| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-31页 |
| ·苏云金芽胞杆菌 | 第8-11页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的杀虫机理和活性谱 | 第8页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫剂 | 第8-10页 |
| ·苏云金芽胞杆菌工程菌的构建 | 第10页 |
| ·遗传改良工程菌WG-001的构建及其杀虫效果 | 第10-11页 |
| ·转基因生物的安全性 | 第11-12页 |
| ·植物用转基因微生物安全性评价 | 第12-13页 |
| ·转基因微生物的安全性及其潜在危险 | 第12-13页 |
| ·植物用转基因微生物安全性评价的主要内容 | 第13页 |
| ·转基因微生物生物安全试验研究方法 | 第13-23页 |
| ·生态安全型工程菌的标记基因及载体 | 第13-17页 |
| ·安全型标记(报告)基因 | 第14-15页 |
| ·安全型载体 | 第15-17页 |
| ·工程菌及重组DNA在环境中的监测方法 | 第17-18页 |
| ·生物安全试验田间试验设计及取样 | 第18-21页 |
| ·田间试验设计类型 | 第19-20页 |
| ·田间取样方法及取样数量 | 第20-21页 |
| ·微生物群落结构分析方法 | 第21-23页 |
| ·微生物纯培养法 | 第21页 |
| ·脂肪酸甲酯法 | 第21-22页 |
| ·BIOLOG代谢图谱法 | 第22页 |
| ·DGGE法 | 第22页 |
| ·其他方法 | 第22-23页 |
| ·工程菌标记基因水平转移研究 | 第23页 |
| ·转基因微生物生物安全性试验研究进展 | 第23-31页 |
| ·转基因微生物安全性试验微生态系统标准的探索 | 第23-25页 |
| ·转基因微生物生物在环境中的传播扩散研究进展 | 第25-26页 |
| ·转基因微生物在环境中的存活、定殖研究进展 | 第26页 |
| ·转基因微生物对土著微生物群落和土壤生态系统的影响研究进展 | 第26-28页 |
| ·转基因微生物基因水平转移研究进展 | 第28-31页 |
| 2 研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 3 材料和方法 | 第32-38页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·动物 | 第32页 |
| ·试验田示意图 | 第32-33页 |
| ·田间平板排列示意图 | 第33-34页 |
| ·田间采样布点示意图 | 第34页 |
| ·工程菌WG-001的田间喷洒 | 第34-35页 |
| ·取样 | 第35页 |
| ·取样时间 | 第35页 |
| ·叶样采集 | 第35页 |
| ·土样采集 | 第35页 |
| ·样品处理 | 第35-36页 |
| ·叶样处理 | 第35-36页 |
| ·土样处理 | 第36页 |
| ·培养基和试剂 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·真菌总DNA抽提 | 第36-37页 |
| ·棉花叶子总DNA抽提 | 第37页 |
| ·土壤总DNA抽提 | 第37页 |
| ·红细胞计数方法 | 第37页 |
| ·锦鲤解剖观察 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-47页 |
| ·工程菌WG-001传播扩散距离测定试验 | 第38-39页 |
| ·工程菌WG-001水平传播距离测定试验 | 第38-39页 |
| ·平板检测 | 第38页 |
| ·试验区周围叶样及土样中工程菌WG-001的检测 | 第38-39页 |
| ·工程菌WG-001在土壤中的垂直传播距离测定试验 | 第39页 |
| ·工程菌WG-001在植表和土壤中的定殖试验 | 第39-41页 |
| ·工程菌WG-001在植表的定殖 | 第39页 |
| ·工程菌WG-001在土壤中的定殖 | 第39-40页 |
| ·工程菌171/304-gfp在盆栽土壤中的定殖 | 第40-41页 |
| ·工程菌WG-001对土著微生物的影响 | 第41-42页 |
| ·工程菌WG-001对土著细菌的影响 | 第41-42页 |
| ·工程菌WG-001对土著真菌的影响 | 第42页 |
| ·工程菌WG-001携带的杀虫蛋白基因在环境中的水平转移 | 第42页 |
| ·工程菌WG-001对锦鲤的急性毒性 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43页 |
| ·工程菌WG-001对哺乳动物的急性毒性 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44页 |
| ·土壤中工程菌WG-001携带的cry1Aa基因的定性定量分析 | 第44-47页 |
| ·DNA Gel Extraction Kit(上海生工)纯化 | 第44-45页 |
| ·DNA Gel Extraction Kit(Vitagene公司)纯化 | 第45-46页 |
| ·Geneclean Turbo(Bio101,Inc.)纯化 | 第46-47页 |
| 5 讨论和结论 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
