| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| 1 杧果炭疽病的发生 | 第13-15页 |
| ·病原菌 | 第13-14页 |
| ·C. gloeosporioides 生物学特性 | 第14页 |
| ·寄主和危害症状 | 第14页 |
| ·侵染循环和侵染机制 | 第14-15页 |
| 2 杧果炭疽菌的防治 | 第15-17页 |
| ·药剂防治 | 第15-16页 |
| ·生物防治 | 第16页 |
| ·农业防治 | 第16页 |
| ·采后防治 | 第16-17页 |
| 3 植物病原菌的抗药性 | 第17-22页 |
| ·植物病原菌的抗药性成因与危害 | 第17-18页 |
| ·杧果炭疽病菌的抗药性现状 | 第18页 |
| ·麦角甾醇生物合成抑制剂 | 第18-19页 |
| ·咪鲜胺对病原真菌的作用机制 | 第19-20页 |
| ·真菌对咪鲜胺的抗药性机制 | 第20-21页 |
| ·DMIs 杀菌剂的抗性治理 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 杧果炭疽病菌对咪鲜胺的室内抗药性诱导和离体适合度研究 | 第23-46页 |
| 1 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·供试菌种 | 第23页 |
| ·供试药剂 | 第23页 |
| ·供试培养基 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-30页 |
| ·病原菌的分离和鉴定 | 第24-25页 |
| ·杧果炭疽病菌的分离和形态特征观察 | 第24-25页 |
| ·MCGW 对咪鲜胺的敏感性测定 | 第25-26页 |
| ·菌丝对咪鲜胺的敏感性测定 | 第25页 |
| ·分生孢子对咪鲜胺的敏感性测定 | 第25-26页 |
| ·突变体的诱导 | 第26-27页 |
| ·药剂驯化 | 第26页 |
| ·突变体的抗药水平测定 | 第26页 |
| ·MCGM 的抗药稳定性研究 | 第26-27页 |
| ·MCGM 生物学性状研究 | 第27-29页 |
| ·MCGM 的培养性状 | 第27页 |
| ·MCGM 生长速率测定 | 第27页 |
| ·MCGM 的产孢能力 | 第27页 |
| ·菌丝干重测定 | 第27页 |
| ·MCGM 形态学观察 | 第27页 |
| ·MCGM 分生孢子萌发率和附着胞形成率测定 | 第27-28页 |
| ·MCGM 的致病力测定 | 第28-29页 |
| ·交互抗药性测定 | 第29页 |
| ·MCGM 生物学特性测定 | 第29-30页 |
| ·温度对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞的影响 | 第29页 |
| ·不同培养时间对 MCGM 和 MCGW 产孢量的影响 | 第29页 |
| ·不同培养时间对 MCGM 和 MCGW 孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第29-30页 |
| ·pH 对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第30页 |
| ·光照对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞的影响 | 第30页 |
| ·不同培养基对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量的影响 | 第30页 |
| ·不同营养对 MCGM 和 MCGW 孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·杧果炭疽病菌形态特征 | 第30-32页 |
| ·病原菌培养性状 | 第30-31页 |
| ·分生孢子、芽管、附着胞、侵染钉的形态特征 | 第31-32页 |
| ·MCGW 对咪鲜胺的敏感性 | 第32页 |
| ·MCGM 的药剂诱导 | 第32-33页 |
| ·MCGM 的抗性水平 | 第33页 |
| ·MCGM 的遗传稳定性 | 第33-34页 |
| ·MCGM 的生物学性状 | 第34-40页 |
| ·MCGM 的培养性状 | 第34-35页 |
| ·MCGM 的生长速率 | 第35页 |
| ·MCGM 的产孢能力 | 第35-36页 |
| ·MCGM 的形态和菌丝干重 | 第36-37页 |
| ·MCGM 的形态特征 | 第37页 |
| ·MCGM 的致病力 | 第37-39页 |
| ·交互抗药性测定 | 第39-40页 |
| ·MCGM 生物学特性 | 第40-44页 |
| ·温度对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞的影响 | 第40-41页 |
| ·不同培养时间对 MCGM 和 MCGW 产孢量的影响 | 第41页 |
| ·不同培养时间对 MCGM 和 MCGW 孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第41-42页 |
| ·不同 pH 对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第42页 |
| ·光照对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量、孢子萌发和附着胞的影响 | 第42-43页 |
| ·不同培养基对 MCGM 和 MCGW 菌丝生长、产孢量的影响 | 第43页 |
| ·不同营养对 MCGM 和 MCGW 分生孢子萌发和附着胞形成的影响 | 第43-44页 |
| 4 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 杧果炭疽菌抗药性产生的生理生化机制研究 | 第46-62页 |
| 1 供试材料 | 第46-47页 |
