| 英文缩写词表 | 第1-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1. 前列腺癌的研究进展 | 第13-19页 |
| ·前列腺癌的发生发展 | 第13-14页 |
| ·前列腺癌肿瘤相关抗原(TAA)和前列腺特异性抗原(PSA) | 第14-15页 |
| ·PSA 的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·前列腺癌患者的免疫状态 | 第16页 |
| ·免疫系统识别肿瘤细胞 | 第16-17页 |
| ·前列腺癌的免疫治疗 | 第17-18页 |
| ·表达人PSA 抗原表位的动物模型 | 第18-19页 |
| 2. 热休克蛋白在肿瘤免疫治疗中的应用 | 第19-25页 |
| ·HSP 具有分子伴侣功能 | 第19页 |
| ·HSP 具有载体功能 | 第19-21页 |
| ·HSP 具有交叉提呈作用 | 第21页 |
| ·HSP 具有活化抗原提呈细胞(APC)作用 | 第21页 |
| ·HSP-肽复合物或HSP-融合蛋白对特异性CTL 的激活 | 第21-22页 |
| ·HSP-多肽复合物或融合蛋白临床研究进展 | 第22-23页 |
| ·HSP 的受体和信号传递 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-48页 |
| 1. 实验材料 | 第25-27页 |
| ·抗体 | 第25页 |
| ·细胞因子 | 第25页 |
| ·化学试剂 | 第25页 |
| ·质粒、菌种和蛋白 | 第25-26页 |
| ·试剂盒 | 第26页 |
| ·细胞株和实验动物 | 第26页 |
| ·层析用介质 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·缓冲液 | 第26页 |
| ·PSA 与MUC1 表位肽 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| 2. 实验方法 | 第27-48页 |
| ·稳定表达人PSA 或MUC1 蛋白的小鼠肿瘤细胞系的建立与鉴定 | 第27-31页 |
| ·HSP65-PSA 和HSP65 融合蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第31-34页 |
| ·HSP65-PSA 蛋白疫苗的小鼠体内抑瘤实验 | 第34-35页 |
| ·针对 HSP65 蛋白的单克隆抗体制备、鉴定与应用 | 第35-38页 |
| ·树突状细胞表面HSP65 受体研究 | 第38-43页 |
| ·HSP65-PSA 重组蛋白人体外功能实验 | 第43-48页 |
| 第三章 实验结果 | 第48-111页 |
| 1. 表达人PSA 或MUC1 蛋白的小鼠肿瘤细胞系的建立 | 第48-66页 |
| ·质粒的纯化与鉴定 | 第49-50页 |
| ·机械介导方法提高脂质体转染效率 | 第50-51页 |
| ·改良法与传统法在转染和克隆筛选方面的比较 | 第51-52页 |
| ·转染细胞的选择培养和克隆筛选 | 第52-53页 |
| ·转染细胞的克隆筛选特性 | 第53-54页 |
| ·激光共聚焦显微镜检侧 | 第54-55页 |
| ·流式细胞术检测 | 第55-56页 |
| ·转染细胞表达目的蛋白 PSA 的细胞免疫荧光鉴定结果 | 第56-57页 |
| ·转染细胞表达目的蛋白 MUC1 的细胞免疫荧光鉴定结果 | 第57-58页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第58-59页 |
| ·转染细胞稳定性的初步观察 | 第59-61页 |
| ·转染细胞形态结构变化 | 第61-63页 |
| ·转染细胞体内种植实验 | 第63-66页 |
| 2. HSP65-PSA 和 HSP65 重组蛋白的纯化与鉴定 | 第66-68页 |
| ·蛋白定量 | 第67页 |
| ·蛋白的纯度检测 | 第67-68页 |
| ·LPS 检测 | 第68页 |
| 3. HSP65-PSA 重组蛋白的抑瘤效应 | 第68-71页 |
| ·HSP65-PSA 对B16/PSA 肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第68-69页 |
