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水稻端粒酶RNA候选序列的克隆及特征研究

摘要第1-10页
Abstract第10-16页
缩略语第16-17页
第一章 绪论第17-29页
   ·端粒与端粒酶的发现第17页
   ·端粒的结构与功能第17-19页
     ·端粒序列第17-18页
     ·端粒末端结合蛋白第18-19页
   ·端粒酶的结构与功能第19-23页
     ·端粒酶概述第19-20页
     ·端粒酶反转录酶第20-21页
     ·端粒酶 RNA第21-23页
   ·端粒酶的研究进展第23-26页
     ·端粒酶与干细胞第23-24页
     ·端粒酶与肿瘤第24-25页
     ·植物端粒酶的研究进展第25-26页
   ·植物启动子及转录调控元件的预测与分析第26-27页
   ·本研究的目的及意义第27-28页
   ·技术路线第28-29页
第二章 水稻愈伤组织的诱导第29-32页
   ·材料与试剂第29页
     ·材料第29页
     ·试剂第29页
   ·实验方法第29-30页
     ·愈伤诱导培养基的配制第29-30页
     ·成熟胚愈伤诱导第30页
     ·愈伤继代培养第30页
   ·实验结果第30-32页
第三章 端粒酶提取方法的优化第32-43页
   ·材料与试剂第32-34页
     ·实验材料第32页
     ·主要试剂的配制第32-34页
   ·实验方法第34-38页
     ·端粒酶的提取第34-35页
     ·酶促反应第35页
     ·酶促产物的回收第35-36页
     ·TRAP 法测定端粒酶的活力第36-37页
       ·PCR 扩增第36页
       ·PCR 产物的回收第36-37页
       ·15%PAGE 胶电泳分离第37页
     ·水稻愈伤组织总 RNA 的提取第37-38页
     ·端粒酶粗提液 RNA 的提取第38页
     ·RNA 的尿素变性电泳第38页
   ·实验结果第38-42页
     ·端粒酶粗提蛋白浓度第38-39页
     ·端粒酶活力测定第39-41页
     ·端粒酶粗提蛋白中 RNA 组分的尿素变性电泳分析第41-42页
   ·讨论第42-43页
第四章 端粒酶 RNA 候选序列的克隆第43-53页
   ·材料与试剂第43-44页
     ·实验材料第43页
     ·主要试剂的配制第43-44页
   ·实验方法第44-50页
     ·RNA 与接头的连接第44-45页
     ·连接产物的回收第45页
     ·反转录第45-46页
     ·PCR 扩增第46页
     ·PCR 产物的回收第46-47页
     ·目的片段与 pMD18-T 载体连接第47页
     ·DH5α感受态细胞的制备及转化第47-48页
     ·菌落 PCR 鉴定第48-49页
     ·质粒提取第49页
     ·酶切鉴定第49-50页
     ·测序第50页
   ·实验结果第50-52页
     ·PCR 结果第50页
     ·菌落 PCR 结果第50-51页
     ·酶切结果第51-52页
   ·讨论第52-53页
第五章 候选序列启动子及转录调控元件的预测与分析第53-56页
   ·数据库第53页
   ·启动子及转录调控元件的预测第53页
     ·启动子的预测第53页
     ·转录调控元件的预测第53页
   ·实验结果第53-55页
     ·启动子区预测结果第53-54页
     ·转录调控元件预测结果第54-55页
   ·讨论第55-56页
总结第56-57页
参考文献第57-62页
附录第62-64页
 水稻愈伤诱导培养基母液的配制第62-63页
 裂解液的配制第63页
 酶促缓冲液的配制第63-64页
攻读学位期间的研究成果第64-65页
致谢第65页

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