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松材线虫的早期诊断、快速检测技术及松材线虫与拟松材线虫的差异蛋白质组研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-15页
缩略语第15-17页
第一章 绪论第17-32页
 1 松材线虫检测技术研究进展第17-24页
   ·松材线虫病概述第17页
   ·松材线虫与近缘种-拟松材线虫的关系第17-18页
   ·松材线虫的检测技术第18-24页
 2 荧光PCR技术第24-29页
   ·实时荧光PCR的定量分析能力第25页
   ·主要的荧光化学技术第25-29页
 3 蛋白质组学技术第29-32页
   ·差异蛋白质组学第29页
   ·蛋白质组学的分析技术第29-32页
第二章 基于快速分离器和分子检测方法的松材线虫快速检测体系第32-58页
 1 引言第32-34页
 2 材料与方法第34-41页
   ·实验材料第34-36页
   ·实验方法第36-41页
 3 结果与分析第41-54页
   ·松材线虫与拟松材线虫rDNA序列比对第41-43页
   ·特异引物的设计第43-44页
   ·荧光PCR检测体系第44-49页
   ·常规PCR检测体系第49-51页
   ·送检松木样品的检测第51-54页
 4 讨论第54-58页
   ·DNA提取方法的改进第54页
   ·快速检测体系的PCR效率第54页
   ·快速检测体系的特异性第54-55页
   ·快速检测体系的灵敏性第55-56页
   ·快速检测体系在实际应用中的效果第56页
   ·荧光PCR快速检测体系的样品定量分析第56-57页
   ·快速检测体系的应用价值第57-58页
第三章 应用荧光PCR检测体系监测松墨天牛携带线虫情况的研究第58-68页
 1 引言第58-59页
 2 材料与方法第59-62页
   ·实验材料第59-60页
   ·实验方法第60-62页
 3 结果与分析第62-66页
   ·天牛解剖观察第62页
   ·乙醇固定剂对荧光PCR检测的影响第62-65页
   ·乙醇固定的天牛体内检获线虫的荧光PCR鉴定第65-66页
 4 讨论第66-68页
   ·固定剂选择第66页
   ·固定剂使用方案设计第66-67页
   ·实际应用及后续工作第67-68页
第四章 基于"早期检测管"与Y型等长双链探针-实时荧光PCR快速检测技术的松材线虫病早期诊断体系第68-86页
 1 引言第68-69页
   ·新型可靠的检测手段第68-69页
   ·快速灵敏的检测技术第69页
 2 材料与方法第69-73页
   ·实验材料第69-70页
   ·实验方法第70-73页
 3 结果与分析第73-82页
   ·松材线虫特异引物及探针的设计第73-76页
   ·Y型荧光探针的设计合理性与特异性第76-78页
   ·Y型荧光探针检测松材线虫的特异性第78-79页
   ·Y型荧光探针的检测灵敏度第79-80页
   ·疑似病树调查结果第80-81页
   ·Y型荧光探针对阳性松木感染病原线虫的检测第81-82页
 4 讨论第82-86页
   ·该松材线虫早期检测体系的技术优势第82-83页
   ·引物和探针的设计第83-84页
   ·Y型荧光探针的设计合理性与特异性检验第84页
   ·Y型探针-荧光PCR体系的特异性与灵敏性第84页
   ·早期诊断体系的实际效果第84-86页
第五章 松材线虫与拟松材线虫的差异蛋白质组研究第86-105页
 1 引言第86-87页
 2 材料和方法第87-94页
   ·实验材料第87-90页
   ·实验方法第90-94页
 3 结果与分析第94-97页
   ·松材线虫和拟松材线虫的蛋白质表达差异第94页
   ·差异表达蛋白点的MALDI-TOF质谱分析与鉴定第94-97页
 4 讨论第97-105页
   ·双向电泳过程中出现的问题及解决方法第97-98页
   ·质谱分析与肽指纹图谱第98-99页
   ·跨物种蛋白鉴定在该研究中的应用第99-101页
   ·差异蛋白与松材线虫致病机理的讨论第101-105页
总结第105-107页
参考文献第107-113页
致谢第113页

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