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猪源呼肠孤病毒分子流行病学调查及分离株的鉴定

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 呼肠孤病毒结构和形态发生学研究进展第11-39页
 1 呼肠孤病毒基因组和蛋白综述第11-19页
   ·基因组结构第13-14页
   ·内衣壳结构第14-17页
   ·外衣壳第17-19页
 2 呼肠孤病毒复制的概述第19-23页
 3 病毒组装的探讨第23-24页
 4 呼肠孤病毒基因组的组装第24-25页
 5 病毒包涵体的形态发生第25-26页
 参考文献第26-39页
第二章 中国部分地区猪群中哺乳动物呼肠孤病毒分子流行病学调查第39-49页
 摘要第39-40页
 1 材料与方法第40-41页
   ·临床样品第40页
   ·RNA提取,RT-套式PCR(RT-nPCR)第40-41页
   ·S1基因的克隆与测序第41页
   ·进化分析第41页
 2 结果第41-45页
   ·MRV病料的采集、检测第41-42页
   ·S1基因序列的同源性分析第42-43页
   ·氨基酸序列分析第43页
   ·进化分析第43-45页
 3 讨论第45-46页
 参考文献第46-47页
 Abstract第47-49页
第三章 一株猪源1型呼肠孤病毒的分离及鉴定第49-63页
 摘要第49-50页
 1 材料与方法第50-52页
   ·细胞及试剂第50页
   ·引物设计第50-51页
   ·病毒分离第51页
   ·病毒的纯化第51页
   ·病毒形态学观察第51页
   ·病毒RNA提取、核酸电泳、基因的扩增及克隆与序列测定第51-52页
   ·目的基因的序列分析第52页
 2 结果第52-56页
   ·病毒感染单层Vero细胞后的CPE第52-53页
   ·病毒形态学观察第53页
   ·病毒全基因组的RNA凝胶电泳第53-54页
   ·病毒S1基因基因同源性分析和核苷酸系统发育进化树分析第54页
   ·病毒S2、S3、S4基因核苷酸系统发育进化分析第54-56页
 3 讨论第56-58页
 参考文献第58-61页
 Abstract第61-63页
第四章 呼肠孤病毒SHR-A株全长CDNA克隆的构建及序列分析第63-83页
 摘要第63-64页
 1 材料第64-65页
   ·毒株、菌株、细胞株等主要试剂第64页
   ·主要试剂配制第64-65页
   ·MRVs参考毒株全基因序列第65页
   ·生物信息学软件第65页
 2 方法第65-74页
   ·病毒增殖第65-66页
   ·病毒浓缩第66页
   ·病毒RNA的提取第66页
   ·引物设计及合成第66-67页
   ·反转录cDNA合成第67-68页
   ·全基因RT-PCR扩增第68-69页
   ·PCR产物的纯化第69页
   ·DNA片段与克隆载体的连接第69页
   ·连接产物的转化第69页
   ·重组质粒的抽提及测序第69页
   ·病毒5'-RACE扩增第69-72页
   ·病毒3'-RACE扩增第72-74页
   ·全基因序列拼接第74页
   ·SHR-A与呼肠孤病毒参考株同源性分析第74页
   ·SHR-A分离株全基因核苦酸序列进化关系分析第74页
 3 结果第74-77页
   ·病毒基因RT-PCR扩增第74-76页
   ·病毒5'-RACE与3'-RACE PCR扩增结果第76-77页
   ·SHR-A各段基因与MRV参考株同源性分析第77页
 4 讨论第77-79页
 参考文献第79-82页
 Abstract第82-83页
第五章 呼肠孤病毒1型S1、S4基因在SF9昆虫细胞中的表达第83-93页
 摘要第83-84页
 1 材料与方法第84-86页
   ·材料第84页
   ·方法第84-86页
 2 结果第86-89页
   ·S1基因的PCR扩增第86-87页
   ·重组供体质粒pBAC-S1和pBAC-S4的酶切鉴定第87-88页
   ·重组病毒rBS-S1和rBS-S4的获得第88页
   ·重组病毒PCR鉴定第88页
   ·表达产物的IFA检测第88-89页
 3 讨论第89-90页
 参考文献第90-91页
 Abstract第91-93页
全文总结第93-95页
致谢第95-97页
硕士期间论文发表情况第97页

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