三氯苯酚降解相关基因的合成与功能分析—PsUGT2I基因
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 符号及縮略语说明 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 引言 | 第11页 |
| 1 葡萄糖基转移酶的性质、功能、催化机理及应用 | 第11-15页 |
| ·葡萄糖基转移酶的特征、分类与空间构型 | 第11-13页 |
| ·葡萄糖基转移酶的功能及催化机理 | 第13-14页 |
| ·葡萄糖基转移酶的应用 | 第14-15页 |
| 2 三氯苯酚的概述 | 第15-21页 |
| ·三氯苯酚的性质及污染现状 | 第15-16页 |
| ·三氯苯酚的非生物降解研究进展 | 第16页 |
| ·三氯苯酚的生物降解研究进展 | 第16-21页 |
| 3 常用合成目的基因的方法 | 第21-23页 |
| ·鸟枪法 | 第22页 |
| ·cDNA法 | 第22页 |
| ·PCR扩增法 | 第22页 |
| ·化学合成法 | 第22页 |
| ·直接分离法 | 第22-23页 |
| 4 本研究的目的、内容与意义 | 第23-25页 |
| ·研究目的 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 TCP降解基因PsUGT2I的合成及鉴定 | 第25-32页 |
| 前言 | 第25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| 2 结果与序列分析 | 第27-31页 |
| ·PsUGT2I基因的合成 | 第27-29页 |
| ·目的基因 | 第29-30页 |
| ·PsUGT2I的序列分析和蛋白分析 | 第30-31页 |
| 3. 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 目的基因在植物中的表达 | 第32-51页 |
| 引言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33-36页 |
| ·方法 | 第36-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-51页 |
| ·PsUGT2I农杆菌转化双元载体的构建 | 第43-44页 |
| ·PsUGT2I基因的拟南芥转化 | 第44-45页 |
| ·转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第45-47页 |
| ·转基因拟南芥阳性植株的PCR验证 | 第47-48页 |
| ·转基因拟南芥阳性植株的可溶性还原糖含量 | 第48-49页 |
| ·转基因拟南芥阳性植株的降解TCP情况 | 第49-51页 |
| 第四章 目的基因在酵母中的表达 | 第51-65页 |
| 引言 | 第51-52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-59页 |
| ·材料 | 第52-55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-63页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·质粒载体的线性化验证 | 第60页 |
| ·酵母阳性克隆的筛选 | 第60-61页 |
| ·PsUGT2I蛋白浓度定量 | 第61页 |
| ·PsUGT2I的电泳检测 | 第61-62页 |
| ·HPLC法鉴定降解情况 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72-73页 |
