目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 呼肠孤病毒结构和形态发生学研究进展 | 第11-39页 |
1 呼肠孤病毒基因组和蛋白综述 | 第11-19页 |
·基因组结构 | 第13-14页 |
·内衣壳结构 | 第14-17页 |
·外衣壳 | 第17-19页 |
2 呼肠孤病毒复制的概述 | 第19-23页 |
3 病毒组装的探讨 | 第23-24页 |
4 呼肠孤病毒基因组的组装 | 第24-25页 |
5 病毒包涵体的形态发生 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-39页 |
第二章 中国部分地区猪群中哺乳动物呼肠孤病毒分子流行病学调查 | 第39-49页 |
摘要 | 第39-40页 |
1 材料与方法 | 第40-41页 |
·临床样品 | 第40页 |
·RNA提取,RT-套式PCR(RT-nPCR) | 第40-41页 |
·S1基因的克隆与测序 | 第41页 |
·进化分析 | 第41页 |
2 结果 | 第41-45页 |
·MRV病料的采集、检测 | 第41-42页 |
·S1基因序列的同源性分析 | 第42-43页 |
·氨基酸序列分析 | 第43页 |
·进化分析 | 第43-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
Abstract | 第47-49页 |
第三章 一株猪源1型呼肠孤病毒的分离及鉴定 | 第49-63页 |
摘要 | 第49-50页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·细胞及试剂 | 第50页 |
·引物设计 | 第50-51页 |
·病毒分离 | 第51页 |
·病毒的纯化 | 第51页 |
·病毒形态学观察 | 第51页 |
·病毒RNA提取、核酸电泳、基因的扩增及克隆与序列测定 | 第51-52页 |
·目的基因的序列分析 | 第52页 |
2 结果 | 第52-56页 |
·病毒感染单层Vero细胞后的CPE | 第52-53页 |
·病毒形态学观察 | 第53页 |
·病毒全基因组的RNA凝胶电泳 | 第53-54页 |
·病毒S1基因基因同源性分析和核苷酸系统发育进化树分析 | 第54页 |
·病毒S2、S3、S4基因核苷酸系统发育进化分析 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
Abstract | 第61-63页 |
第四章 呼肠孤病毒SHR-A株全长CDNA克隆的构建及序列分析 | 第63-83页 |
摘要 | 第63-64页 |
1 材料 | 第64-65页 |
·毒株、菌株、细胞株等主要试剂 | 第64页 |
·主要试剂配制 | 第64-65页 |
·MRVs参考毒株全基因序列 | 第65页 |
·生物信息学软件 | 第65页 |
2 方法 | 第65-74页 |
·病毒增殖 | 第65-66页 |
·病毒浓缩 | 第66页 |
·病毒RNA的提取 | 第66页 |
·引物设计及合成 | 第66-67页 |
·反转录cDNA合成 | 第67-68页 |
·全基因RT-PCR扩增 | 第68-69页 |
·PCR产物的纯化 | 第69页 |
·DNA片段与克隆载体的连接 | 第69页 |
·连接产物的转化 | 第69页 |
·重组质粒的抽提及测序 | 第69页 |
·病毒5'-RACE扩增 | 第69-72页 |
·病毒3'-RACE扩增 | 第72-74页 |
·全基因序列拼接 | 第74页 |
·SHR-A与呼肠孤病毒参考株同源性分析 | 第74页 |
·SHR-A分离株全基因核苦酸序列进化关系分析 | 第74页 |
3 结果 | 第74-77页 |
·病毒基因RT-PCR扩增 | 第74-76页 |
·病毒5'-RACE与3'-RACE PCR扩增结果 | 第76-77页 |
·SHR-A各段基因与MRV参考株同源性分析 | 第77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-82页 |
Abstract | 第82-83页 |
第五章 呼肠孤病毒1型S1、S4基因在SF9昆虫细胞中的表达 | 第83-93页 |
摘要 | 第83-84页 |
1 材料与方法 | 第84-86页 |
·材料 | 第84页 |
·方法 | 第84-86页 |
2 结果 | 第86-89页 |
·S1基因的PCR扩增 | 第86-87页 |
·重组供体质粒pBAC-S1和pBAC-S4的酶切鉴定 | 第87-88页 |
·重组病毒rBS-S1和rBS-S4的获得 | 第88页 |
·重组病毒PCR鉴定 | 第88页 |
·表达产物的IFA检测 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-91页 |
Abstract | 第91-93页 |
全文总结 | 第93-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
硕士期间论文发表情况 | 第97页 |