| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一部分 文献综述及研究目的和意义 | 第10-18页 |
| 第一章 文献综述及研究目的和意义 | 第10-18页 |
| 1.疱疹病毒衣壳蛋白研究进展 | 第10-14页 |
| ·衣壳结构基本特征 | 第10-11页 |
| ·衣壳蛋白的特征 | 第11-12页 |
| ·衣壳的组装 | 第12-14页 |
| ·组装中间体 | 第14页 |
| 2.RNA干扰在动物病毒病防治中的研究进展 | 第14-17页 |
| ·RNAi在常见畜禽疾病中的研究 | 第15页 |
| ·RNAi在猪主要病毒感染中的研究 | 第15-16页 |
| ·RNAi在禽主要病毒感染中的研究 | 第16页 |
| ·RNAi在重要人兽共患病中的研究 | 第16-17页 |
| 3. 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 试验研究 | 第18-56页 |
| 第二章 UL38基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第18-26页 |
| 1.材料 | 第18页 |
| 2.方法 | 第18-19页 |
| ·同源性分析 | 第18页 |
| ·蛋白的组成及其功能预测 | 第18-19页 |
| ·抗原性分析 | 第19页 |
| ·稀有密码子分析 | 第19页 |
| 3.结果 | 第19-25页 |
| ·同源性分析 | 第19-22页 |
| ·核苷酸同源性分析 | 第19页 |
| ·氨基酸同源性分析 | 第19-22页 |
| ·蛋白的组成及其功能预测 | 第22-23页 |
| ·信号肽 | 第22页 |
| ·跨膜区 | 第22-23页 |
| ·功能位点 | 第23页 |
| ·亚细胞定位 | 第23页 |
| ·抗原性分析 | 第23-24页 |
| ·稀有密码子分析 | 第24-25页 |
| 4. 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 UL38基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 | 第26-40页 |
| 1.材料 | 第26-29页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·毒株、菌株、细胞和载体 | 第26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·细胞培养试剂 | 第27-28页 |
| ·分子生物学试剂 | 第28页 |
| ·化学试剂 | 第28页 |
| ·主要溶剂及其配制方法 | 第28页 |
| ·主要试验器材及仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.方法 | 第29-33页 |
| ·目的基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·DPV基因组的提取 | 第29页 |
| ·目的基因的扩增 | 第29页 |
| ·PCR产物的克隆与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的原核表达及鉴定 | 第30-32页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第30页 |
| ·目的基因的诱导表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·表达产物的鉴定及抗原性分析 | 第31-32页 |
| ·多克隆抗体的制备及鉴定 | 第32-33页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第32-33页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第33页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第33页 |
| 3. 结果 | 第33-38页 |
| ·目的基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·目的基因的扩增 | 第33页 |
| ·重组克隆载体的鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白的原核表达及鉴定 | 第34-37页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·目的基因的诱导表达与纯化 | 第35-36页 |
| ·表达产物的鉴定及抗原性分析 | 第36-37页 |
| ·多克隆抗体的特征 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第37页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第37-38页 |
| 4.讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 UL38基因产物的表达时相及细胞内定位研究 | 第40-50页 |
| 1.材料 | 第40-42页 |
| ·毒株、菌株、细胞和载体 | 第40页 |
| ·引物 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·细胞培养试剂 | 第41页 |
| ·分子生物学试剂 | 第41页 |
| ·化学试剂 | 第41页 |
| ·主要溶剂及其配制方法 | 第41-42页 |
| ·主要试验器材及仪器设备 | 第42页 |
| 2.方法 | 第42-44页 |
| ·表达时相研究 | 第42页 |
| ·样品的制备 | 第42页 |
| ·Western blot分析 | 第42页 |
| ·细胞内定位研究 | 第42-44页 |
| ·间接免疫荧光法 | 第42-43页 |
| ·融合表达EGFP | 第43-44页 |
| 3.结果 | 第44-47页 |
| ·表达时相特征 | 第44页 |
| ·细胞内定位特征 | 第44-47页 |
| ·间接免疫荧光法 | 第44-45页 |
| ·融合表达EGFP | 第45-47页 |
| 4.讨论 | 第47-50页 |
| 第五章 RNAi靶向UL38基因抑制DPV复制研究 | 第50-56页 |
| 1.材料 | 第50-51页 |
| ·毒株和细胞 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·细胞培养试剂 | 第50页 |
| ·分子生物学试剂 | 第50页 |
| ·化学试剂 | 第50页 |
| ·主要溶剂及其配制方法 | 第50页 |
| ·主要试验器材及仪器设备 | 第50-51页 |
| 2.方法 | 第51-52页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第51页 |
| ·RNAi靶序列的设计 | 第51页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第51页 |
| ·shRNA对靶基因表达的抑制研究 | 第51页 |
| ·shRNA对病毒复制的抑制研究 | 第51-52页 |
| 3.结果 | 第52-53页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第52页 |
| ·shRNA对靶基因抑制效果 | 第52-53页 |
| ·shRNA对病毒复制的抑制效果 | 第53页 |
| 4.讨论 | 第53-56页 |
| 第三部分 结论 | 第56-57页 |
| 第四部分 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
