| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| ·流感病毒的生物学 | 第13页 |
| ·HA 基因的功能 | 第13-15页 |
| ·HA 的吸附功能 | 第14页 |
| ·HA 与致病性的关系 | 第14-15页 |
| ·历史上的人类大流感及其共同特点 | 第15页 |
| ·人类历史上流感大流行 | 第15页 |
| ·人类大流感均与禽流感有关 | 第15页 |
| ·H5N1 引起下次流感大流行的潜在可能性 | 第15-16页 |
| ·禽流感疫苗的研究现状 | 第16-17页 |
| ·人禽流感疫苗的研究现状 | 第17-18页 |
| ·DNA 疫苗及其潜在优点 | 第18页 |
| ·提高 DNA 疫苗免疫效率的方法 | 第18-20页 |
| ·佐剂的使用 | 第18-19页 |
| ·DNA 疫苗的优化 | 第19页 |
| ·免疫方法及途径 | 第19-20页 |
| ·近期 DNA 疫苗研究进展 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 两个H5 亚型抗原群HA 基因DNA 疫苗的构建与体外表达 | 第22-33页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·病毒株 | 第22页 |
| ·菌种与细胞 | 第22页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·酶及相关试剂 | 第23页 |
| ·培养液 | 第23-24页 |
| ·H5 亚型阳性血清 | 第24页 |
| ·二抗 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·表达 AH/06 密码子优化 HA 基因的 DNA 疫苗 pCAGGoAHHA 和 pVAXoAHHA 的构建 | 第24-25页 |
| ·表达 SX/06 HA 基因的 DNA 疫苗质粒pCAGGSXHA 的构建 | 第25-26页 |
| ·DNA 疫苗pCAGGoAHHA、pCAGGSXHA 和pVAXoAHHA 的体外表达 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·DNA 疫苗pCAGGoAHHA，pCAGGSXHA 和pVAXoAHHA 的PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·DNA 疫苗pCAGGoAHHA、pCAGGSXHA 和pVAXoAHHA 的酶切鉴定 | 第27-30页 |
| ·3 种质粒转染293T 细胞的间接免疫荧光结果 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 DNA 疫苗pCAGGoAHHA 在 SPF 鸡的免疫评估 | 第33-49页 |
| ·材料和方法 | 第33-35页 |
| ·病毒 | 第33页 |
| ·质粒 | 第33页 |
| ·SPF 鸡及SPF 鸡胚 | 第33页 |
| ·H5 亚型阳性血清 | 第33页 |
| ·病毒的鸡胚半数致死量测定（EID_(50)） | 第33页 |
| ·病毒的 TCID_(50) 测定 | 第33-34页 |
| ·DNA 疫苗质粒的大量提取及纯化 | 第34页 |
| ·SPF 鸡的免疫方法 | 第34页 |
| ·HI 抗体测定 | 第34-35页 |
| ·中和抗体的测定 | 第35页 |
| ·病毒攻击及其分离 | 第35页 |
| ·0.75%红细胞悬液的制备 | 第35页 |
| ·DNA 疫苗pCAGGoAHHA 对SPF 鸡的免疫评估 | 第35-36页 |
| ·pCAGGoAHHA 的免疫效力试验 | 第35页 |
| ·pCAGGoAHHA 最小免疫剂量的测定 | 第35-36页 |
| ·pCAGGoAHHA 免疫HI 抗体持续期的测定 | 第36页 |
| ·pCAGGoAHHA 对异源病毒攻击的免疫保护 | 第36页 |
| ·试验结果 | 第36-46页 |
| ·鸡胚半数致死量测定（EID_(50)） | 第36页 |
| ·TCID_(50) 测定结果 | 第36-37页 |
| ·pCAGGoAHHA 免疫效力试验 | 第37-39页 |
| ·pCAGGoAHHA 最小免疫剂量的测定 | 第39-44页 |
| ·pCAGGoAHHA 免疫HI 抗体持续期的测定 | 第44页 |
| ·pCAGGoAHHA 对异源病毒攻击的免疫保护 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 DNA 疫苗pCAGGSXHA 在 SPF 鸡的免疫效力评价 | 第49-53页 |
| ·材料与方法 | 第49页 |
| ·病毒 | 第49页 |
| ·SPF 鸡及SPF 鸡胚 | 第49页 |
| ·DNA 疫苗的大量提取及纯化 | 第49页 |
| ·pCAGGSXHA 对SPF 鸡的免疫效力 | 第49页 |
| ·pCAGGSXHA 免疫后 HI 抗体持续期的测定 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-51页 |
| ·pCAGGSXHA 免疫效力试验 | 第49-51页 |
| ·pCAGGSXHA HI 抗体持续期的测定 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 DNA 疫苗pVAXoAHHA 在 BALB/c 小鼠的免疫效力 | 第53-67页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·DNA 疫苗质粒 | 第53页 |
| ·病毒 | 第53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·BALB/c 小鼠的免疫试验 | 第53-54页 |
| ·RDE 处理血清和HI 抗体测定 | 第54页 |
| ·中和抗体测定试验 | 第54页 |
| ·鸡胚半数致死量测定（EID_(50)） | 第54-55页 |
| ·小鼠半数致死量测定（MLD50） | 第55页 |
| ·攻毒保护试验 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-65页 |
| ·DNA 疫苗质粒电泳图 | 第55页 |
| ·3 株病毒的TCID_(50) 测定结果 | 第55-56页 |
| ·鸡胚半数致死量测定（EID_(50)） | 第56页 |
| ·3 株病毒的 MLD50 的测定结果 | 第56-57页 |
| ·单剂量免疫后 HI 抗体的测定结果 | 第57页 |
| ·单剂量免疫后中和抗体的测定结果 | 第57页 |
| ·小鼠单剂量免疫后用同源病毒攻击后的体重变化和死亡结果 | 第57-58页 |
| ·小鼠单剂量免疫后用同源病毒攻击后的脏器滴定结果 | 第58-59页 |
| ·加强免疫后 HI 抗体的测定结果 | 第59-60页 |
| ·加强免疫后中和抗体的测定结果 | 第60-61页 |
| ·加强免疫后用同源病毒攻击后的体重变化和死亡结果 | 第61页 |
| ·小鼠加强免疫组用同源病毒攻击后的脏器滴定结果 | 第61-62页 |
| ·加强免疫后用异源病毒攻击后的体重变化和死亡结果 | 第62-63页 |
| ·加强免疫组用异源病毒攻击后的死亡结果和脏器滴定结果 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简历 | 第75页 |
