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褐飞虱细胞色素P450基因CYP6CW1异源表达及其酶学活性初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 绪论第10-17页
   ·褐飞虱的研究进展第10-11页
   ·昆虫P450基因的研究进展第11-12页
   ·BAC-TO-BAC昆虫杆状病毒表达系统第12-15页
   ·课题的研究目的与意义第15-17页
第二章 褐飞虱CYP6CW1和家蝇NCPR基因的重组杆状病毒载体构建第17-31页
   ·实验材料、试剂、仪器第17-20页
     ·供试昆虫第17页
     ·菌株、质粒载体第17页
     ·药品试剂第17页
     ·培养基第17-18页
     ·常用试剂溶液第18-19页
     ·主要仪器第19-20页
   ·实验方法第20-27页
     ·褐飞虱和家蝇总RNA的提取第20-21页
     ·mRNA的反转录第21页
     ·特异性引物设计及合成第21-22页
     ·克隆CYP6CW1和NCPR基因片段第22-25页
     ·MH-CYP6CW1、MH-NCPR重组质粒的构建第25-26页
     ·重组杆状病毒穿梭载体的构建第26-27页
   ·实验结果第27-31页
     ·褐飞虱和家蝇的总RNA的提取与检测第27-28页
     ·褐飞虱CYP6CW1基因和果蝇NCPR基因片段的扩增第28-29页
     ·MH-CYP6CW1、MH-NCPR重组质粒的构建第29页
     ·重组杆状病毒穿梭载体的构建第29-31页
第三章 褐飞虱CYP6CW1和家蝇NCPR基因的重组蛋白表达及初步活性鉴定第31-43页
   ·实验材料、试剂、仪器第31-33页
     ·细胞株第31页
     ·药品试剂第31页
     ·主要仪器第31页
     ·培养基第31-32页
     ·常用试剂溶液第32-33页
   ·实验方法第33-37页
     ·昆虫Sf9细胞的培养第33页
     ·CYP6CW1、NCPR重组病毒的制备第33页
     ·重组病毒的扩增、收集病毒第33-34页
     ·Western印记杂交鉴定蛋白表达第34-35页
     ·mRNA水平验证CYP6CW1和NCPR的转录第35-36页
     ·褐飞虱CYP6CW1和家蝇NCPR基因共蛋白表达第36-37页
     ·重组蛋白的活性初步鉴定第37页
   ·实验结果第37-43页
     ·mRNA水平验证CYP6CW1和NCPR的转录第37-38页
     ·Western印记杂交鉴定蛋白表达第38-39页
     ·Western印记杂交检测CYP6CW1和NCPR蛋白的共表达第39-40页
     ·褐飞虱细胞色素P450 CYP6CW1重组蛋白的活性初步鉴定第40-43页
讨论与展望第43-45页
参考文献第45-51页
致谢第51页

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