| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 植物以转录因子PHR为中心的磷信号调控网络 | 第12-14页 |
| 1.2 植物参与磷吸收和运输的转运体 | 第14-18页 |
| 1.2.1 植物细胞质膜定位的磷酸盐转运体 | 第14-16页 |
| 1.2.2 植物叶绿体定位的磷酸盐转运体 | 第16页 |
| 1.2.3 植物线粒体和质体定位的磷酸盐转运体 | 第16页 |
| 1.2.4 植物高尔基体定位的磷酸盐转运体 | 第16-17页 |
| 1.2.5 植物液泡膜定位的磷酸盐转运体 | 第17-18页 |
| 1.3 无机磷从根系到地上部的转运 | 第18-19页 |
| 1.4 磷酸盐转运体翻译后水平的调控 | 第19-20页 |
| 1.4.1 伴侣蛋白PHF1 | 第19-20页 |
| 1.4.2 CK2对磷酸盐转运体的调控 | 第20页 |
| 1.5 植物液泡膜蛋白的运输途径 | 第20-23页 |
| 1.5.1 依赖于复合体AP1的运输途径 | 第21-23页 |
| 1.5.2 依赖于复合体AP3的运输途径 | 第23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 水稻中甘油三磷酸转运体的液泡膜定位机理分析 | 第25-37页 |
| 2.1 研究材料 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 水稻种子萌发与溶液培养 | 第25-26页 |
| 2.2.2 水稻总RNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第27页 |
| 2.2.4 载体构建 | 第27-29页 |
| 2.2.5 质粒小量和中量抽提 | 第29-31页 |
| 2.2.6 水稻原生质体瞬时表达 | 第31-33页 |
| 2.2.7 激光共聚焦荧光显微镜观察GFP荧光 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-36页 |
| 2.3.1 OsvGlpT1和OsvGlpT2蛋白定位于液泡膜 | 第33-34页 |
| 2.3.2 OsvGlpT1和OsvGlpT2蛋白液泡膜定位信号突变后异位到细胞质膜 | 第34-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 依赖于COPII复合体的蛋白早期内膜运输 | 第37-50页 |
| 3.1 研究材料 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 Sec24家族基因的系统进化分析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 双分子荧光互补(BiFC)表达载体构建 | 第38-40页 |
| 3.2.3 OsvGlpT1/OsvGlpT2基因氨基酸点突变表达载体构建 | 第40页 |
| 3.2.4 水稻原生质体瞬时表达 | 第40-41页 |
| 3.2.5 农杆菌感受态制备 | 第41页 |
| 3.2.6 农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第41-42页 |
| 3.2.7 激光共聚焦荧光显微镜观察GFP荧光 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3.3.1 Sec24家族系统进化树分析 | 第43-44页 |
| 3.3.2 OsSec24A/B与OsvGlpT1/2互作分析 | 第44-45页 |
| 3.3.3 氨基酸EKD~(268-270)是OsvGlpT1的ER输出信号 | 第45-48页 |
| 3.3.4 OsvGlpT2有与OsvGlpT1不同的ER输出信号 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 OsPHF1协助OsvGlpT2从ER输出到Golgi | 第50-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.2 方法 | 第50-56页 |
| 4.2.1 OsPHF1 CRISPR-Cas9载体构建 | 第50-52页 |
| 4.2.2 农杆菌侵染法介导的水稻遗传转化 | 第52-54页 |
| 4.2.3 突变体材料的鉴定方法 | 第54页 |
| 4.2.4 双分子荧光互补表达载体构建 | 第54-56页 |
| 4.2.5 农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第56页 |
| 4.2.6 激光共聚焦荧光显微镜观察荧光 | 第56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-59页 |
| 4.3.1 Osphf1功能缺失突变体鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3.2 OsPHF1与OsvGlpT1/ OsvGlpT2互作分析 | 第57-58页 |
| 4.3.4 OsPHF1与OsSec24A/OsSec24B互作分析 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论和展望 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
