| 摘要 | 第1-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 1 前言 | 第18-30页 |
| ·植物 MAPK Cascades 的组成 | 第18-22页 |
| ·植物中的MAPKKK | 第18-19页 |
| ·植物中的MAPKK | 第19-20页 |
| ·植物中的MAPK | 第20-22页 |
| ·植物MAPK 的结构、分类及功能 | 第20-21页 |
| ·植物中的C 组MAPK | 第21-22页 |
| ·MAPK Cascades 介导的信号转导途径 | 第22-28页 |
| ·非生物胁迫及生物胁迫信号转导途径汇集于MAPK Cascades | 第22-24页 |
| ·MAPK Cascades 与植物激素信号转导 | 第24-28页 |
| ·MAPKCascades 参与调控乙烯信号转导过程 | 第24-25页 |
| ·MAPK Cascades 参与调控生长素信号转导过程 | 第25页 |
| ·MAPK Cascades 参与调控ABA 信号转导过程 | 第25-28页 |
| ·MAPK Cascades 参与调控保卫细胞ABA 的信号转导 | 第26-27页 |
| ·MAPK Cascades 参与抑制种子萌发及萌发后生长的ABA 信号转导 | 第27-28页 |
| ·MAPK Cascades 参与调控H_2O_2介导的ABA 信号转导 | 第28页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-53页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·酶及生化试剂 | 第30页 |
| ·PCR 引物 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·材料处理 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-53页 |
| ·植物材料总RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·去除RNA 样品中的基因组污染 | 第34页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第34页 |
| ·PCR 扩增 | 第34-35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第36页 |
| ·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·DNA 序列测定 | 第37页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第37-40页 |
| ·总RNA 的提取 | 第37页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第37-38页 |
| ·转膜 | 第38页 |
| ·预杂交 | 第38-39页 |
| ·探针的制备 | 第39-40页 |
| ·半定量RT-PCR | 第40页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第40页 |
| ·基因组DNA 提取（SDS 法） | 第40-41页 |
| ·原核表达玉米ZmMPK7 蛋白 | 第41-45页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·大肠杆菌BL21 原核表达的诱导 | 第43页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第43-44页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·原核表达玉米ZmMPK7 重组蛋白抗体制备 | 第45页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第45-46页 |
| ·蛋白质提取及含量测定 | 第45页 |
| ·转膜 | 第45-46页 |
| ·ZmMPK7 的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| ·转烟草正义表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第48页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第48页 |
| ·冻融法农杆菌转化 | 第48页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第48-49页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第49页 |
| ·基因组水平鉴定 | 第49页 |
| ·转录水平鉴定 | 第49页 |
| ·蛋白水平鉴定 | 第49页 |
| ·组织化学水平检测 H_2O_2积累 | 第49页 |
| ·植物抗氧化酶活力及丙二醛含量的测定 | 第49-51页 |
| ·植物同功酶电泳分析 | 第51页 |
| ·植物抗坏血酸含量的测定 | 第51页 |
| ·叶片气体交换参数的测定 | 第51-52页 |
| ·荧光参数的测定 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-83页 |
| ·GenBank 中玉米 MAPK 基因信息的收集及整理 | 第53-56页 |
| ·GenBank 中玉米 MAPK 基因信息的收集 | 第53-55页 |
| ·玉米MAPK 基因的系统发生关系 | 第55-56页 |
| ·玉米 C 组 MAPK 基因 ZmMPK7 的分离 | 第56-57页 |
| ·玉米MAPK 基因ZmMPK7 的序列分析 | 第57-60页 |
| ·ZmMPK7 表达特性分析 | 第60-63页 |
| ·ZmMPK7 对不同胁迫及信号物质的响应模式 | 第60-62页 |
| ·ABA、H_2O_2对ZmMPK7 的诱导存在交叉 | 第62-63页 |
| ·正常条件下培养的玉米幼苗材料未检测到ZmMPK7 基因的节律性表达 | 第63页 |
| ·ZmMPK7 在大肠杆菌中的表达及抗体的制备 | 第63-65页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第63页 |
| ·重组蛋白的表达及诱导条件的优化 | 第63-64页 |
| ·pET30a-ZmMPK7 重组蛋白的亲和纯化及抗体的制备 | 第64-65页 |
| ·ZmMPK7 的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| ·植物表达载体 pBI221-ZmMPK7-EGFP 的构建 | 第65-66页 |
| ·ZmMPK7 定位于细胞核中 | 第66-67页 |
| ·过表达ZmMPK7 的转基因烟草的生理分析 | 第67-77页 |
| ·转基因烟草表达载体 pBI121-ZmMPK7 的构建 | 第67-68页 |
| ·转基因烟草的筛选鉴定 | 第68-69页 |
| ·渗透胁迫条件下过表达ZmMPK7 转基因烟草的活性氧水平明显降低 | 第69-71页 |
| ·过表达ZmMPK7 改善了转基因烟草的酶促抗氧化系统 | 第71-75页 |
| ·过表达 ZmMPK7 转基因烟草在渗透胁迫下光合能力得到改善 | 第75-77页 |
| ·玉米 ZmMPK7 上游互作组分的研究 | 第77-83页 |
| ·关于ZmMPK7 上游互作组分的文献分析 | 第77-78页 |
| ·玉米ZmMKK3 基因的分离 | 第78-81页 |
| ·ZmMKK3 的序列分析及系统发生关系 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-88页 |
| ·玉米中的MAPKs | 第83-84页 |
| ·玉米C 组MAPK 基因ZmMPK7 参与ABA、H_2O_2的信号转导 | 第84-85页 |
| ·过表达ZmMPK7 的转基因烟草在渗透胁迫下抗氧化能力提高 | 第85-87页 |
| ·ZmMPK7 的亚细胞定位 | 第87-88页 |
| 5 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-108页 |
| 附录 | 第108-110页 |
| 附：论文发表情况 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
