| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| LIST OF ABBREVIATIONS | 第12-13页 |
| Chapter 1. LITERATURE REVIEW | 第13-40页 |
| 1.1 Introduction of brown planthopper,Nilaparvata lugens (St?l) (Hemiptera:Delphacidae) | 第13-20页 |
| 1.1.1 Symptoms and mode of damage of brown planthopper | 第17-18页 |
| 1.1.2 Biology of brown planthopper (BPH) Nilaparvata lugens (St?l) | 第18页 |
| 1.1.3 Factors affecting BPH growth | 第18-19页 |
| 1.1.4 Routes of BPH migration | 第19-20页 |
| 1.2 Insect chemosensory system | 第20-23页 |
| 1.2.1 Anatomy and physiology of olfactory processing in insects | 第20-21页 |
| 1.2.2 Insect olfaction | 第21-22页 |
| 1.2.3 The insect olfactory system and selection of host plants | 第22-23页 |
| 1.3 Soluble olfactory proteins in insects | 第23-25页 |
| 1.3.1 Odorant binding proteins (OBPs) | 第24页 |
| 1.3.2 Chemosensory proteins (CSPs) | 第24-25页 |
| 1.4 Functions of chemosensory proteins | 第25-31页 |
| 1.4.1 Chemosensory organs:Detecting chemosignals | 第25-27页 |
| 1.4.2 Pheromone glands and releasing semiochemicals | 第27-28页 |
| 1.4.3 Development and regeneration | 第28-29页 |
| 1.4.4 Nutrition | 第29页 |
| 1.4.5 Transporters of visual pigments | 第29-30页 |
| 1.4.6 Insecticide resistant | 第30-31页 |
| 1.5 RNA interference | 第31-38页 |
| 1.5.1 Mechanism of RNAi | 第32-33页 |
| 1.5.2 Involvement of RNAi in insect pest management | 第33-35页 |
| 1.5.3 RNAi treats and prevents beneficial insects against parasites and diseases | 第35-36页 |
| 1.5.4 Variable sensitivity and risk posed by RNAi-based technologies | 第36-38页 |
| 1.6 Aim of the study | 第38-40页 |
| Chapter 2. Molecular and functional characterization of NlugCSP3,a chemosensory protein from Nilaparvata lugens | 第40-80页 |
| 2.1 Introduction | 第40-42页 |
| 2.2 Materials and Methods | 第42-59页 |
| 2.2.1 Important laboratory instruments, reagents and kits | 第42-43页 |
| 2.2.2 Insect rearing and tissue collection | 第43-44页 |
| 2.2.3 RNA extraction | 第44-45页 |
| 2.2.4 First strand cDNA synthesis | 第45-46页 |
| 2.2.5 Polymerase chain reaction (PCR) | 第46页 |
| 2.2.6 Purification of PCR products | 第46-48页 |
| 2.2.7 NlugCSP3 sequence analysis and construction of phylogenetic tree | 第48页 |
| 2.2.8 Quantitative RT-PCR | 第48-49页 |
| 2.2.9 NlugCSP3 expression vector system construction | 第49-53页 |
| 2.2.10 Recombinant protein expression and purification | 第53-54页 |
| 2.2.11 Fluorescence-binding assays | 第54-56页 |
| 2.2.12 3D modeling of NlugCSP3 and ligand docking | 第56-57页 |
| 2.2.13 H-tube olfactometer test | 第57-58页 |
| 2.2.14 Fluorescence quenching measurement | 第58页 |
| 2.2.15 Statistical analyses | 第58-59页 |
| 2.3 Results | 第59-76页 |
| 2.3.1 Characteristics and sequence analysis of NlugCSP3 | 第59-62页 |
| 2.3.2 Expression profiles of NlugCSP3 | 第62-63页 |
| 2.3.3 NlugCSP3 gene cloning and sequencing | 第63-64页 |
| 2.3.4 Recombinant protein expression and purification | 第64页 |
| 2.3.5 Binding study of NlugCSP3 | 第64-68页 |
| 2.3.6 Structural modeling and molecular docking of NlugCSP3 with different ligands | 第68-72页 |
| 2.3.7 Screening of behaviorally active compounds | 第72-73页 |
| 2.3.8 Fluorescence quenching assays of NlugCSP3 | 第73-76页 |
| 2.4 Discussion | 第76-79页 |
| 2.5 Conclusions | 第79-80页 |
| Chapter 3. Molecular and functional characterization of NlugCSP8,a chemosensory protein from Nilaparvata lugens | 第80-113页 |
