摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 稻瘟病菌的生活史 | 第12-15页 |
1.1.1 分生孢子的形成与传播 | 第13页 |
1.1.2 孢子萌发 | 第13-14页 |
1.1.3 附着胞的形成 | 第14页 |
1.1.4 侵染 | 第14页 |
1.1.5 再侵染 | 第14-15页 |
1.2 稻瘟病菌相关基因的研究 | 第15页 |
1.3 真菌的有性生殖 | 第15-20页 |
1.3.1 真菌有性生殖的类型及过程 | 第16-18页 |
1.3.2 交配型位点 | 第18-20页 |
1.3.3 交配型位点的作用 | 第20页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
2 稻瘟病菌交配型基因在有性生殖和致病过程中的作用 | 第22-56页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 供试菌株及质粒 | 第22页 |
2.1.2 培养基 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂及仪器 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-43页 |
2.2.1 培养基和缓冲液的配置 | 第24-27页 |
2.2.2 菌株培养及保存 | 第27-28页 |
2.2.3 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因敲除载体及荧光表达载体的构建 | 第28-35页 |
2.2.4 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因缺失突变体的获得 | 第35-37页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第37-40页 |
2.2.6 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因缺失突变体的表型测定 | 第40-42页 |
2.2.7 MAT1-2-1和MAT1-2-2突变体的有性生殖培养 | 第42页 |
2.2.8 MAT1-2-1和MAT1-2-2突变体有性生殖结构染色 | 第42页 |
2.2.9 共聚焦荧光显微镜观察 | 第42-43页 |
2.3 结果分析 | 第43-54页 |
2.3.1 MAT1-2-2基因在70-15菌株内的亚细胞定位 | 第43页 |
2.3.2 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因缺失突变体的获得及验证 | 第43-45页 |
2.3.3 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因缺失突变体的表型分析 | 第45-52页 |
2.3.4 MAT1-2-1和MAT1-2-2基因的动态表达 | 第52-53页 |
2.3.5 MAT1-2-1和MAT1-2-2突变体的有性生殖 | 第53-54页 |
2.4 结论与讨论 | 第54-56页 |
3 稻瘟病菌有性世代的细胞结构的观察-荧光标记法 | 第56-66页 |
3.1 材料 | 第56-57页 |
3.1.1 供试菌株及质粒 | 第56页 |
3.1.2 主要试剂 | 第56页 |
3.1.3 主要仪器 | 第56-57页 |
3.2 方法 | 第57-59页 |
3.2.1 主要试剂及培养基的配制 | 第57页 |
3.2.2 荧光融合蛋白菌株的获得与筛选 | 第57页 |
3.2.3 菌株有性世代的诱导 | 第57-58页 |
3.2.4 BODIPY、尼罗红和卡氏白染色 | 第58页 |
3.2.5 共聚焦荧光显微镜观察 | 第58-59页 |
3.3 结果分析 | 第59-63页 |
3.3.1 pKD9-mcherry和pBMG在稻瘟病菌有性世代的表达 | 第59-60页 |
3.3.2 荧光显微镜下观察核定位菌株的子囊壳及子囊孢子 | 第60-61页 |
3.3.3 过氧化物酶体定位菌株的子囊及子囊孢子的观察 | 第61-62页 |
3.3.4 子囊与子囊孢子的BODIPY、尼罗红及卡氏白染色 | 第62-63页 |
3.4 结论与讨论 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 缩略词 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
浙江师范大学学位论文诚信承诺书 | 第77页 |