| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略表 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1. 研究背景、目的和意义 | 第12-13页 |
| ·研究背景 | 第12-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第13页 |
| 2 PIRIN 的研究概况 | 第13-20页 |
| ·Pirin 的发现及其亚细胞定位 | 第13页 |
| ·Pirin 的结构特点 | 第13-15页 |
| ·Pirin 的功能 | 第15-17页 |
| ·具有槲皮素-2,3-双脱氧酶活性 | 第15-16页 |
| ·参与造血系统的终末髓系分化 | 第16页 |
| ·pirin 低表达可能跟干细胞的维持相关 | 第16页 |
| ·参与黑色素瘤的形成 | 第16-17页 |
| ·参与细胞的凋亡和程序性死亡过程（programmed cell death, PCD） | 第17页 |
| ·参与多聚糖 K(polysaccharide-K,PSK )引起的细胞应答反应 | 第17页 |
| ·与 pirin 生物功能相关的细胞因子 | 第17-20页 |
| ·NFI/CTF 1 | 第17页 |
| ·NF-κB | 第17-18页 |
| ·Bcl-3 | 第18页 |
| ·GPA1 | 第18-19页 |
| ·PDH E1 亚基 | 第19-20页 |
| 第二章 材料方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第20-22页 |
| ·细胞、菌株以及质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·分子克隆试剂 | 第20页 |
| ·细胞培养试剂 | 第20-21页 |
| ·Western blot 相关试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-35页 |
| ·细胞培养 | 第22-23页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第23页 |
| ·免疫印迹 | 第23-24页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第23页 |
| ·Western blot 实验 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR 及半定量 PCR | 第24-25页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·半定量 PCR | 第24-25页 |
| ·pirin 的细胞定位 | 第25-26页 |
| ·细胞样品的制备 | 第25-26页 |
| ·共聚焦实验 | 第26页 |
| ·表达及干扰载体的构建 | 第26-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·pLKO.1-pirin shRNA 干扰载体的构建 | 第27-30页 |
| ·pGEX-4T-1-pirin 原核载体的构建 | 第30-31页 |
| ·慢病毒的包装 | 第31-32页 |
| ·质粒的大量抽提 | 第31-32页 |
| ·慢病毒包装 | 第32页 |
| ·干扰稳定株的筛选及鉴定 | 第32-33页 |
| ·MTT 法检测 pirin 质对 MEL、k562 细胞增殖活力的影响 | 第33页 |
| ·pirin 质低表达对 MEL、K562 细胞红系分化的影响 | 第33-34页 |
| ·流式细胞仪检测 pirin 对 MEL 细胞周期的影响 | 第34页 |
| ·数据分析 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-47页 |
| ·Western blot 验证 pirin 在 NaBu 诱导 MEL 细胞过程中量的变化 | 第35页 |
| ·pirin 表达水平以及定位的改变可能跟红系分化有关 | 第35-36页 |
| ·半定量 PCR 分析 pirin mRNA 在 NaBu 诱导 MEL 细胞过程中量的变化 | 第36-37页 |
| ·pirin 低表达 MEL 细胞稳定株的筛选、鉴定 | 第37-38页 |
| ·pLKO.1 干扰载体的构建 | 第37页 |
| ·慢病毒包装结果 | 第37-38页 |
| ·pirin 干扰稳定株的鉴定 | 第38页 |
| ·pirin knockdown 对 MEL 细胞活力的影响 | 第38-39页 |
| ·pirin knockdown 不会引起 MEL 细胞周期的改变 | 第39-40页 |
| ·pirin knockdown 对 MEL 细胞红系分化的影响 | 第40-42页 |
| ·pirin knockdown K562 细胞稳定株的筛选鉴定 | 第42页 |
| ·pirin knockdown 对 K562 细胞活力的影响 | 第42-43页 |
| ·pirin knockdown 对 K562 细胞红系分化的影响 | 第43-44页 |
| ·pirin 原核表达载体的构建和诱导表达 | 第44-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 结论与展望 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
