上篇 文献综述 | 第1-24页 |
第一节 西瓜果斑病菌和番茄溃疡病菌的分布及危害 | 第9-13页 |
1. 西瓜果斑病病原菌 | 第9页 |
2. 西瓜果斑病菌寄主范围与分布 | 第9-10页 |
3. 西瓜果斑病菌的危害 | 第10-11页 |
4. 番茄溃疡病病原菌 | 第11页 |
5. 番茄溃疡病菌寄主范围与分布 | 第11-12页 |
6. 番茄溃疡病的危害 | 第12-13页 |
第二节 种传植物病害植物病原细菌的检测技术研究进展 | 第13-23页 |
1. 传统检测方法 | 第13-14页 |
2. 生物化学标记 | 第14-16页 |
2.1 物质代谢 | 第14页 |
2.2 脂肪酸分析(FAME分析) | 第14页 |
2.3 蛋白分析 | 第14-15页 |
2.4 血清学技术 | 第15-16页 |
2.4.1 免疫荧光分析法(Immunofluorescence,IF) | 第15页 |
2.4.2 免疫吸附免疫荧光(ISIF) | 第15页 |
2.4.3 免疫荧光菌落染色(IFC) | 第15-16页 |
2.4.4 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第16页 |
2.4.5 直接琼脂双扩散(DDD) | 第16页 |
2.4.6 免疫吸附富集(ISE) | 第16页 |
2.4.7 免疫亲和分离(IAI) | 第16页 |
3. DNA分子检测技术 | 第16-23页 |
3.1 分子杂交检测法 | 第16-17页 |
3.2 经典PCR技术 | 第17-20页 |
3.2.1 特殊的基因或DNA序列鉴定病害 | 第17-18页 |
3.2.2 基因指纹图谱法 | 第18-20页 |
3.3 与免疫学技术相结合的PCR检测方法 | 第20-21页 |
3.3.1 免疫PCR(Immuno-PCR) | 第20-21页 |
3.3.2 免疫磁性分离-PCR(IMS-PCR) | 第21页 |
3.4 实时荧光定量 PCR | 第21-23页 |
本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
下篇 研究报告 | 第24-47页 |
第一节 实验材料与方法 | 第24-30页 |
1. 实验材料 | 第24-25页 |
1.1 供试培养基: | 第24页 |
1.2 参试菌株 | 第24页 |
1.3 试剂和材料 | 第24页 |
1.4 实验动物 | 第24-25页 |
2. 实验方法 | 第25-30页 |
2.1 抗血清的制备 | 第25-27页 |
2.1.1 制备抗血清的菌株: | 第25页 |
2.1.2 免疫原的制备 | 第25-26页 |
2.1.3 抗体制备 | 第26页 |
2.1.4 抗血清效价的测定 | 第26-27页 |
2.1.5 抗血清的专化性测定 | 第27页 |
2.2 引物的制备 | 第27页 |
2.3 直接PCR反应检测 | 第27-29页 |
2.3.1 模板的制备: | 第27页 |
2.3.2 反应体系 | 第27-28页 |
2.3.3 反应步骤 | 第28-29页 |
2.4 免疫捕捉 PCR反应检测 | 第29页 |
2.5 两种方法的灵敏度的检测 | 第29页 |
2.6 免疫捕捉 PCR反应特异性的检测 | 第29页 |
2.7 未知番茄病害病原细菌检测 | 第29-30页 |
2.7.1 病原菌的分离和纯化 | 第29页 |
2.7.2 病原菌的致病性测定 | 第29页 |
2.7.3 病原菌的形态观察及染色 | 第29页 |
2.7.4 病原菌的细菌学培养性状 | 第29-30页 |
2.7.5 病原菌的分子检测 | 第30页 |
2.8 模拟病种两种方法的检测比较 | 第30页 |
2.9 市售西瓜、哈密瓜、番茄不同品种带菌情况的检测 | 第30页 |
第二节 实验结果与分析 | 第30-43页 |
1. 抗血清效价测定结果 | 第30-31页 |
2. 抗血清专化性的ODD测定结果 | 第31-32页 |
3. 西瓜果斑病检测结果 | 第32-39页 |
3.1 直接 PCR反应 | 第32-34页 |
3.2 直接 PCR与免疫捕捉 PCR灵敏度的比较 | 第34-39页 |
3.2.1 两种 PCR法检测限 | 第34页 |
3.2.2 两种方法对人为致病种子的检测 | 第34-36页 |
3.2.3 两种方法对市场西瓜、甜瓜、哈密瓜种子的检测 | 第36页 |
3.2.4 用试剂盒对86-1进行检测 | 第36-39页 |
4 未知番茄病原细菌的鉴定 | 第39页 |
4.1 致病性测定结果 | 第39页 |
4.2 细菌的形态及染色反应 | 第39页 |
4.3 细菌学培养性状 | 第39页 |
4.4 PCR检测 | 第39页 |
5 番茄溃疡病的检测 | 第39-43页 |
5.1 直接 PCR反应结果 | 第39-40页 |
5.2 直接 PCR和免疫捕捉 PCR灵敏性的比较 | 第40-43页 |
5.2.1 两种 PCR法检测限 | 第40页 |
5.2.2 两种方法对市场番茄种子的检测 | 第40-43页 |
第三节 讨论和结论 | 第43-47页 |
1. 讨论 | 第43-46页 |
2. 结论 | 第46-47页 |
照片 | 第47-49页 |
试剂盒成分说明 | 第49-50页 |
1. 检测西瓜果斑病菌试剂盒 | 第49页 |
2. 检测番茄溃疡病菌试剂盒 | 第49-50页 |
参考资料: | 第50-55页 |
Abstract | 第55-57页 |
发表文献 | 第57-58页 |
致谢: | 第58页 |