| ·HSP65-PSA 对PSA-RM1 肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第69-71页 |
| 4. HSP65 单克隆抗体的制备、鉴定与应用 | 第71-80页 |
| ·鼠免疫血清中特异性抗体检测 | 第71-72页 |
| ·细胞融合和阳性筛选结果 | 第72-73页 |
| ·抗体效价检测 | 第73-74页 |
| ·抗体特异性鉴定 | 第74-75页 |
| ·杂交瘤细胞产生抗体的亚型分析 | 第75-76页 |
| ·杂交瘤细胞核型分析结果 | 第76-77页 |
| ·抗体的竞争抑制试验 | 第77-78页 |
| ·HSP65McAb 在HSP65-MUC1 鉴定中的应用 | 第78-79页 |
| ·HSP65 McAb 在HSP65 融合蛋白功能研究中的应用 | 第79-80页 |
| 5. DC 表面的HSP65 蛋白受体研究 | 第80-97页 |
| ·FITC-HSP65 蛋白纯化 | 第80-81页 |
| ·FITC-HSP65 蛋白的鉴定 | 第81-84页 |
| ·DC 的诱导与分化结果 | 第84-85页 |
| ·HSP65 与DCs 结合的流式细胞术检测结果 | 第85-86页 |
| ·HSP65 特异性结合DC 表面受体 | 第86-87页 |
| ·HSP65 在37℃条件下的内化结果 | 第87-90页 |
| ·FITC-HSP65 结合DC 表面受体的饱和曲线 | 第90-91页 |
| ·HSP65 重组蛋白对FITC-HSP65 竞争抑制作用结果 | 第91-92页 |
| ·HSP65 McAb 对FITC-HSP65 结合 DCs 的竞争抑制 | 第92-93页 |
| ·CD91 分子与HSP65 受体在DC 表面的分布相关性 | 第93-94页 |
| ·HSP65 蛋白刺激DC 表达CD86 分子 | 第94-95页 |
| ·LPS 与HSP65 和细胞成熟因子刺激DC 成熟能力的比较 | 第95-96页 |
| ·影响 DC 表面受体表达的一些因素 | 第96-97页 |
| 6. 人体外功能实验 | 第97-111页 |
| ·单核细胞表面 MHC-A2 分子的检测 | 第98-99页 |
| ·显微镜检测HSP65-PSA 蛋白对DC 的刺激成熟作用 | 第99-100页 |
| ·流式细胞术检测HSP65-PSA 对DC 的刺激成熟作用 | 第100-101页 |
| ·装载 HSP65-PSA 的mDCs 刺激naiveT 细胞的增殖 | 第101-102页 |
| ·装载 HSP65-PSA 的mDCc 刺激产生 CD8+T 淋巴细胞的比例 | 第102-103页 |
| ·MHCⅠ类分子Dimer 染色法分析特异性CTL | 第103-105页 |
| ·ELISPOT 法原位检测IFNγ的分泌结果 | 第105-107页 |
| ·T2 细胞表面表达HLA-A2 检测 | 第107-108页 |
| ·T2 细胞表面HLA-A2 分子与PSA 表位肽的亲合力 | 第108-109页 |
| ·人体外PSA 特异的 CTL 杀伤试验结果 | 第109-111页 |
| 第四章 讨论 | 第111-127页 |
| 1. PSA 治疗性疫苗的应用前景 | 第111-112页 |
| 2. 前列腺癌表位的选取及其在抗肿瘤免疫中的作用 | 第112-113页 |
| 3. HSP65-PSA 疫苗的设计 | 第113-115页 |
| 4. 改良的脂质体转染方法 | 第115-117页 |
| 5. 转染细胞的特性鉴定 | 第117-118页 |
| 6. 前列腺癌动物模型的制备 | 第118-119页 |
| 7. HSP65-PSA 融合蛋白在小鼠体内抑瘤效应分析 | 第119-120页 |
| 8. DC 表面存在HSP65 受体 | 第120-122页 |
| 9. HSP65-PSA 蛋白在人体外诱生出人 PSA 特异性的 CTL | 第122-124页 |
| 10. HSP65 单克隆抗体制备与应用 | 第124-127页 |
| 结论 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-134页 |
| 攻读博士学位期间已发表文章 | 第134-135页 |
| 中文摘要 | 第135-143页 |
| ABSTRACT | 第143-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 个人简历 | 第152页 |
