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蓝细菌光敏色素AphC和RGS中GAF结构域的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
缩略语表第9-10页
1 序言第10-22页
   ·蓝细菌第10页
   ·光合作用第10-11页
   ·捕光天线第11-14页
     ·蓝细菌中的捕光结构第11-14页
   ·藻胆体第14-16页
     ·藻胆色素的生物合成第14-15页
     ·铁氧还蛋白依赖的胆色素还原酶第15-16页
   ·光敏色素的发现第16-18页
     ·光敏色素的结构和光化学性质第16-18页
   ·蓝细菌光敏色素的发现第18-21页
     ·蓝细菌光敏色素的特征第18-21页
   ·本课题的研究意义和展望第21-22页
2 AphC中GAF结构域的研究第22-45页
   ·序言第22-23页
   ·材料与试剂第23-25页
     ·主要材料第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·主要实验方法第25-32页
     ·藻总DNA的提取第25页
     ·PCR扩增基因片断第25-27页
     ·从琼脂糖凝胶中回收DNA第27页
     ·碱裂解法抽提质粒第27页
     ·克隆载体pBlu-gaf 1和pBlu-gaf 2的构建第27-28页
     ·感受态细胞的制备与质粒的转化(CaCl2法)第28-29页
     ·阳性克隆的挑取第29页
     ·表达质粒pET-30 a(+)-gaf 1和pET-30 a(+)-gaf 2的构建第29页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第29-30页
     ·多质粒转化与共表达第30页
     ·重组产物的超声破碎与提纯第30-31页
     ·蛋白质锌电泳第31页
     ·荧光量子产率的计算第31-32页
     ·色素蛋白的变性和摩尔消光系数的计算第32页
   ·结果与分析第32-44页
     ·AphC的GAF 1和GAF 2同源性分析第32-34页
     ·gaf 1和gaf 2的PCR结果第34-35页
     ·pBlu-gaf 1和pBlu-gaf 2构建的电泳图谱第35-36页
     ·pET-30 a(+)-gaf 1和pET-30 a(+)-gaf 2构建的电泳图谱第36-37页
     ·pET-30 a(+)-gaf 1和pET-30 a(+)-gaf 2的蛋白质电泳检测结果第37页
     ·pET-30 a(+)-gaf 1和pET-30 a(+)-gaf 2的测序结果第37-39页
     ·重组产物光谱分析第39-41页
     ·色素蛋白PCB-GAF 1的变性实验第41-43页
     ·色素蛋白SDS-PAGE电泳和锌电泳第43-44页
   ·讨论第44-45页
3 色素蛋白荧光探针第45-56页
   ·序言第45-46页
   ·村料与方法第46-47页
     ·主要材料第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46-47页
     ·主要实验方法第47-48页
     ·荧光显微镜的使用方法第47页
     ·细菌基因组DNA提取第47-48页
   ·结果与分析第48-54页
     ·minD和gaf3:ho1:pcyA的PCR结果第48页
     ·pBlue-minD构建的电泳图谱第48-49页
     ·pBlue-minD测序结果第49-51页
     ·pETDuet-minD构建的电泳图谱第51页
     ·pETDuet-minD的蛋白质电泳检测结果第51-52页
     ·pETDuet-minD:g3:ho1:pcyA构建的电泳图谱第52-53页
     ·pETDuet-minD:g3:ho1:pcyA的表达第53页
     ·pETDuet-minD:g3:ho1:pcyA的荧光显微镜图片第53-54页
   ·讨论第54-56页
参考文献第56-63页
附录第63-65页
致谢第65页

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