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小麦盐诱导表达TaWRKY79、TaWRKY80转录因子基因的克隆及功能分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-27页
   ·土地的退化与作物产量第13页
   ·非生物胁迫对植物的影响第13-16页
     ·盐胁迫对植物生长发育的影响第13-15页
     ·旱胁迫对植物生长发育的影响第15-16页
   ·植物转录因子第16-23页
     ·转录因子的结构第16-18页
       ·DNA 结合域第16-17页
       ·转录调节域第17页
       ·寡聚化位点第17-18页
       ·核定位信号区第18页
     ·转录因子的功能第18-21页
       ·调控生长发育第18-19页
       ·调控植物抗病性第19页
       ·调控植物抗逆性第19-21页
     ·转录因子结构特性的研究方法第21-22页
       ·DNA 结合域的研究第21页
       ·转录调控区的研究第21-22页
       ·核定位信号区的鉴定第22页
     ·植物转录因子功能的研究方法第22-23页
       ·植物转录因子的瞬时表达分析第22页
       ·利用突变体和转基因植株分析转录因子的功能第22-23页
   ·植物 WRKY 转录因子的研究进展第23-26页
     ·WRKY 基因的结构及分类第23页
     ·WRKY 蛋白与 W-box 的结合第23-24页
     ·WRKY 基因的起源与分子进化第24页
     ·WRKY 蛋白的生物学功能第24-26页
       ·WRKY 转录因子植物生物胁迫及其信号转导过程中的调控作用第24页
       ·WRKY 转录因子在植物非生物胁迫及其信号转导过程的调控作用第24-25页
       ·WRKY 转录因子在植物形态建成及生长发育中的作用第25页
       ·WRKY 转录因子在植物代谢中的调节作用第25页
       ·小结第25-26页
   ·本论文立题依据及意义第26-27页
2 材料与方法第27-45页
   ·实验材料第27页
     ·植物材料第27页
     ·菌株与质粒第27页
     ·酶与各种生化试剂第27页
   ·实验方法第27-45页
     ·TOTAL RNA 提取第27-29页
     ·RNA 反转录及第一链 CDNA 合成第29-30页
     ·小麦 TAWRKY79 基因的 PCR 扩增第30-31页
     ·小麦 TAWRKY80 基因的 PCR 扩增第31页
     ·扩增产物的电泳纯化与回收第31页
     ·回收片段的连接第31-32页
     ·回收片段的克隆测序第32-35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第32-33页
       ·连接产物的转化第33页
       ·重组质粒的鉴定第33-35页
     ·小麦基因组 DNA 提取第35页
     ·不同胁迫条件下的诱导表达第35-37页
     ·亚细胞定位分析第37-38页
       ·瞬时表达融合基因载体的构建第37页
       ·基因枪法介导的基因瞬时表达第37-38页
     ·转化拟南芥的研究第38-42页
       ·植物表达双元载体构建第38-40页
       ·拟南芥转化第40页
       ·阳性植株筛第40-41页
       ·转基因植株的抗性鉴定第41页
       ·转基因植株生理指标的测定第41-42页
     ·TaWRKY79 基因启动子的克隆第42-45页
       ·小麦 TaWRKY79 基因启动子的 PCR 扩增第42-43页
       ·PCR 产物的回收克隆与测序第43页
       ·小麦 TaWRKY79 基因启动子转化拟南芥的研究第43-45页
3 结果与分析第45-69页
   ·TaWRKY79 基因的克隆和鉴定第45-58页
     ·TaWRKY79 基因的克隆和序列分析第45-47页
     ·小麦 TaWRKY79 基因在不同胁迫条件下的表达分析第47-48页
     ·TaWRKY79 基因的亚细胞定位第48-49页
       ·TAWRKY79 瞬时表达载体构建第48页
       ·TAWRKY79 亚细胞定位第48-49页
     ·TaWRKY79 基因转化拟南芥第49-54页
       ·植物双元过表达载体的构建第49-50页
       ·植物双元过表达载体的农杆菌转化第50-51页
       ·转基因拟南芥的鉴定第51-52页
       ·转基因拟南芥的表型分析第52-54页
         ·转基因拟南芥的表型第52-53页
         ·过表达 TAWRKY79 的转基因拟南芥抗旱性分析第53-54页
     ·TaWRKY79 转基因株系中逆境相关基因的表达分析第54-55页
     ·转基因植株中脯氨酸含量的测定第55页
     ·TAWRKY79 基因启动子的克隆与分析第55-56页
     ·TaWRKY79 基因启动子的活性鉴定第56-58页
       ·植物双元过表达载体的构建第56页
       ·植物双元过表达载体的农杆菌转化第56-57页
       ·WP-GUS 重组体的拟南芥转化及筛选第57页
       ·启动子活性分析第57-58页
   ·TaWRKY80 基因的克隆和鉴定第58-69页
     ·TaWRKY80 基因的克隆和序列分析第58-60页
     ·TaWRKY80 基因的生物信息学分析第60-61页
     ·小麦 TaWRKY80 基因在不同胁迫条件下的表达分析第61-63页
       ·ABA 处理条件下 TaWRKY80 基因的表达分析第62页
       ·PEG 处理条件下 TaWRKY80 基因的表达分析第62页
       ·NaCl 处理条件下 TaWRKY80 基因的表达分析第62-63页
     ·TaWRKY80 基因的转化拟南芥分析第63-69页
       ·植物双元过表达载体的构建第63页
       ·植物双元过表达载体的农杆菌转化第63-64页
       ·转基因拟南芥的鉴定第64页
       ·转基因拟南芥的表型及抗逆性分析第64-67页
         ·转基因拟南芥的表型分析第64-66页
         ·转基因拟南芥的抗旱性分析第66-67页
       ·相关 MAKER 基因在转基因植株的上调表达分析第67-68页
       ·脯氨酸含量的测定第68-69页
4 讨论第69-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表论文情况第81页

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