中文摘要 | 第1-9页 |
1 文献综述 | 第9-20页 |
·病毒病发生危害及防治策略 | 第9页 |
·现有的抗病毒基因工程策略及其评价 | 第9-18页 |
·利用病毒自身编码的基因 | 第9-16页 |
·外壳蛋白(Coat protein,CP)基因策略 | 第9-11页 |
·移动蛋白(Movement Protein,MP)基因策略 | 第11-12页 |
·复制酶(Replicase)基因策略 | 第12-13页 |
·RNA介导的抗病性 | 第13-16页 |
·RNA介导抗病性的一般特征 | 第13页 |
·RNA介导病毒抗性的模型 | 第13-14页 |
·其它RNA抗病毒策略 | 第14-16页 |
·卫星RNA(satellite RNA,satRNA)策略 | 第14-15页 |
·反义RNA(antisenseRNA,antRNA)策略 | 第15页 |
·缺陷干扰型RNA策略 | 第15页 |
·双链RNA(dsRNA)策略 | 第15-16页 |
·植物自身编码的抗病毒基因策略 | 第16-17页 |
·病程相关蛋白 | 第16页 |
·抗TMV的N基因 | 第16页 |
·核糖体失活蛋白基因(RIPs) | 第16-17页 |
·其它抗病毒策略 | 第17-18页 |
·核酶(Ribozyme)策略 | 第17页 |
·干扰素(IFN)策略 | 第17-18页 |
·提高转基因工程植株抗病性的新策略 | 第18页 |
·多基因策略 | 第18页 |
·分离新的抗病毒基因 | 第18页 |
·展望 | 第18-20页 |
2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
3 材料和方法 | 第21-27页 |
·实验材料 | 第21页 |
·菌株、质粒和烟草品种 | 第21页 |
·酶和试剂 | 第21页 |
·基本分子生物学方法 | 第21-23页 |
·质粒的小量提取 | 第21页 |
·质粒的大量提取 | 第21-22页 |
·质粒的酶切和连接方法 | 第22页 |
·DNA片段的回收纯化 | 第22-23页 |
·超低温冻融法 | 第22页 |
·试剂盒回收 | 第22-23页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
·转化大肠杆菌 | 第23页 |
·重组质粒的单菌落直接快速鉴定法(Cracking) | 第23页 |
·地黄花叶病毒(ReMV)移动蛋白(MP)基因的缺失改造 | 第23页 |
·缺失型移动蛋白(MP)基因植物表达载体的构建 | 第23-24页 |
·植物表达载体向农杆菌的转化 | 第24页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
·农杆菌的转化 | 第24页 |
·外源基因对烟草的遗传转化 | 第24-25页 |
·菌液的准备 | 第24页 |
·外源基因对烟草的转化 | 第24-25页 |
·转基因烟草的PCR检测 | 第25-26页 |
·植物总DNA的提取(CTAB法) | 第25页 |
·转化植株的PCR检测 | 第25-26页 |
·转基因植株的抗病性鉴定 | 第26-27页 |
·病毒接种 | 第26页 |
·症状观察 | 第26-27页 |
4 结果与分析 | 第27-36页 |
·地黄花叶病毒(ReMV)移动蛋白(MP)基因的缺失改造及植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
·植物表达载体向土壤农杆菌的转化 | 第29-30页 |
·ReMV全长和四种缺失型MP基因以及ReMV cP基因对烟草的遗传转化 | 第30-32页 |
·再生烟草植株的PCR鉴定 | 第32-36页 |
5 结论与讨论 | 第36-37页 |
·结论 | 第36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
Abstract | 第43页 |