| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第15-17页 |
| 第一章 ：绪论 | 第17-49页 |
| ·木质纤维素材料的复杂性 | 第18-23页 |
| ·木质纤维素材料组成 | 第18-21页 |
| ·纤维素结构的分析和定量测定技术 | 第21-22页 |
| ·木质纤维素材料抗降解屏障 | 第22-23页 |
| ·纤维素酶 | 第23-28页 |
| ·纤维素酶的命名方式 | 第23-24页 |
| ·纤维素酶系的组成 | 第24-26页 |
| ·纤维素酶酶活力测定 | 第26-28页 |
| ·纤维素的降解机制 | 第28-30页 |
| ·纤维素降解过程中关键酶和关键蛋白的研究 | 第30-43页 |
| ·纤维素降解过程中关键酶的研究 | 第30-41页 |
| ·纤维素降解过程中的协同作用蛋白 | 第41-43页 |
| ·纤维素酶的表达研究 | 第43-45页 |
| ·细菌表达系统 | 第43页 |
| ·酵母表达系统 | 第43-44页 |
| ·丝状真菌表达系统 | 第44-45页 |
| ·论文的立题依据和实验思路 | 第45-49页 |
| 第二章 ：纤维素酶协同作用蛋白的分离纯化和性质测定 | 第49-79页 |
| ·材料和方法 | 第49-60页 |
| ·菌株 | 第49页 |
| ·培养基及培养条件 | 第49-50页 |
| ·常用试剂和设备 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-77页 |
| ·斜卧青霉胞外粗酶液中纤维素降解协同作用蛋白的发现 | 第60-62页 |
| ·蛋白质的鉴定 | 第62-63页 |
| ·cbh1基因本源表达 | 第63-70页 |
| ·两类CBHⅠ的性质分析及比较 | 第70-73页 |
| ·两类CBHⅠ处理后纤维素底物的结构变化 | 第73-75页 |
| ·两类CBHⅠ和不同商业纤维素酶间的协同作用 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 第三章 ：N-糖基化对斜卧青霉CBH Ⅰ多样性的影响 | 第79-105页 |
| ·材料和方法 | 第79-82页 |
| ·菌株和质粒 | 第79-80页 |
| ·实验仪器 | 第80页 |
| ·蛋白质蛋白浓度的测定和SDS-PAGE | 第80页 |
| ·酶活力测定方法 | 第80页 |
| ·粗酶液的制备 | 第80页 |
| ·外切纤维素酶的分离纯化 | 第80页 |
| ·酶学性质分析 | 第80-81页 |
| ·同源模建 | 第81页 |
| ·N-糖链的质谱图分析 | 第81页 |
| ·不同糖基化的CBHⅠ对不同纤维素多聚物的降解能力的测定 | 第81-82页 |
| ·通过基因敲入(Knock-in)分析不同糖基化位点对酶活力的影响 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-102页 |
| ·CBHⅠ的分离纯化 | 第82-84页 |
| ·蛋白质的串联质谱鉴定 | 第84-89页 |
| ·不同糖基化形式CBHⅠ的酶学性质比较 | 第89-90页 |
| ·不同糖基化形式CBHⅠ水解性质的比较 | 第90-91页 |
| ·N-糖链结构对CBHⅠ酶活力的影响 | 第91-96页 |
| ·不同糖基化位点对CBHⅠ的酶活力的影响 | 第96-101页 |
| ·利用同源模建分析CBHⅠ的不同糖链的空间位置 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-103页 |
| 小结 | 第103-105页 |
| 第四章 ：斜卧青霉纤维二糖水解酶催化机理的研究 | 第105-123页 |
| ·材料和方法 | 第106-109页 |
| ·菌株和质粒 | 第106页 |
| ·实验仪器 | 第106页 |
| ·试剂,工具酶 | 第106页 |
| ·cbh1基因四个糖基结合位点的定点突变及其在青霉中的表达 | 第106-108页 |
