摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-16页 |
缩略语 | 第16-17页 |
第一章 绪论 | 第17-29页 |
·端粒与端粒酶的发现 | 第17页 |
·端粒的结构与功能 | 第17-19页 |
·端粒序列 | 第17-18页 |
·端粒末端结合蛋白 | 第18-19页 |
·端粒酶的结构与功能 | 第19-23页 |
·端粒酶概述 | 第19-20页 |
·端粒酶反转录酶 | 第20-21页 |
·端粒酶 RNA | 第21-23页 |
·端粒酶的研究进展 | 第23-26页 |
·端粒酶与干细胞 | 第23-24页 |
·端粒酶与肿瘤 | 第24-25页 |
·植物端粒酶的研究进展 | 第25-26页 |
·植物启动子及转录调控元件的预测与分析 | 第26-27页 |
·本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
·技术路线 | 第28-29页 |
第二章 水稻愈伤组织的诱导 | 第29-32页 |
·材料与试剂 | 第29页 |
·材料 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-30页 |
·愈伤诱导培养基的配制 | 第29-30页 |
·成熟胚愈伤诱导 | 第30页 |
·愈伤继代培养 | 第30页 |
·实验结果 | 第30-32页 |
第三章 端粒酶提取方法的优化 | 第32-43页 |
·材料与试剂 | 第32-34页 |
·实验材料 | 第32页 |
·主要试剂的配制 | 第32-34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·端粒酶的提取 | 第34-35页 |
·酶促反应 | 第35页 |
·酶促产物的回收 | 第35-36页 |
·TRAP 法测定端粒酶的活力 | 第36-37页 |
·PCR 扩增 | 第36页 |
·PCR 产物的回收 | 第36-37页 |
·15%PAGE 胶电泳分离 | 第37页 |
·水稻愈伤组织总 RNA 的提取 | 第37-38页 |
·端粒酶粗提液 RNA 的提取 | 第38页 |
·RNA 的尿素变性电泳 | 第38页 |
·实验结果 | 第38-42页 |
·端粒酶粗提蛋白浓度 | 第38-39页 |
·端粒酶活力测定 | 第39-41页 |
·端粒酶粗提蛋白中 RNA 组分的尿素变性电泳分析 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第四章 端粒酶 RNA 候选序列的克隆 | 第43-53页 |
·材料与试剂 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·主要试剂的配制 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-50页 |
·RNA 与接头的连接 | 第44-45页 |
·连接产物的回收 | 第45页 |
·反转录 | 第45-46页 |
·PCR 扩增 | 第46页 |
·PCR 产物的回收 | 第46-47页 |
·目的片段与 pMD18-T 载体连接 | 第47页 |
·DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第47-48页 |
·菌落 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
·质粒提取 | 第49页 |
·酶切鉴定 | 第49-50页 |
·测序 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-52页 |
·PCR 结果 | 第50页 |
·菌落 PCR 结果 | 第50-51页 |
·酶切结果 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第五章 候选序列启动子及转录调控元件的预测与分析 | 第53-56页 |
·数据库 | 第53页 |
·启动子及转录调控元件的预测 | 第53页 |
·启动子的预测 | 第53页 |
·转录调控元件的预测 | 第53页 |
·实验结果 | 第53-55页 |
·启动子区预测结果 | 第53-54页 |
·转录调控元件预测结果 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-64页 |
水稻愈伤诱导培养基母液的配制 | 第62-63页 |
裂解液的配制 | 第63页 |
酶促缓冲液的配制 | 第63-64页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |