| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·国内外研究进展 | 第10-19页 |
| ·β-甘露聚糖酶来源 | 第10-11页 |
| ·不同来源β-甘露聚糖酶主要性质比较 | 第11-13页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分子生物学研究进展 | 第13-16页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分离纯化研究 | 第16-18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的作用方式及水解产物 | 第18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分类、鉴定及酶活测定 | 第18-19页 |
| ·研究意义 | 第19-20页 |
| ·研究目标与内容 | 第20-21页 |
| ·研究目标 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21页 |
| ·创新点 | 第21-22页 |
| 2 β-甘露聚糖酶产生菌的分离及鉴定 | 第22-33页 |
| ·材料与仪器 | 第22-24页 |
| ·样品来源 | 第22页 |
| ·主要培养基 | 第22页 |
| ·主要试剂及药品 | 第22-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·富集培养 | 第24-25页 |
| ·菌株的分离纯化与保藏 | 第25页 |
| ·菌株的初筛 | 第25页 |
| ·菌株的复筛 | 第25页 |
| ·培养方法和粗酶液的制备 | 第25页 |
| ·甘露聚糖酶活力测定 | 第25-26页 |
| ·细菌基因组DNA 的制备（CTAB 法） | 第26页 |
| ·PCR 扩增产物克隆、转化和鉴定 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·产酶菌株的筛选 | 第28页 |
| ·酶活力标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·产酶菌株的鉴定 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 3 假单胞菌、枯草芽孢杆菌产 β-甘露聚糖酶最适条件的研究 | 第33-44页 |
| ·材料与仪器 | 第33页 |
| ·实验菌株 | 第33页 |
| ·主要培养基 | 第33页 |
| ·主要试剂及药品 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·保存菌株的活化 | 第33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第33页 |
| ·产酶条件的优化 | 第33-34页 |
| ·产酶的时间过程 | 第34页 |
| ·粗酶的性质 | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-42页 |
| ·假单胞菌产酶条件的优化 | 第34-36页 |
| ·假单胞菌产酶的时间过程 | 第36页 |
| ·假单胞菌粗酶的性质 | 第36-38页 |
| ·枯草芽孢杆菌产酶条件的优化 | 第38-40页 |
| ·枯草芽孢杆菌产酶的时间过程 | 第40-41页 |
| ·枯草芽孢杆菌粗酶的性质 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 4 枯草芽孢杆菌 β-甘露聚糖酶基因的克隆及原核表达 | 第44-55页 |
| ·材料与仪器 | 第44-45页 |
| ·菌种和质粒 | 第44页 |
| ·主要培养基 | 第44页 |
| ·主要试剂及药品 | 第44页 |
| ·主要酶类 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·DNA 的提取 | 第45页 |
| ·引物的设计 | 第45页 |
| ·甘露聚糖酶基因man 的PCR 扩增、克隆、鉴定及测序 | 第45页 |
| ·man 片段与原核表达载体pET-32a 的连接 | 第45-47页 |
| ·重组质粒pET-32a-man 转化BL21(DE3) | 第47页 |
| ·重组质粒的鉴定及测序 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·实验结果 | 第49-53页 |
| ·甘露聚糖酶基因man 的PCR 扩增、克隆鉴定及测序 | 第49-51页 |
| ·man 片段与原核表达载体pET-32a 分步酶切 | 第51页 |
| ·重组质粒pET-32a-man 的鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组菌IPTG 诱导表达及蛋白检测 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白生物活性检测及可溶性分析 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 5 主要结论与后续工作展望 | 第55-57页 |
| ·主要结论 | 第55页 |
| ·后续工作展望 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| A 假单胞菌(Pseudomonas sp.)16S rDNA 测序结果 | 第65-66页 |
| B 枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis) 16S rDNA 测序结果 | 第66-67页 |
| C 枯草芽孢杆菌 β-甘露聚糖酶基因测序结果 | 第67-68页 |
| D 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |
