| 中文摘要1 | 第6-7页 |
| 英文摘要1 | 第7-8页 |
| 中文摘要2 | 第8-10页 |
| 英文摘要2 | 第10-16页 |
| 缩略表 | 第16-20页 |
| 第一部分 DNA甲基化转移酶对食蟹猴胚胎干细胞的作用 | 第20-63页 |
| 第一章 绪论 | 第20-27页 |
| 1.1 DNA甲基化和表观遗传 | 第20-21页 |
| 1.2 DNA甲基化在胚胎干细胞中的模式 | 第21-22页 |
| 1.3 DNA甲基化在胚胎干细胞中的功能 | 第22-23页 |
| 1.4 DNA甲基化与原始态胚胎干细胞(Naive Pluripotent Stem Cells)的关系 | 第23-24页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第24-27页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第27-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 实验所用细胞系 | 第27页 |
| 2.1.2 实验所用仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验所用试剂与药品 | 第28-30页 |
| 2.1.4 实验所用溶液及培养基的配制 | 第30-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-52页 |
| 2.2.1 MEF细胞培养及Feeder的制备 | 第33-35页 |
| 2.2.2 胚胎干细胞的培养 | 第35-38页 |
| 2.2.2.1 Primed胚胎干细胞的复苏 | 第35-36页 |
| 2.2.2.2 Primed胚胎干细胞的传代 | 第36页 |
| 2.2.2.3 Primed胚胎干细胞的冻存 | 第36页 |
| 2.2.2.4 Naive胚胎干细胞的复苏 | 第36-37页 |
| 2.2.2.5 Naive胚胎干细胞的传代 | 第37-38页 |
| 2.2.2.6 Naive胚胎干细胞的冻存 | 第38页 |
| 2.2.3 CRISPR/Cas9介导的靶向基因敲除质粒的构建 | 第38-46页 |
| 2.2.3.1 靶位点设计及合成 | 第38-39页 |
| 2.2.3.2 敲除载体构建 | 第39-40页 |
| 2.2.3.3 敲除载体构建结果 | 第40-44页 |
| 2.2.3.4 质粒的扩增及提取 | 第44-46页 |
| 2.2.4 CRISPR/Cas9介导的靶向基因敲除质粒电转染实验 | 第46-47页 |
| 2.2.5 细胞免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| 2.2.6 细胞DNA提取 | 第48页 |
| 2.2.7 引物设计及PCR扩增目的片段 | 第48-49页 |
| 2.2.8 核酸电泳实验 | 第49-50页 |
| 2.2.9 细胞蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第50-51页 |
| 2.2.10 Primed胚胎干细胞转化到Nave胚胎干细胞实验 | 第51-52页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第52-62页 |
| 3.1 构建敲除DNMT3A~(-/+)/3B~(-/-)的食蟹猴胚胎干细胞系 | 第52-55页 |
| 3.2 DNMT3A~(-/+)/3B~(-/-)Primed胚胎干细胞到Naive-like胚胎干细胞的转化 | 第55-56页 |
| 3.3 DNMT3A/3B的敲除促进胚胎干细胞的自我更新能力 | 第56-62页 |
| 第四章 结论 | 第62-63页 |
| 第二部分 神经干细胞向放射状胶质细胞转化的研究 | 第63-89页 |
| 第一章 绪论 | 第63-67页 |
| 1.1 神经干细胞的特性及分布 | 第63-64页 |
| 1.2 神经干细胞的干性维持和分化调控机制 | 第64-65页 |
| 1.3 神经干细胞与再生医学 | 第65-66页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第66-67页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第67-75页 |
| 2.1 实验材料 | 第67-71页 |
| 2.1.1 实验所用细胞系 | 第67页 |
| 2.1.2 实验所用仪器 | 第67-68页 |
| 2.1.3 实验所用试剂与药品 | 第68-69页 |
| 2.1.4 实验所用溶液及培养基的配制 | 第69-71页 |
| 2.2 实验方法 | 第71-75页 |
| 2.2.1 神经上皮干细胞(NESCs)的复苏培养 | 第71页 |
| 2.2.2 神经上皮干细胞(NESCs)的传代培养 | 第71-72页 |
| 2.2.3 神经上皮干细胞(NESCs)的冻存 | 第72页 |
| 2.2.4 诱导神经上皮干细胞向RGPCs细胞分化实验 | 第72页 |
| 2.2.5 诱导神经上皮干细胞向神经元细胞分化实验 | 第72页 |
| 2.2.6 AZD6973处理神经上皮干细胞实验 | 第72-73页 |
| 2.2.7 细胞免疫荧光染色 | 第73-74页 |
| 2.2.8 流式分析细胞周期 | 第74-75页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第75-88页 |
| 3.1 诱导神经上皮干细胞向RGPCs分化 | 第75-78页 |
| 3.2 诱导RGPCs向神经元分化 | 第78-79页 |
| 3.3 过渡态RGPCs的代谢差异及信号通路上的异同 | 第79-84页 |
| 3.4 AZD3965处理神经上皮干细胞 | 第84-88页 |
| 第四章 结论 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-95页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第95页 |