| ·供试菌株 | 第46页 |
| ·供试药剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| ·供试培养基 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-50页 |
| ·咪鲜胺作用下 MCGM 和 MCGW 菌丝生长的显微观察 | 第47页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 菌丝透射电镜观察 | 第47-48页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 菌丝和分生孢子细胞膜通透性的影响 | 第48页 |
| ·MCGM 和 MCGW 菌丝和分生孢子渗透压测定 | 第48-49页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 有氧呼吸的影响 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-59页 |
| ·咪鲜胺作用下 MCGM 和 MCGW 菌丝生长的显微观察 | 第50-52页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 菌丝透射电镜观察 | 第52-54页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 菌丝和分生孢子细胞膜通透性的影响 | 第54-56页 |
| ·MCGM 和 MCGW 菌丝和分生孢子渗透压测定 | 第56-58页 |
| ·咪鲜胺对 MCGM 和 MCGW 菌丝有氧呼吸的影响 | 第58-59页 |
| 4 小结与讨论 | 第59-62页 |
| 第四章 杧果炭疽菌抗药性产生的分子机制研究 | 第62-93页 |
| 1 实验材料 | 第62-63页 |
| ·供试真菌和细菌 | 第62页 |
| ·试剂和药品 | 第62-63页 |
| ·实验仪器 | 第63页 |
| ·PCR 引物 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-71页 |
| ·CYP51 基因突变的研究 | 第63-68页 |
| ·MCGW 和 MCGM DNA 的提取 | 第63-64页 |
| ·CYP51 基因序列的保守区域引物的设计和合成 | 第64页 |
| ·CYP51 基因全长引物的设计和合成 | 第64页 |
| ·CYP51 保守区域的 PCR 扩增 | 第64-65页 |
| ·PCR 反应体系 | 第65页 |
| ·PCR 反应参数设置 | 第65页 |
| ·CYP51 基因全长的 PCR 扩增 | 第65页 |
| ·PCR 反应体系 | 第65页 |
| ·PCR 反应参数设置 | 第65页 |
| ·电泳检测 | 第65-66页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第66页 |
| ·PCR 回收产物的连接 | 第66-67页 |
| ·连接体系 | 第66页 |
| ·连接产物的转化 | 第66-67页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第67-68页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第67页 |
| ·质粒的提取 | 第67-68页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第68页 |
| ·序列测定和分析 | 第68页 |
| ·CYP51 基因表达量的测定 | 第68-71页 |
| ·MCGW 和 MCGMRNA 的提取 | 第68-69页 |
| ·反转录 | 第69-70页 |
| ·CYP51 基因和内参基因荧光定量引物的设计 | 第70页 |
| ·荧光定量引物可靠性检测 | 第70-71页 |
| ·qPCR 反应 | 第70-71页 |
| ·引物 qPCR 的扩增效率 | 第71页 |
| ·CYP51 基因表达量检测及结果计算 | 第71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-90页 |
| ·CYP51 基因序列的保守区域的扩增 | 第71-73页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第72页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第72-73页 |
| ·CYP51 基因序列保守区域测序结果 | 第73页 |
| ·CYP51 基因全长的 PCR 扩增 | 第73-87页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第73页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第73-75页 |
| ·测序结果和分析 | 第75-87页 |
| ·CYP51 基因表达量的测定 | 第87-90页 |
| ·荧光定量引物可靠性检测 | 第87-88页 |
| ·溶解曲线 | 第87-88页 |
| ·电泳鉴定 | 第88页 |
| ·荧光定量引物扩增效率的检测 | 第88-89页 |
| ·CYP51 基因表达量 | 第89-90页 |
| 4 小结与讨论 | 第90-93页 |
| 第五章 全文小结 | 第93-97页 |
| 1 本文获得的主要实验结果 | 第93-95页 |
| ·抗性诱导 | 第93页 |
| ·抗性 MCGM 离体适合度 | 第93-94页 |
| ·抗药性产生的生理生化机制 | 第94-95页 |
| ·抗药性产生的分子机制 | 第95页 |
| 2 问题和展望 | 第95-97页 |
| 附录 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
