| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩略词中英文对照 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-41页 |
| 1 汉赛巴尔通体研究进展 | 第14-39页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·流行病学 | 第15-21页 |
| ·感染宿主 | 第16-20页 |
| ·传播媒介 | 第20-21页 |
| ·致病性 | 第21-31页 |
| ·致病机制 | 第31-36页 |
| ·诊断与治疗 | 第36-39页 |
| 2 研究的目的与意义 | 第39-41页 |
| 第二章 CFDA-SE标记示踪汉赛巴尔通体胞内感染 | 第41-52页 |
| 1. 材料 | 第41-42页 |
| ·菌株与细胞 | 第41页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·试剂的配制 | 第42页 |
| 2. 方法 | 第42-45页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染健康人红细胞 | 第42-44页 |
| ·汉赛巴尔通体的培养 | 第42页 |
| ·CFDA-SE标记汉赛巴尔通体 | 第42-43页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染红细胞 | 第43页 |
| ·荧光显微镜观察 CFDA-SE 标记的细菌感染红细胞效果 | 第43页 |
| ·透射电镜观察细菌粘附与入侵红细胞 | 第43页 |
| ·庆大霉素保护实验观察细菌粘附与入侵红细胞 | 第43页 |
| ·流式细胞仪观察巴尔通体对红细胞的感染 | 第43-44页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染 HeLa 细胞 | 第44-45页 |
| ·HeLa细胞的培养 | 第44页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染 HeLa 细胞 | 第44页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 CFDA-SE 标记的细菌感染 HeLa 细胞 | 第44页 |
| ·流式细胞仪观察标记的细菌感染 HeLa 细胞 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-50页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染健康人红细胞 | 第45-48页 |
| ·CFDA-SE对汉赛巴尔通体标记效率的测定 | 第45-46页 |
| ·CFDA-SE标记汉赛巴尔通体感染红细胞荧光显微镜观察 | 第46页 |
| ·透射电镜观察细菌粘附与入侵红细胞 | 第46-47页 |
| ·庆大霉素保护实验观察细菌粘附与入侵红细胞的情况 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术鉴定巴尔通体对红细胞的感染 | 第48页 |
| ·CFDA-SE 标记的汉赛巴尔通体感染HeLa细胞 | 第48-50页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察CFDA-SE标记细菌感染 HeLa 细胞 | 第48-49页 |
| ·CFDA-SE 标记巴尔通体感染 HeLa 细胞的流式细胞术检测结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 细胞骨架蛋白与汉赛巴尔通体胞内感染机制相关性研究 | 第52-97页 |
| 第一节 汉赛巴尔通体与宿主细胞互作蛋白的筛选 | 第52-68页 |
| 1 材料 | 第52-54页 |
| ·实验菌株与细胞 | 第52页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第52-54页 |
| 2 方法 | 第54-60页 |
| ·生物素标记汉赛巴尔通体细胞表面膜蛋白 | 第54页 |
| ·HeLa 细胞膜蛋白的提取 | 第54-55页 |
| ·生物素标记汉赛巴尔通体外膜蛋白的提取 | 第55页 |
| ·生物素标记巴尔通体膜蛋白效果检测 | 第55-57页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第55-57页 |
| ·Western Blot | 第57页 |
| ·生物素化蛋白相互作用 Pull-Down 检测 | 第57-58页 |
| ·胶块脱色及酶切 | 第58-59页 |
| ·LC-MS/MS 串联质谱分析 | 第59-60页 |
