| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第14-30页 |
| 第一章 卵泡发育与胚胎附植的调节 | 第14-30页 |
| 1.1 卵泡发育以及闭锁的调节 | 第15-17页 |
| 1.1.1 卵泡发育的调节 | 第15-16页 |
| 1.1.2 卵泡闭锁的调节 | 第16-17页 |
| 1.2 子宫内膜基质细胞蜕膜化的研究 | 第17-19页 |
| 1.2.1 胚胎附植 | 第17-18页 |
| 1.2.2 蜕膜化的调节 | 第18-19页 |
| 1.3 类固醇激素与胚胎附植 | 第19-21页 |
| 1.3.1 雌激素合成及其调节作用 | 第19页 |
| 1.3.2 孕激素合成及其调节作用 | 第19-21页 |
| 1.4 环境雌激素类似物对雌性动物生殖的影响 | 第21-22页 |
| 1.4.1 环境中的雌激素类似物 | 第21页 |
| 1.4.2 双酚A | 第21-22页 |
| 1.4.3 双酚A对雌性动物生殖的影响 | 第22页 |
| 1.5 内质网应激研究进展 | 第22-25页 |
| 1.5.1 内质网应激概况 | 第22-24页 |
| 1.5.2 内质网应激与细胞凋亡反应 | 第24-25页 |
| 1.5.3 内质网应激与雌性哺乳动物生殖 | 第25页 |
| 1.6 Luman研究进展 | 第25-30页 |
| 1.6.1 CREB3蛋白家族 | 第26-27页 |
| 1.6.2 Luman的功能 | 第27-28页 |
| 1.6.3 Luman与雌性哺乳动物生殖 | 第28-30页 |
| 试验研究 | 第30-89页 |
| 第二章 小鼠Luman基因shRNA慢病毒载体构建和病毒包装 | 第30-41页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-36页 |
| 2.2.1 小鼠Luman基因慢病毒载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.2.2 shLuman干扰慢病毒的包装 | 第33-34页 |
| 2.2.3 shLuman干扰慢病毒滴度测定 | 第34-35页 |
| 2.2.4 shLuman干扰片段的筛选 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 2.3.1 Luman慢病毒干扰载体的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.2 shLuman干扰慢病毒包装 | 第37-38页 |
| 2.3.3 shLuman干扰慢病毒滴度测定 | 第38页 |
| 2.3.4 shLuman干扰慢病毒转导NIH3T3细胞 | 第38-39页 |
| 2.3.5 shLuman慢病毒干扰效率筛选 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 干扰Luman对小鼠颗粒细胞功能的影响 | 第41-57页 |
| 3.1 材料及仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第42页 |
| 3.2 方法 | 第42-47页 |
| 3.2.1 实验小鼠的超数排卵 | 第42页 |
| 3.2.2 小鼠颗粒细胞体外培养 | 第42-43页 |
| 3.2.3 慢病毒的包装 | 第43页 |
| 3.2.4 shLuman干扰慢病毒在颗粒细胞中干扰效率的检测 | 第43页 |
| 3.2.5 颗粒细胞全蛋白提取和western blot检测 | 第43页 |
| 3.2.6 颗粒细胞RNA提取和RT-qPCR检测 | 第43-45页 |
| 3.2.7 细胞免疫荧光 | 第45页 |
| 3.2.8 ELISA检测小鼠颗粒细胞E2和P4的分泌 | 第45-46页 |
| 3.2.9 流式细胞术检测颗粒细胞周期 | 第46页 |
| 3.2.10 流式细胞术检测颗粒细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-54页 |
| 3.3.1 原代小鼠颗粒细胞的分离培养 | 第47页 |
| 3.3.2 慢病毒转导小鼠颗粒细胞效率检测 | 第47-48页 |
| 3.3.3 总RNA质量鉴定 | 第48页 |
| 3.3.4 shLuman慢病毒转导颗粒细胞干扰效率检测 | 第48-49页 |
| 3.3.5 干扰Luman对小鼠颗粒细胞激素分泌以及相关因子的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.6 干扰Luman对小鼠颗粒细胞周期以及相关因子的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.7 干扰Luman对小鼠颗粒细胞凋亡以及相关因子的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.8 干扰Luman对小鼠颗粒细胞功能的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 Luman干扰后小鼠子宫内细胞蜕膜化差异基因的筛选 | 第57-78页 |
