| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·稻瘟病抗性基因研究的意义 | 第10页 |
| ·稻瘟病抗性基因研究的进展 | 第10-19页 |
| ·植物抗病基因的结构特点以及可能的抗性机制 | 第19-21页 |
| ·植物抗病基因的结构特点 | 第19-20页 |
| ·植物抗性基因抗性反应的识别机制 | 第20-21页 |
| ·基因对基因假说 | 第20页 |
| ·警卫假说 | 第20-21页 |
| ·本研究的内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 稻瘟病抗性基因Pita2候选基因预测与表达分析 | 第22-27页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-24页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·分析软件 | 第22-23页 |
| ·表达分析 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-25页 |
| ·候选基因的预测 | 第24页 |
| ·候选基因的表达分析 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 稻瘟病抗性基因Pita2候选基因功能互补载体的构建与遗传转化 | 第27-43页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·植物材料 | 第27-28页 |
| ·载体与菌株 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·主要培养基的成分及其制备方法 | 第29-30页 |
| ·实验方案 | 第30-38页 |
| ·Pita~2 候选基因的克隆 | 第30-34页 |
| ·Pita~2 候选基因扩增 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第31页 |
| ·PCR 产物回收 | 第31-32页 |
| ·目的片段的酶切 | 第32页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第32页 |
| ·功能互补载体pCAMBIA1300 质粒DNA 的制备 | 第32-33页 |
| ·载体质粒的酶切、去磷酸及其产物的纯化 | 第33页 |
| ·目的片段与载体质粒DNA 的连接 | 第33页 |
| ·连接产物热激转化大肠杆菌细胞及阳性克隆的鉴定和保存 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌EHA105 热激感受态细胞的制备、转化与鉴定 | 第34-35页 |
| ·制备农杆菌EHA105 热激感受态细胞 | 第34-35页 |
| ·重组载体质粒DNA 热激转化农杆菌感受态细胞 | 第35页 |
| ·阳性克隆的鉴定和保存 | 第35页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第35-36页 |
| ·水稻胚性愈伤组织诱导和预培养 | 第35页 |
| ·农杆菌的活化及悬浮 | 第35-36页 |
| ·愈伤组织的农杆菌侵染及共培养 | 第36页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选及分化 | 第36页 |
| ·幼苗的生根和移栽 | 第36页 |
| ·T_0 代转基因水稻的分子检测 | 第36-37页 |
| ·植物基因组DNA 快速小量提取 | 第36-37页 |
| ·Hpt 基因的PCR 检测 | 第37页 |
| ·T_0 代转基因水稻人工辅助接种 | 第37-38页 |
| ·真菌培养基的配制 | 第37页 |
| ·稻瘟病菌研53-33 的培养与产孢 | 第37-38页 |
| ·稻瘟病菌人工辅助接种 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·Pita~2 候选基因功能互补载体的构建 | 第38-39页 |
| ·水稻遗传转化与转基因植株的获得 | 第39-40页 |
| ·T_0 代转基因水稻DNA 水平的PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·Pita~2 候选基因功能互补载体转基因水稻T_0 代接种结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·关于功能互补载体的构建 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第42-43页 |
| 第四章 稻瘟病抗性基因Pita~2候选基因干涉载体的构建与遗传转化 | 第43-52页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·载体与菌株 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·主要培养基的成分及其制备方法 | 第44页 |
| ·实验方案 | 第44-48页 |
| ·Pita~2 候选基因干涉载体的构建 | 第44-47页 |
| ·水稻总RNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·PiNo.4 cDNA 第一链的合成 | 第45-46页 |
| ·干涉片段的引物设计 | 第46页 |
| ·干涉片段的PCR 扩增 | 第46页 |
| ·PCR 产物回收、酶切及纯化 | 第46页 |
| ·Gateway 技术Topo 试剂盒入门载体的BP 反应 | 第46-47页 |
| ·干涉载体pANDA 质粒DNA 的制备 | 第47页 |
| ·Gateway 技术LR 反应干涉载体的构建 | 第47页 |
| ·目的片段与载体质粒DNA 的连接 | 第47页 |
| ·连接产物热激转化大肠杆菌细胞及阳性克隆的鉴定和保存 | 第47页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第47页 |
| ·转基因水稻的分子检测 | 第47-48页 |
| ·植物基因组DNA 快速小量提取 | 第47页 |
| ·guslinker 的PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-50页 |
| ·Pita~2 候选基因干涉载体的构建 | 第48-49页 |
| ·水稻遗传转化与转基因植株的获得 | 第49页 |
| ·T_0 代转基因水稻DNA 水平的PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 硕士在读期间发表的论文 | 第63页 |
