| 缩略词中英文对照表 | 第12-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-18页 |
| 第1章 绪论 | 第20-41页 |
| 1.1 抗菌肽的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.1.1 抗菌肽的来源、分类和功能 | 第20-23页 |
| 1.1.2 抗菌肽的作用机制 | 第23-25页 |
| 1.2 甲壳动物来源的抗菌肽研究进展 | 第25-38页 |
| 1.2.1 甲壳动物先天免疫系统概述 | 第25-26页 |
| 1.2.2 甲壳动物来源的抗菌肽研究概述 | 第26-27页 |
| 1.2.3 Crustin研究概述 | 第27-38页 |
| 1.3 研究目的、意义和技术路线 | 第38-41页 |
| 1.3.1 研究目的和意义 | 第38-40页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第40-41页 |
| 第2章 拟穴青蟹SpCrus7基因的克隆及体内表达特性 | 第41-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第41页 |
| 2.1.1 实验动物和菌株 | 第41页 |
| 2.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第41页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-50页 |
| 2.2.1 总RNA提取和cDNA的制备 | 第41-44页 |
| 2.2.2 正常青蟹眼柄组织RACE模板的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.3 SpCrus7基因的全长cDNA克隆 | 第45-48页 |
| 2.2.4 生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第49-50页 |
| 2.3 实验结果 | 第50-59页 |
| 2.3.1 拟穴青蟹SpCrus7基因的cDNA全长克隆 | 第50页 |
| 2.3.2 拟穴青蟹SpCrus7基因的生物信息学分析 | 第50-54页 |
| 2.3.3 拟穴青蟹SpCrus7基因大眼幼体期的转录组分析 | 第54页 |
| 2.3.4 拟穴青蟹SpCrus7基因的mRNA表达特性 | 第54-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-63页 |
| 2.4.1 拟穴青蟹SpCrus7基因序列分析 | 第59页 |
| 2.4.2 拟穴青蟹SpCrus7基因的mRNA表达特性分析 | 第59-63页 |
| 第3章 拟穴青蟹SpCrus7成熟肽的原核表达与真核表达及其功能初步探索 | 第63-97页 |
| 3.1 实验材料 | 第63-66页 |
| 3.1.1 实验菌株、表达载体和细胞 | 第63-64页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第64页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第64-65页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第65-66页 |
| 3.2 实验方法 | 第66-74页 |
| 3.2.1 SpCrus7成熟肽重组蛋白的原核表达 | 第66-69页 |
| 3.2.2 SpCrus7成熟肽重组蛋白的真核表达 | 第69-71页 |
| 3.2.3 SpCrus7成熟肽原核与真核表达产物的质谱鉴定 | 第71页 |
| 3.2.4 SpCrus7结构域多肽的人工合成 | 第71页 |
| 3.2.5 SpCrus7的体外抗菌活性测定 | 第71-72页 |
| 3.2.6 SpCrus7的杀菌动力学 | 第72页 |
| 3.2.7 SpCrus7抗菌活性的热稳定性 | 第72页 |
| 3.2.8 SpCrus7抗菌活性的离子耐受性 | 第72-73页 |
| 3.2.9 SpCrus7的微生物凝集作用 | 第73页 |
| 3.2.10 SpCrus7的细胞毒性和抗肿瘤活性检测 | 第73-74页 |
| 3.2.11 SpCrus7对血细胞吞噬弧菌的影响 | 第74页 |
| 3.3 实验结果 | 第74-92页 |
| 3.3.1 SpCrus7成熟肽原核表达质粒图谱 | 第74-75页 |
| 3.3.2 SpCrus7成熟肽的原核表达 | 第75-77页 |
| 3.3.3 SpCrus7成熟肽原核表达产物的纯化 | 第77-79页 |
| 3.3.4 SpCrus7成熟肽真核表达的密码子优化 | 第79页 |
| 3.3.5 SpCrus7成熟肽的真核表达 | 第79页 |
| 3.3.6 SpCrus7成熟肽真核表达产物的纯化 | 第79页 |
| 3.3.7 SpCrus7成熟肽原核与真核表达产物的质谱鉴定 | 第79-82页 |
| 3.3.8 SpCrus7蛋白的抗菌活性测定 | 第82-83页 |
| 3.3.9 SpCrus7的杀菌动力学 | 第83-84页 |
| 3.3.10 SpCrus7抗菌活性的热稳定性 | 第84页 |
| 3.3.11 SpCrus7抗菌活性的离子耐受性 | 第84-85页 |
| 3.3.12 SpCrus7的微生物凝集作用 | 第85页 |
| 3.3.13 SpCrus7的细胞毒性和抗肿瘤活性检测 | 第85页 |
| 3.3.14 SpCrus7对血细胞吞噬弧菌的影响 | 第85-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-97页 |
| 3.4.1 SpCrus7的抗菌活性分析 | 第92-94页 |
| 3.4.2 SCrus7的细菌凝集作用分析 | 第94-95页 |
| 3.4.3 SpCrus7的细胞毒性和抗肿瘤活性分析 | 第95页 |
| 3.4.4 合成肽SpCrus7_(22-42)对血细胞吞噬弧菌的影响分析 | 第95-97页 |
| 第4章 拟穴青蟹SpCrus7抗菌机制初步探索 | 第97-109页 |
| 4.1 实验材料 | 第97-98页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第97页 |
| 4.1.2 主要试剂、耗材和实验仪器 | 第97-98页 |
| 4.1.3 主要试剂配制 | 第98页 |
| 4.2 实验方法 | 第98-101页 |
| 4.2.1 SpCrus7与微生物细胞壁多糖的结合特性 | 第98-99页 |
| 4.2.2 SpCrus7与微生物的结合特性 | 第99页 |
| 4.2.3 SpCrus7与细菌的作用位点 | 第99-100页 |
| 4.2.4 SpCrus7对细菌细胞膜完整性的影响 | 第100页 |
| 4.2.5 SpCrus7对细菌的微观结构的影响 | 第100-101页 |
| 4.3 实验结果 | 第101-105页 |
| 4.3.1 SpCrus7与微生物的结合特性 | 第101-102页 |
| 4.3.2 SpCrus7与微生物细胞壁多糖的结合特性 | 第102页 |
| 4.3.3 SpCrus7与细菌的作用位点 | 第102-103页 |
| 4.3.4 SpCrus7对细菌细胞膜完整性的影响 | 第103页 |
| 4.3.5 SpCrus7对细菌微观结构的影响 | 第103-105页 |
| 4.3.6 已发布的拟穴青蟹Crustins主要研究内容比较 | 第105页 |
| 4.4 讨论 | 第105-109页 |
| 4.4.1 SpCrus7与微生物及微生物多糖的结合特性分析 | 第105-106页 |
| 4.4.2 SpCrus7与细菌的作用位点分析 | 第106-107页 |
| 4.4.3 SpCrus7对细菌细胞膜完整性的影响分析 | 第107页 |
| 4.4.4 SpCrus7对细菌微观结构的影响分析 | 第107-108页 |
| 4.4.5 已发布的拟穴青蟹Crustins主要研究内容比较分析 | 第108-109页 |
| 附录 | 第109-111页 |
| 附录一: 拟穴青蟹SpCrus7的同源序列 | 第109-110页 |
| 附录二: SpCrus7合成肽HPLC图和MS图 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-130页 |
| 结语 | 第130-133页 |
| 在学期间研究成果 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
