末端修饰的PAMAM非病毒基因治疗载体的研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·基因治疗概述 | 第8-11页 |
| ·基因治疗基本概念 | 第8页 |
| ·基因治疗的步骤 | 第8-9页 |
| ·发展过程及现状 | 第9-11页 |
| ·病毒基因载体 | 第11-12页 |
| ·病毒基因载体的发展状况 | 第11-12页 |
| ·病毒基因载体的缺陷 | 第12页 |
| ·非病毒基因载体 | 第12-15页 |
| ·裸DNA | 第13-14页 |
| ·脂质体/DNA 复合物 | 第14页 |
| ·阳离子聚合物/DNA 复合物 | 第14-15页 |
| ·其他非病毒载体 | 第15页 |
| ·PAMAM 作为基因传递载体的特点 | 第15-16页 |
| ·疏水作用在基因传递系统中的作用 | 第16页 |
| ·不同比例阳离子聚合物/质粒样品的制备 | 第16-17页 |
| ·常用的阳离子聚合物基因载体检测方法 | 第17-20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| ·溴乙啶荧光发射 | 第17-18页 |
| ·Zeta 电势 | 第18页 |
| ·多角度激光散射 | 第18-19页 |
| ·原子力显微镜 | 第19页 |
| ·DNA 的紫外热变性 | 第19-20页 |
| ·其它检测 | 第20页 |
| ·动物细胞实验检测 | 第20-21页 |
| ·本文的主要工作 | 第21-22页 |
| 第二章 PAMAM 的表面氨基酸修饰及检测 | 第22-29页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·材料和方法 | 第23-25页 |
| ·实验试剂和设备 | 第23-24页 |
| ·PAMAM 聚合物的氨基酸修饰 | 第24-25页 |
| ·核磁共振检测 | 第25页 |
| ·实验结果与讨论 | 第25-27页 |
| ·NMR 检测结果 | 第25-26页 |
| ·NMR 结果的定量分析 | 第26-27页 |
| ·本章小结 | 第27-29页 |
| 第三章 质粒的提取和纯化 | 第29-38页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料和方法 | 第29-33页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·实验菌种和质粒 | 第30页 |
| ·溶液配制 | 第30-31页 |
| ·菌体培养 | 第31页 |
| ·碱裂解法粗提质粒 | 第31-32页 |
| ·离子交换色谱法纯化质粒 | 第32页 |
| ·聚乙二醇沉淀法提取质粒DNA 的方法 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-36页 |
| ·色谱法纯化质粒结果 | 第33-34页 |
| ·粗提质粒和色谱纯化质粒的电泳检测 | 第34-35页 |
| ·聚乙二醇法提取质粒的电泳检测 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第四章 聚合物/质粒 DNA 复合物的配置和检测 | 第38-48页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料和方法 | 第38-42页 |
| ·实验设备和试剂 | 第38-39页 |
| ·不同比例聚合物/质粒复合物的制备 | 第39-40页 |
| ·电泳检测 | 第40-41页 |
| ·溴乙锭荧光检测 | 第41页 |
| ·多角度激光散射检测 | 第41页 |
| ·透射电镜检测 | 第41-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-47页 |
| ·电泳实验结果 | 第42-43页 |
| ·溴乙锭荧光检测结果 | 第43-45页 |
| ·多角度激光散射结果 | 第45-46页 |
| ·透射电镜实验结果 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第五章 动物细胞毒性和转染效率实验 | 第48-58页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料和方法 | 第48-51页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第48-49页 |
| ·实验用培养基及溶液配置方法 | 第49页 |
| ·实验细胞的准备 | 第49页 |
| ·毒性实验操作方案 | 第49-50页 |
| ·细胞转染实验操作方案 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-56页 |
| ·毒性实验结果 | 第51-53页 |
| ·转染实验结果 | 第53-56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 第六章 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·全文结论 | 第58页 |
| ·建议和展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
