摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 食源性致病菌的研究进展 | 第12-20页 |
·病原的基本特征 | 第12-15页 |
·产气荚膜梭菌 | 第12-13页 |
·鼠疫耶尔森菌 | 第13-14页 |
·小肠结肠炎耶尔森菌 | 第14-15页 |
·单增李斯特菌 | 第15页 |
·流行的历史和危害 | 第15-20页 |
·产气荚膜梭菌 | 第15-16页 |
·鼠疫耶尔森氏菌 | 第16页 |
·小肠结肠炎耶尔森菌 | 第16-18页 |
·单增李斯特菌 | 第18-20页 |
第二章 病原微生物检测方法的研究进展 | 第20-34页 |
·常规生物学试验 | 第20-21页 |
·传统分离培养法 | 第20-21页 |
·平板计数法和最大可能数法 | 第21页 |
·血清学检测技术 | 第21-22页 |
·补体结合试验 | 第21页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第21-22页 |
·间接血凝试验 | 第22页 |
·中和试验 | 第22页 |
·分子生物学检测方法 | 第22-27页 |
·聚合酶链式反应 | 第22-23页 |
·多重PCR | 第23-24页 |
·实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
·巢式PCR | 第25页 |
·其它PCR 衍生技术 | 第25页 |
·核酸探针检测技术 | 第25页 |
·核苷酸序列分析 | 第25-26页 |
·指纹图谱分析技术 | 第26页 |
·生物芯片技术 | 第26-27页 |
·XMAP 液态芯片技术 | 第27-32页 |
·xMAP 液态芯片基本原理 | 第28-29页 |
·xMAP 液态芯片的技术优势 | 第29页 |
·液态芯片技术的应用 | 第29-31页 |
·xMAP 液态芯片技术存在的问题 | 第31-32页 |
·前景和展望 | 第32页 |
·本研究的主要内容及目的意义 | 第32-34页 |
第三章 4 种病原菌特异性基因质粒DNA 的构建 | 第34-54页 |
·材料 | 第34-36页 |
·菌种和载体 | 第34页 |
·主要试剂和耗材 | 第34页 |
·主要仪器与设备 | 第34-35页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-48页 |
·引物的设计与合成 | 第36-38页 |
·重叠PCR 扩增 | 第38-42页 |
·PCR 扩增产物的鉴定 | 第42页 |
·重叠 PCR 产物的纯化回收 | 第42-43页 |
·目的片段与载体的连接 | 第43-45页 |
·感受态细胞的制备 | 第45页 |
·连接产物的转化 | 第45-46页 |
·菌落PCR 鉴定 | 第46页 |
·阳性克隆的菌种保存 | 第46页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第46-47页 |
·重组质粒的PCR 鉴定 | 第47-48页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第48页 |
·重组质粒的序列测定 | 第48页 |
·结果 | 第48-52页 |
·重叠PCR 扩增结果 | 第48-49页 |
·菌落PCR 鉴定结果 | 第49-51页 |
·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第51页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第51-52页 |
·重组质粒的序列分析 | 第52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第四章 4 种病原菌特异性基因质粒DNA 及基因组DNA 的XMAP 液态芯片检测 | 第54-72页 |
·材料 | 第54-58页 |
·菌株 | 第54页 |
·主要仪器设备 | 第54-55页 |
·主要耗材 | 第55页 |
·工具酶及主要试剂 | 第55页 |
·主要溶液和培养基的配制 | 第55-58页 |
·方法 | 第58-63页 |
·引物的设计与合成 | 第58-59页 |
·DNA 模板的制备 | 第59页 |
·单重PCR 扩增 | 第59-60页 |
·多重PCR 扩增 | 第60页 |
·探针与微球的耦联 | 第60-61页 |
·探针交联效率的验证 | 第61页 |
·杂交并检测 | 第61-62页 |
·特异性试验 | 第62页 |
·敏感性试验 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-70页 |
·对质粒DNA 的单重和多重PCR 扩增 | 第63-64页 |
·对4 种病原菌基因组DNA 的单重和多重PCR 扩增 | 第64-65页 |
·xMAP 液态芯片对重组质粒DNA 的单重和多重检测结果 | 第65-66页 |
·xMAP 液态芯片对4 种病原菌基因组DNA 的单重和多重检测结果 | 第66-67页 |
·特异性试验 | 第67-69页 |
·敏感性试验 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
缩略词表 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
作者简介 | 第82页 |