摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-16页 |
·抗菌肽简介 | 第10页 |
·抗菌肽作用 | 第10页 |
·防御素简介 | 第10-11页 |
·防御素的种类 | 第11页 |
·防御素分子结构及表达部位 | 第11-12页 |
·α-防御素 | 第11页 |
·β-防御素 | 第11页 |
·θ-防御素 | 第11页 |
·植物防御素 | 第11-12页 |
·昆虫防御素 | 第12页 |
·防御素的作用及其机理 | 第12-14页 |
·哺乳动物防御素的作用 | 第12-13页 |
·植物防御素的作用 | 第13-14页 |
·昆虫防御素的作用 | 第14页 |
·防御素的应用 | 第14-16页 |
·防御素与基因工程 | 第14-15页 |
·防御素与临床应用 | 第15页 |
·防御素的其他应用 | 第15-16页 |
2 pET-32a(+)/reBD-1 原核表达载体的构建 | 第16-31页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·菌珠 | 第16页 |
·载体及酶 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·主要实验仪器 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·引物 | 第17页 |
·驯鹿总RNA 的提取 | 第17-19页 |
·驯鹿总RNA 的检测 | 第19页 |
·RT-PCR 反转录扩增reBD-1 基因 | 第19-20页 |
·目的片段的回收 | 第20-21页 |
·克隆载体的构建 | 第21-23页 |
·编码reBD-1 成熟肽基因的扩增 | 第23页 |
·原核表达体系的构建 | 第23-25页 |
·结果 | 第25-30页 |
·总RNA 的检测结果 | 第25-26页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
·reBD-1 重组质粒的筛选和鉴定 | 第27-28页 |
·reBD-1 重组质粒序列分析 | 第28-29页 |
·reBD-1 成熟肽基因的克隆 | 第29页 |
·pET-32a(+)- reBD-1 重组质粒的鉴定结果 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·载体及菌株的选择 | 第30-31页 |
·关于reBD-1 成熟肽的特性 | 第31页 |
·小结 | 第31页 |
3 pET-32a(+)/reBD-1 融合蛋白的表达及纯化 | 第31-44页 |
·材料 | 第31-32页 |
·菌株与质粒 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要实验仪器 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-40页 |
·重组蛋白pET-32a(+)/reBD-1 的诱导表达 | 第32-33页 |
·主要试剂的配制 | 第33页 |
·目的蛋白原核表达及诱导表达条件的优化 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第34-36页 |
·大量表达靶蛋白 | 第36-37页 |
·目的蛋白的纯化与复性 | 第37-40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·目的蛋白表达条件的优化 | 第40-41页 |
·重组蛋白表达形式的分析 | 第41-42页 |
·目的蛋白的纯化 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43页 |
·小结 | 第43-44页 |
4 pET-32a(+)/reBD-1 重组蛋白生物活性的研究 | 第44-46页 |
·材料 | 第44页 |
·方法 | 第44页 |
·结果 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45页 |
·小结 | 第45-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
作者简介 | 第54页 |