| 4.1 材料及仪器 | 第57-58页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第57页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第57-58页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第58页 |
| 4.2 方法 | 第58-61页 |
| 4.2.1 小鼠合笼处理 | 第58页 |
| 4.2.2 小鼠原代子宫内膜基质细胞的分离与培养 | 第58-59页 |
| 4.2.3 细胞免疫荧光检测 | 第59页 |
| 4.2.4 shLuman慢病毒转导原代基质细胞并对其进行体外诱导蜕膜化 | 第59页 |
| 4.2.5 转录组测序及分析 | 第59-61页 |
| 4.2.6 Luman直接调控基因的鉴定 | 第61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-74页 |
| 4.3.1 小鼠原代子宫内膜基质细胞的分离与培养 | 第61-62页 |
| 4.3.2 小鼠原代子宫内膜基质细胞纯度鉴定 | 第62页 |
| 4.3.3 小鼠原代子宫内膜基质细胞的体外诱导蜕膜化 | 第62-63页 |
| 4.3.4 小鼠原代子宫内膜基质细胞体外成功诱导蜕膜化的鉴定 | 第63-64页 |
| 4.3.5 Luman在体外诱导蜕膜化的基质细胞中的表达 | 第64-66页 |
| 4.3.6 shLuman慢病毒转导原代基质细胞干扰效率鉴定 | 第66页 |
| 4.3.7 shLuman慢病毒转导基质细胞对蜕膜化的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.8 干扰Luman,蜕膜基质细胞转录组变化 | 第67-68页 |
| 4.3.9 RNA-seq数据的验证 | 第68-69页 |
| 4.3.10 干扰Luman对蜕膜化基质细胞内质网应激相关基因的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.11 干扰Luman对基质细胞蜕膜化功能相关基因表达的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.12 干扰Luman对蜕膜化基质细胞周期的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.13 Luman对蜕膜化基质细胞作用信号通路分析 | 第72-73页 |
| 4.3.14 Luman调控基因的预测 | 第73-74页 |
| 4.4 讨论 | 第74-77页 |
| 4.5 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 Luman在BPA影响蜕膜细胞功能变化中的调节作用 | 第78-89页 |
| 5.1 材料及仪器 | 第78-79页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第78页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第78-79页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第79页 |
| 5.2 方法 | 第79-80页 |
| 5.2.1 小鼠子宫内膜基质细胞的分离、培养以及体外蜕膜诱导 | 第79页 |
| 5.2.2 BPA对小鼠子宫内膜基质细胞活力的影响 | 第79页 |
| 5.2.3 BPA处理蜕膜细胞 | 第79-80页 |
| 5.2.4 shLuman慢病毒转导小鼠子宫内膜蜕膜细胞 | 第80页 |
| 5.3 结果与分析 | 第80-87页 |
| 5.3.1 BPA对小鼠子宫内膜蜕膜细胞活力的影响 | 第80-81页 |
| 5.3.2 BPA对基质细胞增殖的影响 | 第81页 |
| 5.3.3 BPA对蜕膜细胞功能的影响 | 第81-82页 |
| 5.3.4 BPA对蜕膜细胞中内质网应激相关基因的的影响 | 第82-84页 |
| 5.3.5 BPA对蜕膜细胞中Luman表达的影响 | 第84-85页 |
| 5.3.6 Luman干扰效率检测 | 第85页 |
| 5.3.7 干扰Luman后BPA对蜕膜功能的影响 | 第85-87页 |
| 5.4 讨论 | 第87-88页 |
| 5.5 小结 | 第88-89页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 创新点 | 第90-91页 |
| 下一步研究计划 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 作者简介 | 第105-106页 |
