| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| 1. 卵母细胞体外成熟 | 第11-15页 |
| ·幼畜的超数排卵 | 第11页 |
| ·卵母细胞体外成熟培养 | 第11-12页 |
| ·卵母细胞成熟过程及调节机制 | 第12-13页 |
| ·影响卵母细胞成熟的因素 | 第13-15页 |
| ·动物种类和年龄 | 第13页 |
| ·卵母细胞类型 | 第13页 |
| ·获取卵母细胞的卵泡大小 | 第13页 |
| ·成熟培养液及添加成分 | 第13-15页 |
| ·基础培养液 | 第13-14页 |
| ·激素 | 第14页 |
| ·血清 | 第14页 |
| ·卵泡液 | 第14-15页 |
| ·抗氧化物质 | 第15页 |
| 2. EGCG及生物学作用 | 第15-16页 |
| ·EGCG抗氧化作用 | 第15-16页 |
| ·EGCG免疫调节作用 | 第16页 |
| ·EGCG对动物生殖的作用 | 第16页 |
| 3. BMP-15、FSHR基因相关研究 | 第16-20页 |
| ·BMP-15基因概述 | 第17页 |
| ·BMP-15在组织中的表达 | 第17-18页 |
| ·BMP-15的生物学作用 | 第18-19页 |
| ·FSHR的结构 | 第19页 |
| ·FSHR的转导机制 | 第19-20页 |
| 4. 实时荧光定量PCR技术 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的原理 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第20页 |
| ·绝对定量 | 第20页 |
| ·相对定量 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第20-21页 |
| ·检测基因表达 | 第21页 |
| ·检测基因突变及多态性 | 第21页 |
| ·转基因生物中的应用 | 第21页 |
| ·影响实时荧光定量PCR结果的因素 | 第21页 |
| ·RNA的完整性 | 第21页 |
| ·RNA样品中的基因组DNA污染 | 第21页 |
| ·反转录 | 第21页 |
| ·PCR反应体系的优化 | 第21页 |
| 5. 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-30页 |
| 第二章 EGCG对新西兰兔卵母细胞IVM的影响 | 第30-39页 |
| 1. 试验材料 | 第30-31页 |
| ·试验动物 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要溶液配置 | 第30-31页 |
| 2. 实验方法 | 第31-33页 |
| ·实验分组 | 第31页 |
| ·实验内容 | 第31-32页 |
| ·超数排卵处理 | 第32页 |
| ·卵母细胞的获取及选择标准 | 第32页 |
| ·卵母细胞体外成熟培养 | 第32-33页 |
| ·数据处理 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-34页 |
| ·不同浓度EGCG对幼龄兔卵母细胞成熟的影响 | 第33页 |
| ·不同浓度EGCG对成年兔卵母细胞成熟的影响 | 第33页 |
| ·添加相同浓度EGCG幼龄兔与成年兔卵母细胞成熟率的差异 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| ·幼龄兔与成年兔卵母细胞体外成熟的差异 | 第34-35页 |
| ·EGCG在卵母细胞成熟培养中的作用 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第三章 BMP-15、FSHR基因在幼龄新西兰兔卵母细胞IVM中的表达 | 第39-52页 |
| 1. 试验材料 | 第39-40页 |
| ·试验动物 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·主要溶液配置 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-44页 |
| ·不同成熟阶段卵母细胞选择标准 | 第40-41页 |
| ·卵母细胞总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·反转录—cDNA链的获得 | 第42页 |
| ·BMP-15基因、FSHR基因、β-actin基因PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·目的片段的纯化回收 | 第43页 |
| ·PCR产物与克隆载体的连接 | 第43页 |
| ·质粒的转化 | 第43页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒提取 | 第43-44页 |
| ·PCR鉴定 | 第44页 |
| ·序列测定 | 第44页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第44页 |
| ·统计分析 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·总RNA的检测 | 第44-45页 |
| ·目的基因的扩增和阳性克隆的PCR鉴定 | 第45页 |
| ·兔BMP-15基因、FSHR基因测序及比对 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量PCR产物的特异性检测 | 第46-47页 |
| ·基因扩增效率一致性的判定 | 第47页 |
| ·BMP-15和FSHR基因在幼龄兔卵母细胞体外成熟过程中的相对表达变化 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| ·BMP-15对卵泡发育及卵母细胞成熟的调控 | 第48-49页 |
| ·FSHR在卵泡卵母细胞成熟过程中的表达 | 第49页 |
| ·BMP-15与FSHR的相互作用 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表论文及获得专利情况 | 第54-55页 |
