| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 日本脑炎病毒 | 第11-14页 |
| 1.1.1 乙型脑炎临床特征 | 第11页 |
| 1.1.2 乙型脑炎的地理分布与传播途径 | 第11-12页 |
| 1.1.3 乙脑病毒的结构与生命周期 | 第12-13页 |
| 1.1.4 乙型脑炎的诊断方法与预防控制 | 第13-14页 |
| 1.2 Foxo转录因子概述 | 第14-15页 |
| 1.3 STAT3转录因子概述 | 第15-17页 |
| 1.4 细胞衰老研究进展 | 第17-19页 |
| 第二章 JEV通过抑制Foxo信号通路诱导细胞凋亡 | 第19-34页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 细胞系材料 | 第19页 |
| 2.2.2 病毒株材料 | 第19页 |
| 2.2.3 试剂 | 第19-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.3.1 细胞培养与病毒扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.2 病毒滴度测定(TCID50法) | 第22页 |
| 2.3.3 RT-PCR | 第22-24页 |
| 2.3.4 细胞毒性试验(MTT法) | 第24页 |
| 2.3.5 脂质体转染试验 | 第24-25页 |
| 2.3.6 siRNA转染试验 | 第25页 |
| 2.3.7 免疫印迹试验 | 第25-27页 |
| 2.3.8 荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-32页 |
| 2.4.1 JEV下调Foxo信号通路凋亡相关基因的表达 | 第28-29页 |
| 2.4.2 Foxo表达水平变化对病毒增殖无影响 | 第29-30页 |
| 2.4.3 JEV通过下调Foxo信号通路的抗凋亡基因Bcl-6和p21表达促进凋亡 | 第30-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 JEV通过降低STAT3表达下调Foxo | 第34-43页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34页 |
| 3.2.1 细胞系材料 | 第34页 |
| 3.2.2 病毒株材料 | 第34页 |
| 3.2.3 试剂 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.3.1 转录因子结合位点软件预测 | 第34-35页 |
| 3.3.2 siRNA转染 | 第35页 |
| 3.3.3 蛋白免疫印迹实验 | 第35页 |
| 3.3.4 磷酸化蛋白免疫印迹实验 | 第35-36页 |
| 3.3.5 荧光定量PCR | 第36页 |
| 3.3.6 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第36-38页 |
| 3.3.7 双荧光素酶报告基因实验 | 第38-39页 |
| 3.4 实验结果 | 第39-42页 |
| 3.4.1 乙脑病毒感染下调STAT3表达 | 第39-40页 |
| 3.4.2 JEV感染下调STAT3蛋白与Foxo启动子的结合 | 第40-41页 |
| 3.4.3 STAT3沉默下调Foxo蛋白表达 | 第41-42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 JEV通过内质网应激诱导细胞衰老研究 | 第43-50页 |
| 4.1 前言 | 第43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43页 |
| 4.2.1 细胞系材料 | 第43页 |
| 4.2.2 病毒株材料 | 第43页 |
| 4.2.3 试剂盒 | 第43页 |
| 4.2.4 试剂 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第43页 |
| 4.3.2 细胞处理 | 第43-44页 |
| 4.3.3 β-gal染色 | 第44页 |
| 4.3.4 流式细胞术检测活性氧水平 | 第44-45页 |
| 4.3.5 蛋白免疫实验 | 第45页 |
| 4.4 实验结果 | 第45-48页 |
| 4.4.1 JEV感染引起促进细胞衰老的p21和p53蛋白表达升高 | 第45页 |
| 4.4.2 β-gal染色实验证实JEV感染诱导细胞衰老 | 第45-46页 |
| 4.4.3 JEV感染诱导细胞内ROS水平升高 | 第46-47页 |
| 4.4.4 JEV感染激活内质网应激反应的Ca~(2+)信号诱导ROS水平升高 | 第47页 |
| 4.4.5 JEV通过内质网应激反应的Ca~(2+)信号诱导细胞衰老 | 第47-48页 |
| 4.5 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 小结 | 第50-52页 |
| 在校期间完成的其他工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 在校期间发表的论文 | 第61页 |
