中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-25页 |
·Ac/Ds 转座系统 | 第13-15页 |
·Ac/Ds 转座系统组成 | 第13-14页 |
·Ac/Ds 转座系统的应用 | 第14-15页 |
·Ac/Ds 转座系统所面临的问题 | 第15页 |
·诱导系统应用 | 第15-19页 |
·乙醇诱导系统的组成 | 第16-17页 |
·乙醇诱导系统的原理 | 第17页 |
·乙醇诱导系统的优点 | 第17-18页 |
·乙醇诱导系统的缺点 | 第18页 |
·乙醇诱导系统的应用 | 第18-19页 |
·乙醇诱导的 Ac/Ds 转座系统 | 第19-20页 |
·乙醇诱导的 Ac/Ds 转座系统的作用原理 | 第19-20页 |
·乙醇诱导的 Ac/Ds 转座系统的意义 | 第20页 |
·地塞米松诱导系统 | 第20-22页 |
·地塞米松诱导系统原理 | 第20-21页 |
·地塞米松诱导系统的应用 | 第21-22页 |
·地塞米松诱导系统的缺陷 | 第22页 |
·地塞米松诱导的 Ac/Ds 转座系统 | 第22-23页 |
·地塞米松诱导的 Ac/Ds 转座系统的作用原理 | 第22-23页 |
·地塞米松诱导的 Ac/Ds 转座系统的意义 | 第23页 |
·诱导型载体在玉米中的使用 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料和方法 | 第25-41页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25页 |
·酶及生化试剂 | 第25页 |
·PCR 引物 | 第25页 |
·培养基 | 第25页 |
·GUS 染色液 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-41页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第26-27页 |
·碱法小量提取质粒 DNA | 第26页 |
·试剂盒质粒微量提取方案 | 第26-27页 |
·电泳目的片段的回收 | 第27-28页 |
·DNA 片段与载体的连接 | 第28页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第28页 |
·DNA 片段与表达载体的连接 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第29页 |
·根癌农杆菌 LBA4404/GV3101 感受态细胞的制备 | 第29页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第29-30页 |
·拟南芥 DNA 提取 | 第30页 |
·CTAB 法提取拟南芥基因组总 DNA | 第30页 |
·拟南芥 RNA 提取 | 第30-31页 |
·利用 TRIZOL 法提取 RNA | 第30-31页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第31页 |
·定量 RT-PCR 分析 | 第31-32页 |
·乙醇诱导 | 第32页 |
·地塞米松诱导 | 第32页 |
·Tail-PCR | 第32-34页 |
·反向 PCR | 第34-36页 |
·接头 PCR | 第36-37页 |
·巢式 PCR | 第37-38页 |
·GUS 染色 | 第38-39页 |
·农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-51页 |
·乙醇诱导型表达载体 pHL1 功能验证 | 第41-46页 |
·乙醇诱导功能验证 | 第41页 |
·Ds 转座功能验证 | 第41-43页 |
·GUS 染色验证 Ds 转座功能 | 第42页 |
·利用巢式 PCR 分析 Ds 元件的转座 | 第42-43页 |
·Ds-GFP 插入位点的分析 | 第43-46页 |
·T-DNA 旁翼序列分析 | 第43-45页 |
·Ds-GFP 插入位点的分析 | 第45-46页 |
·地塞米松诱导型表达载体 pHL2 功能验证 | 第46-48页 |
·Ds 转座功能验证 | 第46-47页 |
·Ds-GFP 插入位点的分析 | 第47-48页 |
·T-DNA 旁翼序列分析 | 第47-48页 |
·Ds-GFP 插入位点的分析 | 第48页 |
·表达载体 pHL1 转化玉米 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-68页 |
附录一:玉米 IPT2 基因在玉米中的微量及根特异性表达分析 | 第61-66页 |
附录二:本文涉及到的基因及引物信息 | 第66-67页 |
附录三:玉米组培培养基 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |