| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·蓝细菌 | 第10页 |
| ·藻胆蛋白 | 第10-11页 |
| ·藻胆色素的生物合成 | 第11-14页 |
| ·血红素氧化酶概述 | 第11-12页 |
| ·蓝细菌血红素氧化酶催化机制 | 第12-13页 |
| ·藻胆色素的生物合成 | 第13-14页 |
| ·胆色素类红色荧光蛋白概述 | 第14-16页 |
| ·荧光蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| ·胆色素类红色荧光蛋白 | 第15-16页 |
| ·红色荧光蛋白的改造 | 第16-22页 |
| ·荧光蛋白的进化方向 | 第16页 |
| ·定向进化概述 | 第16-17页 |
| ·定向进化的方法 | 第17-20页 |
| ·筛选策略 | 第20-22页 |
| ·定向进化对荧光蛋白的改造进展 | 第22页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 催化胆绿素和藻红胆素生成的相关克隆构建 | 第24-36页 |
| ·前言 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·所用试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·菌种的活化和接种 | 第27页 |
| ·大肠杆菌电转化法 | 第27-28页 |
| ·碱裂解法抽提质粒 | 第28页 |
| ·胶回收DNA | 第28页 |
| ·引物设计和标准PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的构建 | 第29-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·重组质粒pET-ho1的构建 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pET-cpeS：ho1的构建 | 第32-34页 |
| ·重组质粒pET-ho1：pebS的构建 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 CpeS：HO1随机突变和突变体荧光活性分析 | 第36-52页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·所用试剂 | 第37页 |
| ·实验仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·随机突变文库的构建方法 | 第38-39页 |
| ·筛选方法 | 第39-40页 |
| ·色素蛋白的表达纯化方法 | 第40-41页 |
| ·色素蛋白的荧光光谱和吸收光谱测定 | 第41页 |
| ·色素蛋白的酸性尿素变性 | 第41页 |
| ·荧光量子产率和摩尔消光系数的计算方法 | 第41-42页 |
| ·重组菌的荧光显微镜检测 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-51页 |
| ·CpeS：HO1突变文库的构建和检测 | 第43-45页 |
| ·筛选方法的探索和文库筛选 | 第45-46页 |
| ·突变体基因序列分析 | 第46页 |
| ·突变体的表达纯化分析 | 第46-47页 |
| ·突变体色素蛋白的光谱分析 | 第47-48页 |
| ·突变体色素蛋白的酸性尿素变性 | 第48页 |
| ·突变体荧光量子产率和摩尔消光吸收 | 第48-50页 |
| ·突变体荧光显微镜的检验 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 HO1随机突变和荧光活性分析 | 第52-63页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·引物设计 | 第52-53页 |
| ·易错PCR的优化 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-61页 |
| ·HO1随机突变文库的构建和分析 | 第53-57页 |
| ·HO1随机突变的筛选 | 第57页 |
| ·HO1突变体荧光分析 | 第57-58页 |
| ·HO1突变体色素蛋白的酸性尿素变性 | 第58-59页 |
| ·荧光量子产率和摩尔消光系数的计算 | 第59-60页 |
| ·HO1突变体荧光显微镜的检验 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70页 |