1.引言 | 第1-19页 |
·立题背景和意义 | 第9页 |
·诺瓦克样病毒简介 | 第9-12页 |
·病毒的分类 | 第9-10页 |
·形态学特征和理化特性 | 第10页 |
·基因组结构和分类 | 第10-11页 |
·病毒的遗传变异 | 第11-12页 |
·病毒的繁殖 | 第12页 |
·病毒的致病性和流行病学 | 第12-14页 |
·致病机制 | 第12页 |
·临床症状 | 第12页 |
·流行情况 | 第12-13页 |
·传播途径 | 第13页 |
·病毒通过贝类的传播 | 第13-14页 |
·诺瓦克病毒性腹泻的预防与控制 | 第14页 |
·NLVS检测方法研究现状 | 第14-18页 |
·电镜法 | 第14-15页 |
·免疫法 | 第15-16页 |
·Reverse transcript-polymerase chains reaction,RT-PCR法: | 第16-17页 |
·荧光定量PCR | 第17-18页 |
·序列特异性核酸体外扩增技术(Nucleic acid specific-based amplification,NASBA) | 第18页 |
·论文的研究目的和研究方法 | 第18-19页 |
2.材料与方法 | 第19-28页 |
·毒株和细胞系 | 第19页 |
·配制试剂 | 第19-20页 |
·MEM基础培养基(含谷胺酰胺) | 第19页 |
·双抗 | 第19页 |
·组织细胞生长液 | 第19页 |
·消化液 | 第19-20页 |
·变性裂解液 | 第20页 |
·甘氨酸缓冲液 | 第20页 |
·磷酸缓冲液 | 第20页 |
·仪器与设备 | 第20-21页 |
·样品与其它试剂 | 第21页 |
·研究方法 | 第21-28页 |
·RT-PCR检测方法建立 | 第21-22页 |
·RT-PCR检测贝类中人工污染的诺瓦克样病毒 | 第22-23页 |
·诺瓦克样病毒回收率的测定 | 第23-24页 |
·贝类中诺瓦克样病毒回收富集方法优化 | 第24-25页 |
·贝类中诺瓦克样病毒RNA提取方法比较 | 第25-26页 |
·RT-PCR实际检测贝类中的诺瓦克样病毒 | 第26-28页 |
3.结果与分析 | 第28-40页 |
·RT-PCR反应条件优化结果 | 第28-30页 |
·最适Mg~(2+)浓度优化 | 第28-29页 |
·最适退火温度优化 | 第29页 |
·最适引物量优化 | 第29-30页 |
·最适反应循环数优化 | 第30页 |
·RT-PCR方法的灵敏度 | 第30-32页 |
·病毒液滴度测定 | 第30-32页 |
·RT-PCR方法的灵敏度测定 | 第32页 |
·RT-PCR产物测序 | 第32-33页 |
·RT-PCR检测贝类中人工污染诺瓦克样病毒的结果 | 第33页 |
·贝类人工污染的诺瓦克样病毒回收率测定 | 第33-35页 |
·样品中病毒原液量的测定 | 第34-35页 |
·人工污染后病毒量的测定 | 第35页 |
·贝类中诺瓦克样病毒回收富集方法优化 | 第35-36页 |
·贝类中诺瓦克样病毒RNA提取方法比较 | 第36-37页 |
·RT-PCR方法实际检测贝类中的诺瓦克样病毒 | 第37-40页 |
4.讨论 | 第40-44页 |
·RT-PCR检测诺瓦克样病毒 | 第40页 |
·RT-PCR方法的建立 | 第40-41页 |
·引物的选择 | 第40-41页 |
·RT-PCR条件优化 | 第41页 |
·病毒的浓缩富集 | 第41-42页 |
·RNA提取方法 | 第42页 |
·诺瓦克样病毒污染的监测 | 第42-44页 |
5.结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
附录 | 第52-53页 |
在读期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |