| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一部分 前言 | 第12-22页 |
| 1 病原学 | 第13-17页 |
| ·生物学分类地位 | 第13页 |
| ·病毒粒子结构 | 第13页 |
| ·基因组结构 | 第13-15页 |
| ·病毒稳定性 | 第15页 |
| ·病毒的培养特性 | 第15页 |
| ·病毒的致病性 | 第15-16页 |
| ·病毒致肿瘤机制 | 第16-17页 |
| 2 ALV-J流行病学 | 第17-18页 |
| 3 ALV-J临床症状 | 第18页 |
| 4 ALV-J的鉴别和诊断 | 第18-20页 |
| ·ALV-J的分离与鉴定 | 第18-19页 |
| ·ALV-J单克隆抗体的应用 | 第19页 |
| ·ALV-J的PCR检测 | 第19-20页 |
| 5 ALV-J的防治 | 第20-21页 |
| 6 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二部分 试验研究 | 第22-56页 |
| 第一章 血管瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCDY1全基因组核酸序列分析 | 第22-43页 |
| 1 材料 | 第22-25页 |
| ·病料与细胞 | 第22页 |
| ·菌株与载体 | 第22-23页 |
| ·试验试剂 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·主要试验仪器 | 第24-25页 |
| ·引物的设计 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-31页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第25-27页 |
| ·病毒的分离 | 第25-26页 |
| ·病毒的鉴定 | 第26-27页 |
| ·SCDY1全基因组核酸序列的测定 | 第27-30页 |
| ·SCDY1全基因组核酸序列的PCR扩增 | 第27页 |
| ·SCDY1 cDNA末端序列的扩增 | 第27-28页 |
| ·胶回收 | 第28页 |
| ·各段基因的TA克隆 | 第28页 |
| ·重组质粒的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第29-30页 |
| ·SCDY1分离株全基因组的遗传变异分析 | 第30-31页 |
| 3 试验结果 | 第31-40页 |
| ·病毒分离与鉴定 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增结果 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| ·SCDY1全基因纰核酸序列测定结果 | 第32-36页 |
| ·全基因PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| ·全基因各段基因双酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·SCDY1毒株全基因组核苷酸序列的建立 | 第34-36页 |
| ·SCDY1前病毒cDNA全基因组序列与已知ALV-J毒株相应序列的同源性比较 | 第36-40页 |
| ·结构基因gag、pol和env的比较 | 第36页 |
| ·LTR区段的比较 | 第36-37页 |
| ·3’UTR分析 | 第37-38页 |
| ·U3区潜在转录因子结合位点分析 | 第38-39页 |
| ·前病毒cDNA全序列遗传进化分析 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 小结 | 第42-43页 |
| 第二章 血管瘤型J亚群禽白血病病毒SCDY1株gp85基因的原核表达 | 第43-56页 |
| 1 材料 | 第43-45页 |
| ·毒株、菌株及载体 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·试验仪器 | 第44页 |
| ·试剂配制 | 第44-45页 |
| ·基因表达相关试剂 | 第44-45页 |
| ·蛋白纯化及鉴定相关试剂 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-49页 |
| ·gp85基因的生物信息学分析 | 第45页 |
| ·引物的设计 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46页 |
| ·重组质粒的抽提与Rosetta(DE3)感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·带粘性末端的gp85基因与pET-32a(+)载体的酶切 | 第46页 |
| ·连接、转化及鉴定 | 第46页 |
| ·pET-32-gp85的表达 | 第46-48页 |
| ·重组质粒pET-32-gp85的表达 | 第46-47页 |
| ·SDS-PAGE鉴定 | 第47页 |
| ·表达条件的筛选优化 | 第47-48页 |
| ·表达产物的初步纯化 | 第48页 |
| ·Western-blot分析 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-53页 |
| ·gp85基因的生物信息学分析 | 第49-50页 |
| ·gp85蛋白表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·pET-32-gp85的表达 | 第51-52页 |
| ·表达条件的优化 | 第51-52页 |
| ·重组表达蛋白初步纯化结果 | 第52页 |
| ·表达蛋白Westem-blot分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 5 小结 | 第54页 |
| 6 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
