| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩词表 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-31页 |
| 1 发菜研究进展 | 第13-16页 |
| ·资源分布 | 第13页 |
| ·发菜的生态特征 | 第13-14页 |
| ·形态特点 | 第13-14页 |
| ·发菜生长的土壤特点 | 第14页 |
| ·气候特点(温度、湿度、降雨量、光照等) | 第14页 |
| ·发菜的人工培养 | 第14-15页 |
| ·天然产物分离纯化的研究 | 第15页 |
| ·资源开发和保护 | 第15-16页 |
| ·资源开发 | 第15-16页 |
| ·食用 | 第15-16页 |
| ·药用 | 第16页 |
| ·保护 | 第16页 |
| 2 藻蓝蛋白研究进展 | 第16-22页 |
| ·藻胆蛋白的组成和结构 | 第17-18页 |
| ·藻蓝蛋白的提取和纯化 | 第18-21页 |
| ·细胞破碎 | 第19页 |
| ·蛋白质沉淀 | 第19-20页 |
| ·蛋白质纯化 | 第20-21页 |
| ·天然产物分离纯化的研究 | 第21页 |
| ·藻蓝蛋白的应用及开发 | 第21-22页 |
| 3 本论文的研究意义及实验方案 | 第22-24页 |
| ·研究意义 | 第22-23页 |
| ·试验方案 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-31页 |
| 第二章 基于蛋白质组学技术的发菜藻蓝蛋白分离、鉴定与分析 | 第31-39页 |
| 1 材料和方法 | 第31-34页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·试剂与仪器 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·溶液配制 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·发菜蛋白质的提取 | 第32页 |
| ·发菜蛋白干粉处理 | 第32页 |
| ·蛋白含量测定 | 第32-33页 |
| ·双向电泳 | 第33-34页 |
| ·第一向固相化pH 梯度等电聚焦电泳 | 第33页 |
| ·胶条平衡 | 第33页 |
| ·第二向SDS-PAGE 垂直板电泳 | 第33页 |
| ·凝胶染色 | 第33页 |
| ·凝胶扫描 | 第33页 |
| ·蛋白质鉴定 | 第33-34页 |
| ·MALDI-TOF-TOF/MS 质谱分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·双向电泳图 | 第34页 |
| ·质谱分析 | 第34-36页 |
| ·蛋白搜索鉴定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| ·双向电泳技术 | 第37-38页 |
| ·质谱鉴定 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
| 第三章 发菜藻蓝蛋白基因的克隆 | 第39-50页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·材料与试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·发菜基因组DNA 提取 | 第40页 |
| ·基因组DNA 纯度、浓度和完整性检测 | 第40-41页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·藻蓝蛋白基因的PCR 扩增 | 第41页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第41-43页 |
| ·目的基因与载体连接 | 第43页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·转化感受态细胞 | 第43-44页 |
| ·目的片段测序 | 第44页 |
| ·序列确定 | 第44页 |
| ·氨基酸模式分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-47页 |
| ·发菜基因组DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·发菜藻蓝蛋白基因的 PCR 扩增 | 第45页 |
| ·目的片段的克隆 | 第45-46页 |
| ·序列测定及藻蓝蛋白基因的确定 | 第46页 |
| ·氨基酸模式分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| ·引物设计 | 第47-48页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第48页 |
| ·基因克隆 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第四章 发菜藻蓝蛋白α亚基的原核表达和生物信息学分析 | 第50-72页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| ·菌种与质粒 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要试剂配制 | 第50-52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·藻蓝蛋白α亚基基因的扩增 | 第52-53页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第53页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第53页 |
| ·重组表达载体的构建及转化 | 第53页 |
| ·PCR 验证 | 第53页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第53-55页 |
| ·质粒DNA 的双酶切鉴定 | 第55页 |
| ·序列测定 | 第55页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)感受态制备 | 第55页 |
| ·Cpcα的诱导表达 | 第55-56页 |
| ·生物信息学分析 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-67页 |
| ·表达载体构建 | 第56页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第56-58页 |
| ·生物信息学分析 | 第58-67页 |
| ·核酸序列分析 | 第58-59页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第59-61页 |
| ·Cpcα的疏水性分析 | 第61-62页 |
| ·发菜藻蓝蛋白α亚基二级结构预测 | 第62-65页 |
| ·藻蓝蛋白α亚基三维结构预测 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| ·表达系统 | 第67-68页 |
| ·蛋白结构预测 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第五章 发菜藻蓝蛋白β亚基的原核表达与生物信息学分析 | 第72-88页 |
| 1 材料与方法 | 第72-73页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·主要配制试剂(第四章) | 第72页 |
| ·实验方案 | 第72-73页 |
| ·引物设计 | 第72页 |
| ·藻蓝蛋白β亚基基因的扩增 | 第72-73页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第73页 |
| ·重组表达载体的构建及转化 | 第73页 |
| ·PCR 验证 | 第73页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第73页 |
| ·质粒DNA 的双酶切鉴定 | 第73页 |
| ·序列测定 | 第73页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)感受态制备 | 第73页 |
| ·Cpcβ的诱导表达 | 第73页 |
| ·生物信息学分析 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-83页 |
| ·表达载体构建 | 第73页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第73-74页 |
| ·生物信息学分析 | 第74-83页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第76-77页 |
| ·Cpcβ的疏水性分析 | 第77-78页 |
| ·发菜藻蓝蛋白β亚基二级结构预 | 第78-81页 |
| ·藻蓝蛋白β亚基三维结构预测 | 第81-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| ·原核表达 | 第83页 |
| ·生物信息学分析 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 附表 | 第88-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
