摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-43页 |
1.1 免疫系统与被动免疫 | 第13-15页 |
1.1.1 IgG与被动免疫 | 第13-14页 |
1.1.2 动物获取母源IgG的方式 | 第14-15页 |
1.2 FcRn是参与被动免疫的重要分子 | 第15-25页 |
1.2.1 免疫球蛋白被动传递假说的提出 | 第15-16页 |
1.2.2 FcRn是负责IgG被动转运的关键受体 | 第16-17页 |
1.2.3 FcRn与IgG的跨细胞转运 | 第17-19页 |
1.2.4 FcRn与IgG血清半衰期的维持 | 第19-20页 |
1.2.5 FcRn在其他组织器官中的作用 | 第20-21页 |
1.2.6 FcRn与免疫监视 | 第21-24页 |
1.2.7 FcRn与血清白蛋白 | 第24页 |
1.2.8 FcRn与临床疾病治疗 | 第24-25页 |
1.3 IgG从母体血清到乳汁的运输 | 第25-31页 |
1.3.1 乳腺的结构与泌乳生物学 | 第25-26页 |
1.3.2 乳汁中IgG的分泌是受体介导的主动运输 | 第26-28页 |
1.3.3 FcRn与乳腺IgG转运 | 第28-30页 |
1.3.4 其他IgG Fc受体 | 第30-31页 |
1.4 FcRn跨细胞转运IgG的研究 | 第31-38页 |
1.4.1 研究FcRn转运IgG的模型 | 第31-32页 |
1.4.2 研究FcRn转运IgG的模式细胞 | 第32-33页 |
1.4.3 FcRn跨细胞转运IgG的细胞生物学模型 | 第33-35页 |
1.4.4 影响FcRn跨细胞转运IgG的因素 | 第35-38页 |
1.5 不同动物FcRn胞质尾区差异与IgG被动转运方式的联系 | 第38-41页 |
1.5.1 不同动物FcRn胞质尾区特征 | 第38-40页 |
1.5.2 FcRn胞质尾区长度与IgG被动转运方式 | 第40-41页 |
1.6 研究目的和意义 | 第41-43页 |
第二章 材料与方法 | 第43-68页 |
2.1 技术路线 | 第43-44页 |
2.2 实验材料 | 第44-47页 |
2.2.1 菌株、载体及细胞 | 第44页 |
2.2.2 实验动物 | 第44页 |
2.2.3 常用实验试剂 | 第44-45页 |
2.2.4 实验用试剂盒 | 第45页 |
2.2.5 常用试剂配制方法 | 第45-47页 |
2.3 实验仪器设备 | 第47-48页 |
2.4 实验方法 | 第48-67页 |
2.4.1 DNA的提取 | 第48-50页 |
2.4.2 RNA的提取 | 第50页 |
2.4.3 PCR反应体系及反应条件 | 第50-52页 |
2.4.4 反转录 | 第52页 |
2.4.5 定量PCR | 第52-53页 |
2.4.6 3'RACE | 第53页 |
2.4.7 感受态细胞制备与效价测定(CaCl_2法) | 第53-54页 |
2.4.8 克隆转化 | 第54-55页 |
2.4.9 Western blotting | 第55-56页 |
2.4.10 MDCK细胞培养及单克隆挑取 | 第56-58页 |
2.4.11 Transwell体外细胞跨细胞转运实验 | 第58-59页 |
2.4.12 细胞免疫荧光染色 | 第59-60页 |
2.4.13 免疫组化 | 第60-61页 |
2.4.14 流式细胞术 | 第61-62页 |
2.4.15 免疫沉淀 | 第62页 |
2.4.16 定点遗传修饰小鼠制备 | 第62-65页 |
2.4.17 免疫小鼠 | 第65-66页 |
2.4.18 小鼠乳汁采集 | 第66页 |
2.4.19 小鼠尾静脉注射 | 第66页 |
2.4.20 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第66-67页 |
2.5 生物信息分析软件及常用网站 | 第67-68页 |
第三章 结果与分析 | 第68-121页 |
3.1 体外实验对FcRn跨细胞转运IgG功能的研究 | 第68-92页 |
3.1.1 全长型及截短型FcRn过表达载体的构建 | 第68-72页 |
3.1.2 MDCK细胞的培养与Zeocin筛选浓度的确定 | 第72-73页 |
3.1.3 MDCK细胞的转染与单克隆挑取 | 第73-76页 |
3.1.4 单克隆细胞系表达和功能验证 | 第76-83页 |
3.1.5 Transwell上生长细胞的特征评价 | 第83-86页 |
3.1.6 Transwell体外跨细胞转运实验 | 第86-91页 |
3.1.7 小结 | 第91-92页 |
3.2 FcRn胞质尾区截短型小鼠的制备与表达验证 | 第92-105页 |
3.2.1 FcRn-Tr小鼠的制备与扩繁 | 第92-100页 |
3.2.2 FcRn-Tr小鼠FcRn基因表达情况分析 | 第100-104页 |
3.2.3 小结 | 第104-105页 |
3.3 FcRn胞质尾区截短型小鼠IgG被动传递相关功能的研究 | 第105-121页 |
3.3.1 FcRn-Tr小鼠IgG血清半衰期维持的研究 | 第105-110页 |
3.3.2 FcRn-Tr小鼠跨胎盘转运IgG功能的研究 | 第110-111页 |
3.3.3 FcRn-Tr小鼠跨小肠转运IgG功能的研究 | 第111-112页 |
3.3.4 FcRn-Tr小鼠总体被动免疫能力的评估 | 第112-113页 |
3.3.5 FcRn-Tr小鼠跨乳腺转运IgG功能的研究 | 第113-120页 |
3.3.6 小结 | 第120-121页 |
第四章 讨论与展望 | 第121-125页 |
第五章 结论 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-133页 |
致谢 | 第133-134页 |
附录 | 第134-139页 |
个人简历 | 第139页 |