杆状病毒AcMNPV pk-1基因的功能及定位研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-19页 |
| ·杆状病毒的研究背景 | 第8-11页 |
| ·杆状病毒简介 | 第8页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第8页 |
| ·杆状病毒的形态结构 | 第8-10页 |
| ·杆状病毒的感染 | 第10-11页 |
| ·杆状病毒基因组 | 第11-14页 |
| ·杆状病毒的基因组成 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒基因分类 | 第12-14页 |
| ·与病毒的转录复制相关的基因 | 第12-13页 |
| ·与病毒基因表达调控有关的基因 | 第13-14页 |
| ·与多角体表达相关的基因 | 第14页 |
| ·与多角体表达相关的宿主蛋白 | 第14页 |
| ·杆状病毒分子生物学研究的实践意义 | 第14-15页 |
| ·生物杀虫剂 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第15页 |
| ·蛋白激酶(protein kinase,PK) | 第15-18页 |
| ·蛋白激酶的分类 | 第15-16页 |
| ·蛋白激酶的结构 | 第16页 |
| ·PKD激酶的结构 | 第16页 |
| ·病毒粒子相关蛋白激酶 | 第16-18页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-32页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·载体 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·酶、MARKER,试剂盒和化学试剂 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-32页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取方法 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌中Bacmid的提取法 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制作 | 第21-22页 |
| ·PCR反应体系及反应程序 | 第22页 |
| · | 第22-24页 |
| ·PCR产物和酶切产物的回收 | 第22-23页 |
| ·本论文所用引物 | 第23-24页 |
| · | 第24-25页 |
| ·重组病毒的的构建 | 第24页 |
| ·Bac to Bac系统 | 第24-25页 |
| ·重组病毒转染-感染SF9细胞 | 第25-26页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第26页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第26-28页 |
| ·切片 | 第28页 |
| ·PK-1蛋白的表达 | 第28-30页 |
| ·抗血清的制备 | 第30页 |
| ·免疫荧光 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第32-44页 |
| ·重组病毒的构建 | 第32-35页 |
| ·PK-1是杆状病毒ACMNPV复制的必须基因 | 第35-36页 |
| ·PK-1缺失影响极晚期基因的表达 | 第36-37页 |
| ·病毒生长曲线 | 第37-38页 |
| ·缺失PK-1不影响病毒DNA的复制 | 第38-40页 |
| ·重组病毒的构建 | 第38-39页 |
| ·实时定量PCR检测病毒DNA复制水平 | 第39-40页 |
| ·PK-1对核衣壳形成的影响 | 第40-41页 |
| ·PK-1蛋白的亚细胞定位 | 第41-44页 |
| ·PK-1抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·PK-1蛋白的亚细胞定位 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
