寒地粳稻生物反应器建立及FGF21蛋白表达效果研究
| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-39页 |
| 1.1 植物生物反应器研究进展 | 第15-26页 |
| 1.1.1 PMF生产平台种类 | 第15-17页 |
| 1.1.2 PMF的优点 | 第17-18页 |
| 1.1.3 PMF的技术策略 | 第18-21页 |
| 1.1.4 PMF的临床应用 | 第21-23页 |
| 1.1.5 水稻生物反应器研究进展 | 第23-26页 |
| 1.2 成纤维细胞生长因子21研究进展 | 第26-31页 |
| 1.2.1 FGF21的分子生物学性质 | 第26-28页 |
| 1.2.2 FGF21的生物学作用 | 第28-29页 |
| 1.2.3 FGF21的治疗研究 | 第29-31页 |
| 1.3 FGF21表达体系研究进展 | 第31-33页 |
| 1.3.1 微生物法生产FGF21 | 第31-32页 |
| 1.3.2 植物生物反应器生产FGF21 | 第32-33页 |
| 1.4 植物转录组研究进展 | 第33-34页 |
| 1.5 植物蛋白质组研究进展 | 第34-37页 |
| 1.5.1 蛋白组学分类 | 第35页 |
| 1.5.2 质谱法定量蛋白质的一般性质 | 第35-36页 |
| 1.5.3 相对定量的无标签方法 | 第36-37页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第37-38页 |
| 1.7 本研究技术路线 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-54页 |
| 2.1 水稻再生体系建立 | 第39-40页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 2.2 水稻转化体系建立 | 第40-41页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第40页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第40-41页 |
| 2.3 FGF21在水稻种子中的表达 | 第41-49页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第41页 |
| 2.3.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 2.3.3 实验仪器 | 第42页 |
| 2.3.4 实验方法 | 第42-49页 |
| 2.4 转FGF21水稻种子转录组学研究 | 第49-50页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第49页 |
| 2.4.2 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.5 转FGF21水稻种子蛋白质组学研究 | 第50-54页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 2.5.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-94页 |
| 3.1 水稻再生体系建立 | 第54-63页 |
| 3.2 水稻转化体系建立 | 第63-66页 |
| 3.2.1 菌液浓度的影响 | 第63页 |
| 3.2.2 侵染时间的影响 | 第63页 |
| 3.2.3 共培养时间的影响 | 第63页 |
| 3.2.4 共培养方式的影响 | 第63-65页 |
| 3.2.5 PCR结果 | 第65-66页 |
| 3.3 FGF21在水稻种子中的表达 | 第66-78页 |
| 3.3.1 植物表达载体构建 | 第66页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第66-68页 |
| 3.3.3 转FGF21水稻的鉴定 | 第68-70页 |
| 3.3.4 转FGF21水稻的性状分析 | 第70-71页 |
| 3.3.5 转FGF21水稻的生理分析 | 第71-76页 |
| 3.3.6 转FGF21水稻的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| 3.3.7 转FGF21水稻的扫描电镜分析 | 第77-78页 |
| 3.4 转FGF21水稻种子转录组学研究 | 第78-85页 |
| 3.4.1 序列分析与定位 | 第78-81页 |
| 3.4.2 差异表达基因DEGs分析 | 第81-82页 |
| 3.4.3 DEGs的GO功能分析 | 第82页 |
| 3.4.4 DEGs的KEGG途径富集分析 | 第82页 |
| 3.4.5 DEGs的验证 | 第82-85页 |
| 3.5 转FGF21水稻种子蛋白质组学研究 | 第85-94页 |
| 3.5.1 水稻成熟种子蛋白浓度及电泳检测结果 | 第85-86页 |
| 3.5.2 蛋白质鉴定与定量 | 第86-87页 |
| 3.5.3 肽段、蛋白质鉴定整体分布 | 第87-88页 |
| 3.5.4 鉴定蛋白质的KOG注释 | 第88-89页 |
| 3.5.5 差异蛋白分析 | 第89页 |
| 3.5.6 差异蛋白的GO富集分析 | 第89-91页 |
| 3.5.7 差异蛋白的pathway富集分析 | 第91页 |
| 3.5.8 荧光定量(qRT-PCR)分析 | 第91-92页 |
| 3.5.9 Western blot分析 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-109页 |
| 4.1 水稻再生及转化体系建立 | 第94-96页 |
| 4.1.1 水稻再生体系建立 | 第94-96页 |
| 4.1.2 水稻转化体系建立 | 第96页 |
| 4.2 FGF21在水稻种子中的表达 | 第96-97页 |
| 4.3 转FGF21水稻种子转录组学分析 | 第97-104页 |
| 4.3.1 淀粉和蔗糖代谢 | 第97-100页 |
| 4.3.2 植物-病原体相互作用 | 第100-101页 |
| 4.3.3 内吞作用 | 第101-102页 |
| 4.3.4 戊糖和葡萄糖醛酸相互转化 | 第102-103页 |
| 4.3.5 半乳糖代谢 | 第103-104页 |
| 4.4 转FGF21水稻种子蛋白质组学分析 | 第104-107页 |
| 4.4.1 淀粉和蔗糖代谢 | 第104-105页 |
| 4.4.2 氨基糖与核糖代谢 | 第105-107页 |
| 4.5 本研究的创新点… | 第107-108页 |
| 4.6 下一步工作展望 | 第108-109页 |
| 5 结论 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-132页 |
| 附录 | 第132-134页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第134页 |
