析 | 第31-38页 |
| 第三章 褐飞虱L4P2基因表达差异分析 | 第38-44页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·供试昆虫组织材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·褐飞虱不同组织中总RNA的提取 | 第38页 |
| ·褐飞虱mRNA的反转录 | 第38页 |
| ·褐飞虱IAP2实时定量PCR引物的设计与合成 | 第38-39页 |
| ·IAP2实时定量PCR反应体系的配置及扩增效率分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-44页 |
| ·褐飞虱不同组织总RNA的提取与检测 | 第40页 |
| ·IAP2实时定量PCR扩增曲线的获得及分析 | 第40-43页 |
| ·褐飞虱IAP2表达差异分析 | 第43-44页 |
| 第四章 褐飞虱IAP2大肠杆菌表达载体构建和Western blot检测 | 第44-53页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·菌株与载体 | 第44页 |
| ·主要培养基 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·常用试剂溶液配制 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·褐飞虱IAP2表达序列的克隆 | 第46页 |
| ·IAP2表达载体的构建过程 | 第46-48页 |
| ·IAP2基因在BL21菌株中的初步表达与鉴定 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·IAP2表达序列的克隆与表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·IAP2在大肠杆菌中的表达检测 | 第51-53页 |
| 讨论与展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
