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家蚕膜蛋白触角结合蛋白(ABP)的纯化及功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略语第8-9页
目录第9-11页
第一章 引言第11-21页
   ·昆虫嗅觉系统第11-13页
     ·昆虫嗅觉系统功能简介第11-12页
     ·昆虫的化学感受器结构和功能简介第12-13页
   ·气味结合蛋白简介及研究进展第13-14页
   ·家蚕触角结合蛋白(ABP)的研究方法第14-15页
   ·结晶方法研究进展第15-18页
     ·结晶方法概述第15-16页
     ·结晶溶剂的选择第16-18页
   ·实验方案设计第18-21页
     ·研究的目的和意义第18页
     ·研究内容第18-20页
     ·实验流程图第20-21页
第二章 天然家蚕触角结合蛋白(ABP)的纯化研究第21-34页
   ·材料第21-25页
     ·仪器第21页
     ·试剂第21页
     ·主要试剂的配制第21-25页
   ·实验方法第25-29页
     ·样品脱糖第25页
     ·酶解第25页
     ·Resource S 层析实验第25-26页
     ·Resource Q 层析实验第26页
     ·凝胶过滤层析实验第26-27页
     ·BCA 法定量蛋白浓度第27页
     ·双向电泳第27-29页
     ·质谱鉴定第29页
   ·结果第29-33页
     ·Resource S 分离纯化峰图及 SDS-PAGE 鉴定第29-30页
     ·Resource Q 分离纯化峰图及 SDS-PAGE 鉴定第30页
     ·凝胶过滤层析分离纯化峰图及 SDS-PAGE 鉴定第30-31页
     ·双向电泳检测及质谱鉴定第31-32页
     ·质谱鉴定结果分析第32-33页
   ·讨论第33-34页
第三章 ABP 基因的生物信息学分析第34-39页
   ·序列与工具第34页
     ·序列第34页
     ·生物信息学工具与软件第34页
   ·生物信息学分析结果第34-38页
     ·ABP 基因序列比对第34-35页
     ·保守结构预测第35页
     ·ABP 蛋白同源性分析第35-36页
     ·信号肽分析第36页
     ·跨膜区预测分析第36页
     ·疏水性预测分析第36-37页
     ·二级结构预测第37页
     ·ABP 蛋白的高级结构预测分析第37-38页
   ·讨论第38-39页
第四章 ABP 在大肠杆菌中的克隆表达、分离纯化及结晶条件初筛第39-54页
     ·材料与试剂第39-41页
     ·材料第39页
     ·试剂第39页
     ·配置主要试剂第39-41页
   ·实验方法第41-47页
     ·ABP 基因的获得第41-43页
     ·重组表达载体 pET-32a-ABP(无 SP)的构建第43-44页
     ·重组质粒 pET-32a-ABP 在大肠杆菌中诱导表达第44-46页
     ·纯化与鉴定重组融合蛋白第46页
     ·BCA 定量法及双向电泳分析第46-47页
     ·结晶条件初筛第47页
   ·结果第47-52页
     ·PCR 扩增 ABP 基因第47页
     ·重组质粒 pET-32a-ABP 的鉴定第47-48页
     ·重组质粒的原核表达第48-49页
     ·表达蛋白的纯化第49-50页
     ·双向电泳分析第50-52页
     ·结晶条件初筛结果第52页
   ·讨论第52-54页
第五章 融合蛋白的蛋白互作分析第54-57页
   ·材料与试剂第54页
     ·材料第54页
     ·试剂第54页
     ·所用试剂配制准备第54页
   ·方法第54-55页
     ·准备融合蛋白样品第54页
     ·全蛋白溶液样品的制备第54页
     ·His-Pull down第54-55页
     ·样品检测第55页
   ·结果和分析第55-56页
   ·讨论第56-57页
第六章 融合蛋白制备多克隆抗体的第57-61页
   ·材料和试剂第57页
     ·材料第57页
     ·试剂准备第57页
   ·方法第57-59页
     ·抗原的制备第57-58页
     ·免疫动物第58页
     ·制备兔子多克隆抗血清第58页
     ·测定制备的抗血清的效价第58-59页
     ·Western blot 检测抗体的特异性第59页
   ·结果第59-60页
     ·抗体的效价检测第59-60页
     ·抗体 Western blot 检测结果第60页
   ·讨论第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-65页
感言第65页

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