| ·蛋白浓度的测定和SDS-PAGE检测 | 第108页 |
| ·酶活力测定方法 | 第108页 |
| ·纯纤维素酶水解特性的测定 | 第108页 |
| ·利用荧光光谱扫描分析色氨酸和底物的结合 | 第108-109页 |
| ·结果与分析 | 第109-119页 |
| ·CBHⅠ的同源模建分析糖基结合位点的空间位置 | 第109页 |
| ·CBHⅠ四个糖基结合位点定点突变及本源表达 | 第109-113页 |
| ·CBHⅠ突变体蛋白分子量测定和SDS-PAGE分析 | 第113-115页 |
| ·CBHⅠ突变体水解纤维素类似物的催化现象 | 第115-119页 |
| ·讨论 | 第119-121页 |
| 创新点 | 第121页 |
| 小结 | 第121-123页 |
| 第五章 ：斜卧青霉胞外新型CBHⅡ的分离纯化 | 第123-141页 |
| ·材料和方法 | 第124-127页 |
| ·实验材料 | 第124页 |
| ·培养基 | 第124页 |
| ·实验仪器 | 第124页 |
| ·纤维素外切酶Ⅱ的纯化 | 第124页 |
| ·蛋白的串联质谱鉴定 | 第124-125页 |
| ·外切酶酶活力的测定 | 第125页 |
| ·SDS-PAGE及蛋白浓度的测定 | 第125页 |
| ·蛋白质的酶学性质分析 | 第125-126页 |
| ·同源模建分析蛋白质的三维结构 | 第126页 |
| ·同步糖化生产乙醇,乳酸实验中蛋白的添加实验 | 第126-127页 |
| ·实验结果与讨论 | 第127-139页 |
| ·纤维素外切酶Ⅱ(CBHⅡ)的分离纯化 | 第127-128页 |
| ·蛋白质的串联质谱鉴定 | 第128-131页 |
| ·利用同源模建分析PdCel6A的三维结构 | 第131-133页 |
| ·PdCel6A的酶学性质分析 | 第133-137页 |
| ·PdCel6A在同步糖化发酵生产乙醇、乳酸中的应用 | 第137-139页 |
| ·讨论 | 第139页 |
| 小结 | 第139-141页 |
| 第六章 ：纤维素酶连接区的潜在作用研究 | 第141-161页 |
| ·材料和方法 | 第141-143页 |
| ·实验菌株 | 第141页 |
| ·培养基 | 第141-142页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第142页 |
| ·PdCel6A与其他第六家族Cel6A的氨基酸序列比对 | 第142页 |
| ·基因表达盒的构建及其在斜卧青霉中的表达 | 第142-143页 |
| ·蛋白的浓度、酶活力测定 | 第143页 |
| ·圆二色谱测定 | 第143页 |
| ·结果与分析 | 第143-157页 |
| ·PdCel6A与第六家族其他蛋白进行氨基酸序列比对 | 第143-144页 |
| ·PdCel6A-SL、PdCel6A-6pro、PdCel6A-CD在斜卧青霉中表达 | 第144-150页 |
| ·PdCel6A-SL、PdCel6A-6pro、PdCel6A-CD的分离纯化 | 第150-153页 |
| ·PdCel6A-SL、PdCel6A-6pro和PdCel6A的二级结构测定 | 第153-154页 |
| ·PdCel6A-CD的分离纯化和性质测定 | 第154-155页 |
| ·PdCel6A-SL、PdCel6A-6pro和PdCel6A-CD酶学性质分析 | 第155-157页 |
| ·讨论 | 第157-158页 |
| 小结 | 第158-161页 |
| 全文总结 | 第161-165页 |
| 参考文献 | 第165-179页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第179-181页 |
| 致谢 | 第181-183页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第183-185页 |
| 附件 | 第185-199页 |
