| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| ·牛副流感病毒3 型的形态与特征 | 第13-14页 |
| ·BPIV3 基因组和编码蛋白概述 | 第14-17页 |
| ·BPIV3 的流行病学 | 第17页 |
| ·BPIV3 的临床症状及病理变化 | 第17页 |
| ·BPIV3 的诊断 | 第17-18页 |
| ·病毒分离 | 第17-18页 |
| ·血凝抑制试验 | 第18页 |
| ·中和试验 | 第18页 |
| ·免疫荧光试验 | 第18页 |
| ·RT-PCR 检测方法 | 第18页 |
| ·BPIV3 的预防及控制 | 第18-21页 |
| ·病毒载体疫苗 | 第19页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第19-20页 |
| ·DNA 疫苗 | 第20页 |
| ·纳米颗粒疫苗 | 第20-21页 |
| ·BPIV3 作为病毒载体的研究 | 第21-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 牛副流感病毒3 型山东分离株NP 基因的表达与鉴定 | 第23-32页 |
| ·材料和方法 | 第23-26页 |
| ·病毒、菌种和质粒、细胞、血清 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·引物设计与合成 | 第23-24页 |
| ·MDBK 细胞的培养与病毒基因组RNA 的提取 | 第24页 |
| ·NP 基因的RT-PCR 以及表达载体的构建与鉴定 | 第24页 |
| ·NP 基因的表达 | 第24-25页 |
| ·NP 蛋白表达形式的鉴定 | 第25页 |
| ·表达产物的纯化与复性 | 第25页 |
| ·表达产物的Western blotting 检测 | 第25页 |
| ·表达产物的间接ELISA 检测 | 第25页 |
| ·表达产物对两种其它牛病毒性疾病阳性抗体血清的交叉反应 | 第25页 |
| ·现地牛血清的重组NP 蛋白间接ELISA 检测与瑞典检测试剂盒的比较 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-30页 |
| ·NP 基因的扩增 | 第26页 |
| ·NP 基因表达载体的酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR 扩增产物的序列测定 | 第27页 |
| ·NP 基因的序列分析 | 第27页 |
| ·表达蛋白在细菌中的存在形式 | 第27-28页 |
| ·表达蛋白的纯化与复性 | 第28-29页 |
| ·Western blotting 分析 | 第29页 |
| ·表达产物与空载体对标准血清间接ELISA 检测 | 第29页 |
| ·交叉反应试验 | 第29-30页 |
| ·表达产物检测牛血清并与瑞典检测试剂盒比较 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 牛副流感病毒3 型重组NP 蛋白多克隆抗体的制备及初步应用 | 第32-41页 |
| ·材料和方法 | 第32-34页 |
| ·病毒、细胞、BPIV3 重组NP 蛋白与实验动物 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·免疫程序 | 第32-33页 |
| ·血清的采集 | 第33页 |
| ·BPIV3 的 TCID50 的测定 | 第33页 |
| ·间接ELISA 检测多克隆抗体的效价 | 第33页 |
| ·间接ELISA 检测不同时期多克隆抗体的效价 | 第33页 |
| ·间接ELISA 检测多克隆抗体的特异性 | 第33页 |
| ·多克隆抗体的Western blotting 分析 | 第33-34页 |
| ·中和试验检测多克隆抗体的效价和活性 | 第34页 |
| ·间接免疫荧光试验检测制备的多克隆抗体 | 第34页 |
| ·重组NP 蛋白多克隆抗体对小鼠分离毒的鉴定试验 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-39页 |
| ·BPIV3 的 TCID50 的测定 | 第34-35页 |
| ·间接ELISA 检测多克隆抗体效价 | 第35-36页 |
| ·间接ELISA 多克隆抗体效价变化 | 第36-37页 |
| ·多克隆抗体特异性的检测 | 第37页 |
| ·Western blotting 检测多克隆抗体 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA）检测制备的多克隆抗体 | 第38-39页 |
| ·BPIV3 重组 NP 蛋白多抗对实验感染小鼠分离毒的鉴定结果 | 第39页 |
| ·多克隆抗体中和试验检测结果 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53页 |
