| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-47页 |
| 1.1 系统性真菌感染及常用抗真菌药物 | 第11-14页 |
| 1.1.1 多烯类药物 | 第12页 |
| 1.1.2 唑类药物 | 第12-13页 |
| 1.1.3 氟胞嘧啶 | 第13页 |
| 1.1.4 棘白菌素类药物 | 第13-14页 |
| 1.2 多烯类抗生素的化学结构特征及作用机制 | 第14-21页 |
| 1.2.1 多烯类抗生素的化学结构特征 | 第14-17页 |
| 1.2.2 多烯类抗生素的活性及毒性作用机制 | 第17-21页 |
| 1.3 多烯类抗生素的生物合成途径 | 第21-26页 |
| 1.3.1 多烯类抗生素的PKS合成途径 | 第21-23页 |
| 1.3.2 多烯类抗生素的PKS后修饰途径 | 第23-26页 |
| 1.4 多烯类抗生素的结构改造 | 第26-37页 |
| 1.4.1 PKS起始模块基因改造获得多烯衍生物 | 第26-29页 |
| 1.4.2 PKS延伸模块基因改造获得多烯衍生物 | 第29-31页 |
| 1.4.3 PKS后修饰P450 基因改造获得多烯衍生物 | 第31-34页 |
| 1.4.4 PKS后修饰糖基配体改造获得多烯衍生物 | 第34-37页 |
| 1.5 多烯类抗生素的产量提高及优化 | 第37-45页 |
| 1.5.1 多烯类抗生素生物合成调控机制 | 第37-40页 |
| 1.5.2 多烯类抗生素的产量提高 | 第40-43页 |
| 1.5.3 多烯类抗生素的组分构成优化 | 第43-45页 |
| 1.6 匹马霉素研究现状及本论文研究内容 | 第45-47页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第47-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-53页 |
| 2.2 实验方法 | 第53-58页 |
| 第三章 新型低毒匹马霉素衍生物的基因工程创制 | 第58-106页 |
| 3.1 基因scnG失活导致三种新型匹马霉素衍生物的产生 | 第59-70页 |
| 3.1.1 P450 单加氧酶基因scnG的定点失活 | 第59-62页 |
| 3.1.2 scnG失活突变株产生三种匹马霉素衍生物 | 第62-66页 |
| 3.1.3 匹马霉素衍生物1、2及3 的结构鉴定与分析 | 第66-70页 |
| 3.2 匹马霉素衍生物1、2及3 的生物合成机制解析 | 第70-99页 |
| 3.2.1 衍生物2 的生物合成机制解析 | 第70-80页 |
| 3.2.2 衍生物3 的生物合成机制解析 | 第80-90页 |
| 3.2.3 推测的衍生物1、2及3 的生物合成途径 | 第90-92页 |
| 3.2.4 ScnG催化的环外羧基化可能发生在链释放之前 | 第92-99页 |
| 3.3 匹马霉素衍生物1、2及3 的生物活性分析 | 第99-103页 |
| 3.4 匹马霉素构效关系解析 | 第103-105页 |
| 3.5 本章小结 | 第105-106页 |
| 第四章 低毒匹马霉素衍生物1或2的定向高产 | 第106-134页 |
| 4.1 PKS基因scnS4 过表达无法消除副产物3 的产生 | 第106-110页 |
| 4.2 DH12-KR12 双结构域替换完全消除副产物3 的产生 | 第110-122页 |
| 4.2.1 DH12 结构域替换无法消除副产物3 的产生 | 第110-114页 |
| 4.2.2 DH12-KR12 双结构域替换消除副产物3 的产生 | 第114-118页 |
| 4.2.3 两侧linker区域对结构域替换效果的影响 | 第118-122页 |
| 4.3 低毒匹马霉素衍生物1或2 的定向高产 | 第122-132页 |
| 4.3.1 低毒匹马霉素衍生物2 的定向高产 | 第123-125页 |
| 4.3.2 高效低毒匹马霉素衍生物1 的定向高产 | 第125-132页 |
| 4.4 本章小结 | 第132-134页 |
| 第五章 基于TE结构域理性改造的低毒匹马霉素衍生物高产 | 第134-151页 |
| 5.1 TE结构域的初步同源建模及定点突变 | 第134-142页 |
| 5.1.1 TE结构域的初步同源建模与理性设计 | 第135-137页 |
| 5.1.2 TE结构域定点突变产生匹马霉素聚酮链中间体 | 第137-142页 |
| 5.2 TE结构域的体外生化分析 | 第142-148页 |
| 5.2.1 TE结构域模拟底物的化学衍生 | 第142-145页 |
| 5.2.2 TE结构域体外生化分析体系的建立 | 第145-148页 |
| 5.3 基于TE结构域理性改造的低毒匹马霉素衍生物高产 | 第148-149页 |
| 5.4 本章小结 | 第149-151页 |
| 第六章 总结与展望 | 第151-154页 |
| 6.1 本论文研究工作总结 | 第151页 |
| 6.2 本论文研究工作创新点 | 第151-152页 |
| 6.3 本论文研究工作展望 | 第152-154页 |
| 参考文献 | 第154-169页 |
| 致谢 | 第169-171页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文及国家发明专利 | 第171-172页 |
| 附录 本论文所鉴定匹马霉素衍生物的核磁图谱 | 第172-185页 |