| 3.1 Introduction | 第80-82页 |
| 3.2 Materials and Methods | 第82-91页 |
| 3.2.1 Insect rearing and tissue collection | 第82页 |
| 3.2.2 RNA extraction and cDNA synthesis | 第82-83页 |
| 3.2.3 Polymerase chain reaction (PCR) and purification of PCR products | 第83页 |
| 3.2.4 NlugCSP8 sequence analyses and construction of phylogenetic tree | 第83页 |
| 3.2.5 Quantitative RT-PCR | 第83页 |
| 3.2.6 NlugCSP8 expression vector system construction | 第83页 |
| 3.2.7 Recombinant protein expression and purification | 第83页 |
| 3.2.8 Fluorescence-binding assays | 第83页 |
| 3.2.9 Double-stranded RNA synthesis | 第83-86页 |
| 3.2.10 dsRNA injection and analysis of gene silencing | 第86-89页 |
| 3.2.11 Olfactory behavioral assays | 第89-90页 |
| 3.2.12 Molecular modeling and ligand docking | 第90页 |
| 3.2.13 Statistical analyses | 第90-91页 |
| 3.3 Results | 第91-108页 |
| 3.3.1 Characterization and homology analysis of the NlugCSP8 | 第91-94页 |
| 3.3.2 Expression patterns of NlugCSP8 | 第94-96页 |
| 3.3.3 NlugCSP8 gene cloning | 第96页 |
| 3.3.4 Recombinant protein expression and purification | 第96-97页 |
| 3.3.5 Fluorescence binding assays | 第97-99页 |
| 3.3.6 Behavioral trials | 第99-101页 |
| 3.3.7 Behavioral analysis after NlugCSP8 mRNA expression profile silencing by ds RNA | 第101-103页 |
| 3.3.8 Three-dimensional structure modeling and molecular docking | 第103-108页 |
| 3.4 Discussion | 第108-112页 |
| 3.5 Conclusions | 第112-113页 |
| Chapter 4. Molecular and functional characterization of NlugCSP10,a chemosensory protein from Nilaparvata lugens | 第113-138页 |
| 4.1 Introduction | 第113-115页 |
| 4.2 Materials and Methods | 第115-118页 |
| 4.2.1 Insect rearing | 第115页 |
| 4.2.2 RNA extraction and cDNA synthesis | 第115页 |
| 4.2.3 Polymerase chain reaction (PCR) and purification of PCR products | 第115页 |
| 4.2.4 NlugCSP10 sequence analyses and construction of phylogenetic tree | 第115页 |
| 4.2.5 Insect collection and quantitative RT-PCR | 第115-116页 |
| 4.2.6 NlugCSP10 expression vector system construction | 第116页 |
| 4.2.7 Recombinant protein expression and purification | 第116页 |
| 4.2.8 Fluorescence-binding assays | 第116页 |
| 4.2.9 Double-stranded RNA synthesis | 第116页 |
| 4.2.10 ds RNA injection and analysis of gene silencing | 第116页 |
| 4.2.11 Olfactory behavioral assays | 第116页 |
| 4.2.12 Three-dimensional structure modeling and molecular docking | 第116页 |
| 4.2.13 Statistical analyses | 第116-118页 |
| 4.3 Results | 第118-132页 |
| 4.3.1 Identification and characterization of NlugCSP10 | 第118-121页 |
| 4.3.2 Developmental expression patterns of NlugCSP10 m RNA | 第121-122页 |
| 4.3.3 NlugCSP10 gene cloning | 第122页 |
| 4.3.4 Prokaryotic expression of NlugCSP10 | 第122-123页 |
| 4.3.5 Ligand-binding assays of the NlugCSP10 | 第123-127页 |
| 4.3.6 3D structure modeling of NlugCSP10 | 第127-129页 |
| 4.3.7 Interaction analysis and binding orientation of selected ligands with NlugCSP10 | 第129-131页 |
| 4.3.8 Behavioral trials | 第131页 |
| 4.3.9 Behavioral analysis after silencing of NlugCSP10 by RNAi | 第131-132页 |
| 4.4 Discussion | 第132-137页 |
| 4.5 Conclusions | 第137-138页 |
| Chapter 5. Summary and future directions | 第138-142页 |
| References | 第142-177页 |
| Publications | 第177-178页 |
| Acknowledgements | 第178-180页 |