| 3 结果 | 第60-66页 |
| ·汉赛巴尔通体外膜蛋白 SDS-PAGE 电泳图 | 第60页 |
| ·Western Blot检测生物素对汉赛巴尔通体外膜蛋白的标记效果 | 第60-61页 |
| ·Pull-Down法筛选与生物素化菌膜蛋白互作的蛋白 | 第61-62页 |
| ·串联质谱分析结果 | 第62-64页 |
| ·互作蛋白功能分析 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第二节 汉赛巴尔通体感染与细胞骨架蛋白表达及重排相关性研究 | 第68-85页 |
| 1 材料 | 第68-69页 |
| ·菌株与细胞 | 第68页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-75页 |
| ·实时定量荧光PCR在mRNA水平检测汉赛巴尔通体感染对细胞骨架蛋白基因表达量的影响 | 第69-72页 |
| ·引物的设计与合成 | 第69页 |
| ·HeLa 细胞的培养 | 第69-70页 |
| ·汉赛巴尔通体的培养 | 第70页 |
| ·汉赛巴尔通体感染 HeLa 细胞 | 第70页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第70页 |
| ·cDNA 的合成 | 第70-71页 |
| ·荧光定量 PCR | 第71页 |
| ·数据处理及统计分析 | 第71-72页 |
| ·Western Blot在蛋白水平分析汉赛巴尔通体感染与细胞骨架蛋白表达的的相关性研究 | 第72-73页 |
| ·汉赛巴尔通体感染与细胞骨架蛋白重排的相关性研究 | 第73-75页 |
| ·HeLa细胞的培养 | 第73页 |
| ·CFDA-SE标记汉赛巴尔通体 | 第73页 |
| ·CFDA-SE标记的汉赛巴尔通体感染 HeLa 细胞 | 第73页 |
| ·荧光显微镜观察标记巴尔通体感染细胞后细胞骨架的变化 | 第73-74页 |
| ·细胞骨架角蛋白中间纤维的荧光染色 | 第73-74页 |
| ·细胞骨架微丝 F-actin 的荧光染色 | 第74页 |
| ·整装细胞电镜技术(Whole mount cell electron microscope)观察汉赛巴尔通体感染细胞后细胞骨架的变化 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-83页 |
| ·扩增曲线和熔解曲线 | 第75-76页 |
| ·实时定量检测汉赛巴尔通体感染细胞前后细胞骨架蛋白基因 mRNA 水平的变化.64 | 第76-79页 |
| ·Western Blot 在蛋白水平检测汉赛巴尔通体感染细胞前后细胞骨架蛋白表达量的变化 | 第79-80页 |
| ·荧光显微镜观察标记的巴尔通体感染细胞后细胞骨架的变化 | 第80-82页 |
| ·整装细胞电镜技术观察汉赛巴尔通体感染细胞后细胞骨架的变化 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-85页 |
| 第三节 细胞骨架蛋白对汉赛巴尔通体感染率的影响 | 第85-97页 |
| 1 材料 | 第85页 |
| ·主要试剂 | 第85页 |
| ·主要仪器 | 第85页 |
| 2 方法 | 第85-88页 |
| ·细胞培养 | 第85-86页 |
| ·CFDA-SE标记汉赛巴尔通体 | 第86页 |
| ·EGTA处理细胞及鉴定 | 第86页 |
| ·细胞松弛素 B(CB)处理细胞及鉴定 | 第86页 |
| ·EGTA 处理细胞前后巴尔通体感染率的检测 | 第86-87页 |
| ·细胞松弛素 B 处理细胞前后巴尔通体感染率的检测 | 第87页 |
| ·鬼笔环肽处理细胞前后巴尔通体感染率的检测 | 第87-88页 |
| 3 结果 | 第88-95页 |
| ·荧光显微镜观察 EGTA 处理细胞的效果 | 第88页 |
| ·流式细胞术检测 EGTA 处理后的细胞对巴尔通体感染率的影响 | 第88-90页 |
| ·荧光显微镜观察 CB 处理细胞的效果 | 第90-91页 |
| ·流式细胞术检测 CB 处理细胞后对巴尔通体感染率的影响 | 第91-94页 |
| ·流式细胞术检测鬼笔环肽(PHAL)处理细胞后对巴尔通体感染率的影响 | 第94-95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 第四章 全文总结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-120页 |
| 附表 | 第120-134页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第134-136页 |
| 致谢 | 第136-139页 |
| 附件 | 第139页 |
