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热纤维梭菌β-葡聚糖酶热稳定性机制的研究

主要英文缩写词第1-9页
中文摘要第9-13页
英文摘要第13-17页
第一章 文献综述第17-52页
 第一节 嗜热酶热稳定性机制研究进展第17-35页
  1 嗜热酶的定义第17页
  2 嗜热酶的热稳定性第17-18页
  3 影响酶热稳定性的因素第18-35页
   ·蛋白质分子内有更多的作用力第19-23页
   ·更好的蛋白质构型第23-30页
   ·优化氨基酸组成第30-35页
 第二节 β-葡聚糖酶的研究进展第35-50页
  1 前言第35-36页
  2 β-葡聚糖酶的分子生物学研究第36-39页
   ·β-葡聚糖酶基因克隆第36-37页
   ·β-葡聚糖酶基因表达第37-39页
  3 β-葡聚糖酶的生化特性第39页
  4 结构与功能第39-43页
   ·酶的作用机理第39-40页
   ·催化氨基酸残基第40-41页
   ·三级结构和折叠第41-43页
  5 突变研究和蛋白质工程第43-50页
   ·蛋白质和碳水化合物的相互作用:底物特异性第43-46页
   ·杂合酶与热稳定性第46-48页
   ·循环重排第48-50页
 第三节 本研究目的和意义第50-52页
第二章 热纤维梭菌β-葡聚糖酶C-末端结构域对其热稳定性的影响第52-70页
 1 材料和方法第53-62页
   ·材料第53页
   ·培养基及主要化学试剂的配制第53-55页
   ·方法第55-62页
     ·热纤维梭菌β-葡聚糖酶成熟肽基因的表达第55-60页
     ·热纤维梭菌β-葡聚糖酶成熟肽缺失基因的表达第60页
     ·SDS-PAGE第60-62页
     ·β-葡聚糖酶活力测定第62页
     ·β-葡聚糖酶特性的分析第62页
 2 结果第62-66页
   ·β-葡聚糖酶成熟肽(LicMB)及其二个缺失酶基因的克隆第62-63页
   ·LicMB及其二个缺失酶基因的表达第63-64页
   ·LicMB及其二个缺失酶的活力第64-65页
   ·LicMB及其二个缺失酶的最适作用温度第65页
   ·LicMB及其二个缺失酶的热稳定性第65-66页
 3 讨论第66-69页
   ·酶的表达第66-67页
   ·LicMB及其二个缺失酶的活力第67-68页
   ·LicMB及其二个缺失酶的最适温度第68页
   ·LicMB及其二个缺失酶的热稳定性第68-69页
 4 小结第69-70页
第三章 LieMB-CD N-和C-末端缺失对其热稳定性的影响第70-85页
 1 材料和方法第70-73页
   ·材料第70页
   ·方法第70-73页
 2 结果第73-79页
   ·LicMB-CD N-或C-末端缺失基因的克隆第73-74页
   ·LicMB-CD N-和C-末端缺失基因的表达第74-75页
   ·LicMB-CD N-和C-末端缺失酶的活力第75页
   ·LicMB-CD N-和C-末端缺失酶的最适作用温度第75-77页
   ·LicMB-CD N-和C-末端缺失酶的热稳定性第77-79页
 3 讨论第79-83页
   ·LicMB-CD N-末端氨基酸缺失对酶特性的影响第79-81页
   ·LicMB-CD C-末端氨基酸残基缺失对酶特性的影响第81-82页
   ·酶的亲热性和耐热性第82-83页
 4 小结第83-85页
第四章 LicMB-CD N末端氨基酸突变对其热稳定性的影响第85-95页
 1 材料和方法第85-87页
   ·材料第85页
   ·方法第85-87页
 2 结果第87-91页
   ·LicMB-CD N末端突变基因的克隆第87页
   ·LicMB-CD N末端突变基因的表达第87-88页
   ·LicMB-CD N末端突变酶的活力第88-89页
   ·LicMB-CD N末端突变酶的热稳定性第89-91页
 3 讨论第91-94页
 4 小结第94-95页
第五章 LicMB-CD末端序列对芽孢杆菌β-葡聚糖酶热稳定性的影响第95-108页
 1 材料和方法第95-98页
   ·材料第95页
   ·方法第95-98页
 2 结果第98-103页
   ·杂合β-葡聚糖酶基因的克隆第98页
   ·杂合β-葡聚糖酶基因的表达第98-100页
   ·杂合β-葡聚糖酶的活力第100-101页
   ·杂合β-葡聚糖酶的最适作用温度第101-102页
   ·杂合β-葡聚糖酶的热稳定性第102-103页
 3 讨论第103-107页
   ·LicMB-CD N7C3对β-葡聚糖酶特性的影响第103-104页
   ·LicMB-CDN端氨基酸残基对β-葡聚糖酶特性的影响第104-106页
   ·LicMB-CD C-末端氨基酸残基对β-葡聚糖酶特性的影响第106-107页
 4 小结第107-108页
第六章 H-N104C8-B氨基酸突变对其热稳定性的影响第108-120页
 1 材料和方法第108-111页
   ·材料第108页
   ·方法第108-111页
 2 结果第111-115页
   ·HN104C8突变基因的克隆第111-112页
   ·HN104C8突变基因的表达第112-113页
   ·HN104C8突变酶的活力第113页
   ·HN104C8突变酶的最适温度第113-114页
   ·HN104C8突变酶的热稳定性第114-115页
 3 讨论第115-119页
   ·HN104C8第197-202位突变对β-葡聚糖酶特性的影响第115-116页
   ·H-N104C8第189-193位氨基酸突变对β-葡聚糖酶特性的影响第116-118页
   ·H-N104C8第165-172位氨基酸突变对β-葡聚糖酶特性的影响第118页
   ·T144E和Y124WGl28E突变对β-葡聚糖酶特性的影响第118-119页
 4 小结第119-120页
论文小结第120-121页
创新点第121-122页
参考文献第122-136页
附:发表论文第136-137页
致谢第137页

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